KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Harran Üniversitesi Mühendislik Dergisi / 2018 / Cilt: 3 - Sayı: 2

Oryctolagus cuniculus Kimozin Enzimini Pichia pastoris Mayasında İfade Edecek Vektörün Dizayn ve Jenerasyonu

SELİN ALİHANOĞLU
Meral ATLI
Hasan VARDİN
Mehmet KARAASLAN
Sayfa
26–34
Yayın Tarihi
2018-10-28
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Elde edilen plazmid DNA' lar elektroporasyon yöntemi ile Pichia pastoris kompetent maya hücrelerine aktarılmış ve aktarılan hücreler çeşitli konsantrasyonlarda antibiyotik içeren besi yerlerine ekilerek hedef geni taşıdıkları doğrulanmıştır.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Bu çalışmada rekombinant tavşan pro-kimozin genini üretmek amacıyla kullanılacak olan pPIC9K-Chy vektörünün dizayn edilmesi ve çoğaltılması hedeflenmektedir.
📊
Temel Bulgular & Veri:Hedef DNA sekansları PIC9K vektörüne EcoRI ve NotI restriksiyon enzimleriyle üzerinden klonlanmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:Elde edilen plazmid DNA' lar elektroporasyon yöntemi ile Pichia pastoris kompetent maya hücrelerine aktarılmış ve aktarılan hücreler çeşitli konsantrasyonlarda antibiyotik içeren besi yerlerine ekilerek hedef geni taşıdıkları doğrulanmıştır.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Tavşan · Kimozin · Pichia pastoris

Özet

Bu çalışmada rekombinant tavşan pro-kimozin genini üretmek amacıyla kullanılacak olan pPIC9K-Chy vektörünün dizayn edilmesi ve çoğaltılması hedeflenmektedir. DNA bilgi bankalarında biyoinformatik analizler yapılarak tavşan pro-kimozin gen dizilimi belirlenmiştir. Elde edilen dizilimlere göre dizayn edilen primerler ile tavşandan genomundan kimozin enzimi izole edilmiştir. Hedef DNA sekansları PIC9K vektörüne EcoRI ve NotI restriksiyon enzimleriyle üzerinden klonlanmıştır. Klonlama işlemi sonrasında hedef geni içeren vektör, JM109 kompetent E. coli hücrelerine ısı şoku uygulamasıyla transforme edilmiş ve antibiyotikli besiyerinde seçilimleri gerçekleştirilmiştir. Antibiyotik pozitif olan tek kolonilerin hedef geni taşıyıp taşımadıkları koloni PZR yöntemiyle doğrulanmış ve E. coli hücrelerinden plazmid DNA’lar ekstrakte edilmiştir. Elde edilen plazmid DNA' lar elektroporasyon yöntemi ile Pichia pastoris kompetent maya hücrelerine aktarılmış ve aktarılan hücreler çeşitli konsantrasyonlarda antibiyotik içeren besi yerlerine ekilerek hedef geni taşıdıkları doğrulanmıştır.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

ALİHANOĞLU, S., ATLI, M., VARDİN, H., KARAASLAN, M. (2018). Oryctolagus cuniculus Kimozin Enzimini Pichia pastoris Mayasında İfade Edecek Vektörün Dizayn ve Jenerasyonu. Harran Üniversitesi Mühendislik Dergisi, Cilt: 3 - Sayı: 2, 26–34. https://ajindex.com/articles/763242

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (1)

  1. .Flamm, E.L., ''How FDA approved chymosin: A case history'', Nature Biotechnology, 9: 349–351, 1991.[2]. Foltmann, B., Pedersen V. B., Jacobsen M., Auffman, D., Wijbrandt G., ''The complete amino acid sequence of prochymosin'', Proc. Nat. Acad. Sci., 74: 2321–4, 1977.[3]. Houen, G., Madsen, M.T., Harlow, K.W., Lønblad, P., Foltmann, B., ''The primary structure and enzymic properties of porcine prochymosin and chymosin'' Int J Biochem Cell Biology. 28(6):667-675, 1996.[4]. Mohanty, A. K., Mukhopadhyay, U. K., Kaushık, J. K., Grover, S., and Batısh, V. K., ''Isolation, purification and characterization of chymosin from riverine buffalo (Bubalus bubalis)'', Journal of Dairy Research, 70(01): 37- 43, 2003.[5]. Rogelj, I., Perko, B., Francky, A., Penca, V., and Pungerčar, J.,'' Recombinant lamb chymosin as an alternative coagulating enzyme in cheese production'', Journal of dairy science, 84(5): 1020-1026, 2001.[6]. Vega-Hernández, M. C., Gómez-Coello, A., Vıllar, J., and Claverıe-Martı́n, F., ''Molecular cloning and expression in yeast of caprine prochymosin'', Journal of biotechnology, 114(1): 69-79, 2004.[7]. Kappeler, S. R., Van Den Brink, H. J., Rahbek- Nielsen, M., Farah, Z., Puhan, Z., Hansen, E., Johansen, E., ''Characterization of recombinant camel chymosin reveals superior properties for the coagulation of bovine and camel milk'', Biochem. Biophys. Res. Commun, 342: 647−654, 2006.[8]. Rao, S., Dutta, S.M., ''Extraction of rennet from abomasum of suckling buffalo calves'', Ind J Dairy Sci., 34 (2): 235–237, 1981.[9]. Manıatıs, T., Frıtsch, E. F., and Sambrook, J., ''Molecular cloning''. A laboratory manual Cold Spring Harbor Laboratory, New York. 545, 1982.