KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Türk Doğa ve Fen Dergisi / 2023 / Cilt: 12 - Sayı: 1

Glutatyon S-Transferaz Enziminin Tavuk Karaciğerinden Saflaştırılması ve Karakterizasyonu

Purification and Charcterızatıon Glutathione S-Transferase Enzyme From Chicken Liver

Hakan YILMAZ
Mehmet ÇİFTCİ
Yusuf TEMEL
Sayfa
117–124
Yayın Tarihi
2023-03-27
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Enzimin GSH substratı için KM değeri 0,802 mM, Vmax değeri 1,833 EÜ/mL; CDNB için de KM değeri 3,6 mM ve Vmax değeri 2,829 EÜ/mL olarak hesaplandı.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Bu çalışmada glutatyon S-transferaz enzimi (GST; EC 2.5.1.18) tavuk karaciğerinden amonyum sülfat çöktürmesi ve glutatyon-agaroz afinite kromatografisinden yararlanılarak 8,35 EÜ/mL spesifik aktivitesine sahip olan enzim, %8 verimle 24,56 kat saflaştırıldı.
📊
Temel Bulgular & Veri:Alt birimin molekül kütlesi yaklaşık olarak 30,9 kDa olarak hesaplandı.
💡
Sonuç & Katkı:Enzimin GSH substratı için KM değeri 0,802 mM, Vmax değeri 1,833 EÜ/mL; CDNB için de KM değeri 3,6 mM ve Vmax değeri 2,829 EÜ/mL olarak hesaplandı.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Glutatyon S-transferaz · tavuk karaciğeri · saflaştırma.

Özet

Bu çalışmada glutatyon S-transferaz enzimi (GST; EC 2.5.1.18) tavuk karaciğerinden amonyum sülfat çöktürmesi ve glutatyon-agaroz afinite kromatografisinden yararlanılarak 8,35 EÜ/mL spesifik aktivitesine sahip olan enzim, %8 verimle 24,56 kat saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin saflığının kontrol edilmesi maksadıyla SDS-PAGE işlemi yapıldı ve tek bant elde edildi. Alt birimin molekül kütlesi yaklaşık olarak 30,9 kDa olarak hesaplandı. Ayrıca enzimin optimum pH değeri (Tris-HCl içinde 8,5); optimum iyonik şiddeti (Tris-HCl ile 150 mM); optimum sıcaklığı (70 oC); stabil pH değeri (Tris-HCl ile 8,5) tespit edildi. Enzimin GSH substratı için KM değeri 0,802 mM, Vmax değeri 1,833 EÜ/mL; CDNB için de KM değeri 3,6 mM ve Vmax değeri 2,829 EÜ/mL olarak hesaplandı.

Abstract

In this study, the glutathione S-transferase enzyme (GST; EC 2.5.1.18) was purified with 8.35 EU/mL specific activity, 24.56 times 8% yield, from chicken liver, using ammonium sulfate precipitation and glutathione-agarose affinity chromatography. In order to control the purity of the enzyme, SDS-PAGE was performed and a single band was obtained. The molecular mass of the subunit was calculated as approximately 30.9 kDa. In addition, the optimum pH value of the enzyme (8.5 in Tris-HCl); optimum ionic strength (150 mM with Tris-HCl); optimum temperature (70 oC); stable pH value (8.5 with Tris-HCl) was determined. The KM value for the GSH substrate of the enzyme was 0.802 mM, the Vmax value was 1.833 EU/mL; For CDNB, the KM value was calculated as 3.6 mM and the Vmax value was calculated as 2.829 EU/mL.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

YILMAZ, H., ÇİFTCİ, M., TEMEL, Y. (2023). Glutatyon S-Transferaz Enziminin Tavuk Karaciğerinden Saflaştırılması ve Karakterizasyonu. Türk Doğa ve Fen Dergisi, Cilt: 12 - Sayı: 1, 117–124. https://ajindex.com/articles/888898

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (10)

  1. Temel Y, Ayna A, Hamdi Shafeeq I, Ciftci M. In vitro effects of some antibiotics on glucose-6-phosphate dehydrogenase from rat (Rattus norvegicus) erythrocyte. Drug Chem. Toxicol. 2020; 43(2): 219-223.
  2. Bayindir S, Ayna A, Temel Y, Ciftci M. The synthesis of new oxindoles as analogs of natural product 3, 3′-bis (indolyl) oxindole and in vitro evaluation of the enzyme activity of G6PD and 6PGD. Turk. J. Chem. 2018;42(2): 332-345.
  3. Bayindir S, Temel Y, Ayna A, Ciftci M. The synthesis of N‐benzoylindoles as inhibitors of rat erythrocyte glucose‐6‐phosphate dehydrogenase and 6‐phosphogluconate dehydrogenase. J. Biochem. Mol. Toxicol. 2018;32(9): e22193. Autrup H. Genetic polymorphism in human xenobiotica matebolizing enzymes as susceptibility factors in toxic response. Mutat. Res. 2000;464: 65-76. Lee WM. Drug-induced hepatotoxicity. N Engl J Med. 2003;349:474-485.
  4. Sheehan D, Meade G, Foley VM, Dowd CA. Structure, function and evolution of glutathione transferases: implications for classification of nonmammalianmembers of an ancient enzyme superfamily. Biochem J. 2001;360:1-16.
  5. Özaslan MS, Demir Y, Küfrevioğlu O I, Çiftci M. Some metals inhibit the glutathione S-transferase from Va Lake fish gills. J Biochem Mol Toxicol. 2017;73:e21967.
  6. Espinoza HM, CR Williams and EP Gallagher. Effect of cadmium on glutathione S-transferase and metallothionein gene expression in Coho Salmon liver, gill and olfactory tissues. Aquat Toxicol. 2012;110: 37-44. Aksoy AS. Bazı flavonoidlerin sığır karaciğer glutatyon stransferaz enzimi üzerine etkilerinin araştırılması. (Yüksek Lisans Tezi), Balıkesir Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Kimya Anabilim Dalı, Balıkesir; 2018.
  7. Hayes JD, Flanagan JU, Jowsey IR. Glutathione transferases. Annu. Rev. Pharmacol Toxicol. 2005;45: 51-88.
  8. Cnubben NHP, Rietjens IMCM, Wortelboer H, van Zanden J, van Bladeren J. The interplay of glutathione-related processes in antioxidant defense. Environ Toxicol Pharmacol. 2001;10:141-152. Armstrong RN. Structure, catalytic mechanism, and evolution of the glutathione transferases. Chem Res Toxicol. 1997;10(1):2-18. Baş O. Dinitrocresol’ün (Rat rattus norvegicus) Sıçan glutatyon S-transferaz enzim aktivitesine etkisi (Yüksek Lisans Tezi) Uludağ Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, Bursa; 2006.
  9. Fleischner GK, Kamisaka IM, Arias IM. Immunoloanalysis of rats and human ligandins. Glutathione: Metabolism and Function, 1976; 229-235.
  10. Toribio F, Martinez-Lara E, Pascual P, Lopez-Barea J. Methods for purification of gl