Dergiler / Türk Mikrobiyoloji Cemiyeti Dergisi / 2019 / Cilt: 49 - Sayı: 4

Türkiye’den Elde Edilen Leishmania İzolatlarının Kanlı ve Çikolata Agardaki Üremelerinin Değerlendirilmesi

Evaluation of the Reproduction on Blood and Chocolate Agars of Leishmania Isolates Obtained from Turkey

Sayfa
219–225
Yayın Tarihi
2022-11-05
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Logaritmikfaza giren promastigotların çikolata agar ve kanlı agara ekimleri yapılmış ve 25°C’lik etüve kaldırılarak gün aşırı takip edilmiştir.Bulgular: Etüvden çıkarılarak incelenen plaklarda inkübasyonun 7. gününde çikolata agardaherhangi bir koloni oluşumu gözlenmezken, kanlı agarda Leishmania tropica, Leishmania infantum ve Leishmania donovani de koloni büyüklüklerinin ortalama 0.9 mm olduğu, Leishmaniamajor’de ise ortalama 0.8 mm olduğu saptanmıştır.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Amaç: Bu çalışma, Türkiye’den elde edilen Leishmania spp. izolatlarının kanlı agar ve çikolataagardaki koloni oluşumlarının izlenmesi ve farklılıklarının karşılaştırılması, tek bir hücreden oluşan koloni elde edilerek gerektiğinde genetik çalışmalarda kullanılması amacıyla planlanmıştır.Yöntem: Çalışmamızda kullanılan kanlı agar ve çikolata agarın gerekli ön hazırlık aşamaları yapıldıktan sonra steril petri kaplarına dökülmesi ile besiyerleri hazırlanmıştır.
📊
Temel Bulgular & Veri:Leishmaniaspp izolatlarının, ITS1 ve hsp70 bölgesine özgü primer ve problar kullanılarak genotiplendirilmesiyapılmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:Logaritmikfaza giren promastigotların çikolata agar ve kanlı agara ekimleri yapılmış ve 25°C’lik etüve kaldırılarak gün aşırı takip edilmiştir.Bulgular: Etüvden çıkarılarak incelenen plaklarda inkübasyonun 7. gününde çikolata agardaherhangi bir koloni oluşumu gözlenmezken, kanlı agarda Leishmania tropica, Leishmania infantum ve Leishmania donovani de koloni büyüklüklerinin ortalama 0.9 mm olduğu, Leishmaniamajor’de ise ortalama 0.8 mm olduğu saptanmıştır.
🔬Tür:Deneysel Tarla Denemesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Amaç: Bu çalışma, Türkiye’den elde edilen Leishmania spp. izolatlarının kanlı agar ve çikolataagardaki koloni oluşumlarının izlenmesi ve farklılıklarının karşılaştırılması, tek bir hücreden oluşan koloni elde edilerek gerektiğinde genetik çalışmalarda kullanılması amacıyla planlanmıştır.Yöntem: Çalışmamızda kullanılan kanlı agar ve çikolata agarın gerekli ön hazırlık aşamaları yapıldıktan sonra steril petri kaplarına dökülmesi ile besiyerleri hazırlanmıştır. Kullanılan Leishmaniaspp. izolatları üniversitemiz bünyesinde bulunan Parazit Bankası’ndan sağlanmıştır. Leishmaniaspp izolatlarının, ITS1 ve hsp70 bölgesine özgü primer ve problar kullanılarak genotiplendirilmesiyapılmıştır. Türlere göre ayrılan izolatların NNN besiyerinde kültürü yapılmış ve üreyen promastigotlar RPMI 1640 sıvı besiyerlerine aktarılarak logaritmik faza girmeleri beklenmiştir. Logaritmikfaza giren promastigotların çikolata agar ve kanlı agara ekimleri yapılmış ve 25°C’lik etüve kaldırılarak gün aşırı takip edilmiştir.Bulgular: Etüvden çıkarılarak incelenen plaklarda inkübasyonun 7. gününde çikolata agardaherhangi bir koloni oluşumu gözlenmezken, kanlı agarda Leishmania tropica, Leishmania infantum ve Leishmania donovani de koloni büyüklüklerinin ortalama 0.9 mm olduğu, Leishmaniamajor’de ise ortalama 0.8 mm olduğu saptanmıştır. Plaklara yapılan ekimin 28. gününde iseçikolata agarda L. tropica, L. major, L. infantum ve L. donovani’deki ortalama koloni büyüklüklerisırasıyla 1.0 mm, 0.9 mm, 1.0 mm ve 0.8 mm olarak gözlemlenirken, kanlı agardaki koloni büyüklükleri sırasıyla 3.1 mm, 3.1 mm, 3.3 mm ve 3.0 mm olduğu belirlenmiştir.Sonuç: Plaklara yapılan ekimlerin takibi sonucunda tüm suşların 7., 14., 21. ve 28. günlerdekikoloni oluşumlarının kanlı agarda daha hızlı olduğu saptanmıştır. Kanlı agarın Leishmania spp. ileilgili yapılması planlanan genetik çalışmalar ve diğer çalışmalarda kullanılmasının uygun olabileceği sonucuna varılmıştır.

Abstract

Objective: This study was planned with the aim of comparing the reproduction differences of Leishmania isolates, obtained from Turkey, on chocolate and blood agars, colony growth views on agar plates and to attain colonies from single cell to utilize for genetic studies. Method: After preparation of blood agar and chocolate agar used in our study, the media were prepared by pouring into sterile petri dishes. The Leishmania isolates, used, were obtained from the ParasiteBank, located within our university. Genotyping was done by using primers and probes specific to ITS1 and hsp70. The isolates, separated according to species, were cultured in NNN medium and promastigotes were transferred to RPMI-1640 and were expected to enter into logarithmic-phase. Promastigotes entering logarithmic-phase were inoculated on chocolate and blood agar. Plates were transferred to 25°C and were controlled every other day. Results: No growth was observed on chocolate agar on 7th day of incubation on plates, while colony size of Leishmania tropica, Leishmania infantum and Leishmania donovani were found to have an average of 0.9 mm and mean colony size of Leishmania major was 0.8 mm on blood agar, On 28th day of cultivation, average colony size of L. tropica, L. major, L. infantum and L. donovani on chocolate agar was observed as 1.0 mm, 0.9 mm, 1.0 mm and 0.8 mm, respectively, while colony size on blood agar was determined as 3.1 mm, 3.1 mm, 3.3 mm and 3.0 mm, respectively. Conclusion: On 7,14,21,28th days, colony size of all the strains were found to be better and their growth were faster on blood agar. It has been concluded that blood agar may be suitable for reproduction of Leishmania for genetic and other studies planned.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

KAYA, T., ÖZBİLGİN, A., ÇETİN, M., YILDIRIM, A., ASLAN, A., ÖZEL, Y., ÇAVUŞ, İ. (2022). Türkiye’den Elde Edilen Leishmania İzolatlarının Kanlı ve Çikolata Agardaki Üremelerinin Değerlendirilmesi. Türk Mikrobiyoloji Cemiyeti Dergisi, Cilt: 49 - Sayı: 4, 219–225. https://ajindex.com/articles/635821

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (12)

  1. Özbel Y, Töz SÖ. Leishmaniasis. In: Özcel MA, Özbel Y AM. (Eds) Özcel’in Tıbbi Parazit Hastalıkları. İzmir: Türkiye Parazitoloji Derneği; 2007:197-244
  2. Leishmaniasis https://www.who.int/en/news-room/ fact-sheets/detail/leishmaniasis [Erişim tarihi: Şubat 2019] 3. Çavuş İ, Ocak F, Kaya T, Özbilgin A. Manisa ilimizde görülen leishmaniasis etkeni Leishmania türlerinin kriyoprezervasyonu. Turkiye Parazitol Derg. 2017; 41(3):152-5.
  3. Muniaraj M, Gupta AK, Narayan S, et al. Removal of bacterial and yeast contamination from Leishmania promastigote cultures, by agar plating. Ann Trop Med Parasitol. 2005;99(6):617-21.
  4. Muniaraj M, Gupta AK, Narayan S, et al. Preservation of Leishmania donovani promastigotes in blood agar slants. J Commun Dis. 2005;37(3):191-5
  5. Muniaraj M, Das P. Leishmania donovani promastigotes on “chocolate” agar. Ann Trop Med Parasitol. 2008;102(5):451-3
  6. Tai N El, Osman F, Fari M El, Presber W, Schönian G. Genetic heterogeneity of ribosomal internal transcribed spacer in clinical samples of Leishmania donovani spotted on filter paper as revealed by single-strand conformation polymorphisms and sequencing. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2000;94(5):575-9.
  7. Toz SO, Culha G, Zeyrek FY, et al. A real-time ITS1-PCR based method in the diagnosis and species identification of Leishmania parasite from human and dog clinical samples in Turkey. PLoS Negl Trop Dis. 2013;7(5):e2205.
  8. Van der Auwera G, Bart A, Chicharro C, et al. Comparison of Leishmania typing results obtained from 16 European clinical laboratories in 2014. Euro Surveill. 2016;21(49):pii30418
  9. Novy FG. MW. On the cultivation of Trypanosoma brucei. J Infect Dis. 1904;1(1):1-30
  10. Weinman D. Cultivation of Trypanosoma gambiense in vitro in cell-free medium. Proc Sos Exp Biol Med. 1944;55:82-3.
  11. Tobie Ej, Von Brand T, Mehlman B. Cultural and physiological observations on Trypanosoma rhodesiense and Trypanosoma gambiense. J Parasitol. 1950;36(1):48-54
  12. Collins CH, Lyne PM, Grange JM. Collins and Lyne’s Microbiological Methods (Pseudomonas, Acinetobacter, Alcaligenes, Flavobacterium, Chromobacterium and Acetobacter). 1989. http://mmstcchemistry.weebly. com/uploads/2/4/1/