Dergiler / Kocaeli Tıp Dergisi / 2020 / Cilt: 9 - Sayı: 1

Vitamin D3 (1,25(OH)2D3) ile İşlenmiş HL-60 Hücrelerindeki Gen Anlatımının Zamana Karşı Değişiminin Q-RT-PCR ile Analizi

Time Dependent Gene Expression Analysis of Vitamin D3 (1,25 (OH)2 D3) Treated HL–60 Cells by Q-RT-PCR

Sayfa
60–67
Yayın Tarihi
2022-11-05
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

BULGULAR: İncelenen genlerde dramatik düşüş ve yükselişler gözlenmedi.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:GİRİŞ ve AMAÇ: Akut myeloid löseminin (AML) 1alpha,25- dihydroxyvitamin D (3) (1,25(OH)2D3)’ün farklılaştırma etkisiyle tedavisi ön plana çıkan araştırma konularındandır.
📊
Temel Bulgular & Veri:Bu çalışmanın amacı HL-60 hücrelerinde lösemi hücre döngüsü regülasyonu ve apopitozunda 1,25(OH)2D3’ün rolünü araştırmaktır.
💡
Sonuç & Katkı:BULGULAR: İncelenen genlerde dramatik düşüş ve yükselişler gözlenmedi.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

GİRİŞ ve AMAÇ: Akut myeloid löseminin (AML) 1alpha,25- dihydroxyvitamin D (3) (1,25(OH)2D3)’ün farklılaştırma etkisiyle tedavisi ön plana çıkan araştırma konularındandır. Bu çalışmanın amacı HL-60 hücrelerinde lösemi hücre döngüsü regülasyonu ve apopitozunda 1,25(OH)2D3’ün rolünü araştırmaktır. YÖNTEM ve GEREÇLER: Vitamin D ile indüklenmiş HL-60 hücrelerinde ücre döngüsü ve apoptoz ile ilişkili 13 genin (TNFR1, Bcl-w, Bax, Bak, Caspase–6, Caspase–8, AIF, Survivin, Cdk1 (Cdc2), Cdk2, Cdk4, Siklin D1 ve Siklin E) dört farklı zamanda (18, 36, 48, 72. saatler) gen anlatımlarını gerçek zamanlı kantitatif PZR (polimeraz zincir reaksiyonu) yöntemini kullanarak analiz ettik. BULGULAR: İncelenen genlerde dramatik düşüş ve yükselişler gözlenmedi. Deneylerimizde, 72. saatte TNFR1, Cdk-4, Siklin D1, Siklin E ve Survivin genlerinin anlatımında azalma, Kaspaz-8 ve Bak genlerinin anlatımında artma gözlemledik. Hücre döngüsüne bağlı genlerin eğilimi 18. ila 72. saat arasında azalması, HL60 hücrelerinin farklılaştığını düşündürdü. Anti-apoptotik Bcl-w ve Survivin genlerinin ekspresyonunun azalması ve pro-apoptotik Bak ve Caspase-8 genlerinin ekspresyonunun artması, apoptotik işlem aşamasının 72. saatte başladığını gösterdi. TARTIŞMA ve SONUÇ: Sonuç olarak, lösemik HL60 hücre hattının D3 vitaminine maruz bırakılması hücreleri farklılaştırmıştır. Klonal gelişim tamamlanmış ve apoptotik aşama başlamıştır.

Abstract

INTRODUCTION: The treatment of Acute myelogenousleukemia (AML) with differential effect of 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) (1,25(OH)2D3) has been one of thepopular research topics. The aim of this study is to investigatethe role of 1.25 (OH) 2D3 in leukemia cell cycle regulationand apoptosis in HL-60 cells.METHODS: We analyzed 13 genes (TNFR1, Bcl-w, Bax, Bak,Caspase–6, Caspase–8, AIF, Survivin, Cdk1 (Cdc2), Cdk2,Cdk4, Cyclin-D1 and Cyclin-E) for changes in expressionassociated with the cell cycle and the apoptosis of humanpromyelocytic leukemia HL-60 cells induced by 1,25(OH)2D3at 18th, 36th, 48th and 72nd h, using quantitative real-timePCR.RESULTS: We did not find significantly down or up-regulatedexpression profiles at mentioned time points. In ourexperiments, we observed decreased expression of TNFR1,Cdk-4, Cyclin-D1, Cyclin-E and Survivin genes at 72nd hours,and increased expression of Caspase-8 and Bak genes. Thetendency of cell cycle related genes decrease from 18th to 72ndhours suggested that HL60 cells differentiated. Decreasedexpression of anti-apoptotic Bcl-w and Survivin genes andincreased expression of pro-apoptotic Bak and Caspase-8genes suggested that apoptotic process stage starts around72nd hours.DISCUSSION AND CONCLUSION: In conclusion, exposureof leukemic HL60 cell line to vitamin D3 derived the cells intodifferentiation. The clonal development completed andapoptotic stage begun.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

KANLI, A., SAVLI, H., GÜLKAÇ, M. D. (2022). Vitamin D3 (1,25(OH)2D3) ile İşlenmiş HL-60 Hücrelerindeki Gen Anlatımının Zamana Karşı Değişiminin Q-RT-PCR ile Analizi. Kocaeli Tıp Dergisi, Cilt: 9 - Sayı: 1, 60–67. https://ajindex.com/articles/652957

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (13)

  1. Bennett JM, Catovsky D, Daniel MT, et al. Proposals for the classification of the acute leukaemias. French-American-British (FAB) co-operative group. Br J Haematol. Aug 1976;33(4):451-458
  2. Lowenberg B, Downing JR, Burnett A. Acute myeloid leukemia. N Engl J Med. Sep 30 1999;341(14):1051-1062
  3. Tenen DG. Disruption of differentiation in human cancer: AML shows the way. Nat Rev Cancer. Feb 2003;3(2):89-101
  4. Gattei V, Degan M, Aldinucci D, et al. Differential expression of the RET gene in human acute myeloid leukemia. Ann Hematol. Nov 1998;77(5):207- 210
  5. Lococo F, Zelant, A., Kimchi, A., Carducci, M., Gore, S.D. and Waxman, S. Progress in differentiation induction as a treatment for acute promyelocytic leukemia and beyond. Cancer Research. 2002;62:5618 – 5621
  6. Abe E, Miyaura C, Sakagami H, et al. Differentiation of mouse myeloid leukemia cells induced by 1 alpha,25-dihydroxyvitamin D3. Proc Natl Acad Sci U S A. Aug 1981;78(8):4990-4994
  7. Gocek E SG. The Potential of Vitamin DRegulated Intracellular Signaling Pathways as Targets for Myeloid Leukemia Therapy. J Clin Med. 2015;4:504–534 8. Collins SJ. The HL-60 promyelocytic leukemia cell line: proliferation, differentiation, and cellular oncogene expression. Blood. 1987;70:1233-1244
  8. Bar-Shavit Z, Teitelbaum SL, Reitsma P, et al. Induction of monocytic differentiation and bone resorption by 1,25-dihydroxyvitamin D3. Proc Natl Acad Sci U S A. Oct 1983;80(19):5907-5911
  9. Tanaka H, Abe E, Miyaura C, Shiina Y, Suda T. 1 alpha,25-dihydroxyvitamin D3 induces differentiation of human promyelocytic leukemia cells (HL-60) into monocyte-macrophages, but not into granulocytes. Biochem Biophys Res Commun. Nov 30 1983;117(1):86-92
  10. James SY, Williams MA, Newland AC, Colston KW. Leukemia cell differentiation: cellular and molecular interactions of retinoids and vitamin D. Gen Pharmacol. Jan 1999;32(1):143-154
  11. Nowak D, Stewart D, Koeffler HP. Differentiation therapy of leukemia: 3 decades of development. Blood. Apr 16 2009;113(16):3655-3665
  12. Elstner E, Lee YY, Hashiya M, et al. 1 alpha,25-Dihydroxy-20-epi-vitamin D3: an extraordinarily potent inhibitor of leukemic cell growth in vitro. Blood. Sep 15 1994;84(6):1960-1967
  13. Hershberger PA, Modzelewski RA, Shurin ZR, Rueger RM, Trump DL, Johnson CS. 1,25- Dihydroxycholecalciferol (1,25-D3) inhibits the growth of squamous cell carcinoma and downmodulates p21(Waf1/Cip1) in vitro and in vivo. Cancer Res. Jun 1 1999;59(11):2644-2649. 1