Dergiler / Türkiye Parazitoloji Dergisi / 2018 / Cilt: 42 - Sayı: 4

Koyun Orijinli Polimorf Nükleer Lökositlerde Toxoplasma gondii’ye Karşı Şekillenen Hücre Dışı Tuzağın Kantitatif Analizinde Picogreen ve Sytox Orange Boyalarının Karşılaştırılması

Comparison of Picogreen and Sytox Orange Stains in Quantitative Analysis of Extracellular Trap Formed against Toxoplasma gondii in Polymorphonuclear Leukocytes from Sheep

Sayfa
240–244
Yayın Tarihi
2022-11-05
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Bu amaçla koyun polimorf nükleer lökosit (PMN)-Toxoplasma gondii takizoitkültürü model olarak alınmıştır.Yöntemler: Çalışma kapsamında koyunlardan izole edilen PMN ve T. gondii takizoitleri farklı sürelerde (30, 60, 90 ve 120 dakika) inkübe edilmiş vereaksiyon sonucunda açığa çıkan ekstrasellüler DNA iki farklı boya ile boyanarak ölçülmüştür.Bulgular: Çalışma sonucunda 30 dakikalık inkubasyon dışındaki (p=0,014) inkubasyon sürelerinde açığa çıkan DNA’nın ölçümü bakımından iki boyaarasında istatistiksel fark bulunmamıştır (p>0,05).Sonuç: İki boya arasında 30. dakikadaki boyanma farklılığı önemli bulunmuştur.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Amaç: Bu çalışmada in vitro şekillenen hücre dışı tuzak yapılarının omurgasını oluşturan DNA’nın kantitatif ölçümünde iki ekstrasellüler DNA boyasının(Sytox orange ve Picogreen) etkinliğinin karşılaştırılması amaçlanmıştır.
📊
Temel Bulgular & Veri:Bu amaçla koyun polimorf nükleer lökosit (PMN)-Toxoplasma gondii takizoitkültürü model olarak alınmıştır.Yöntemler: Çalışma kapsamında koyunlardan izole edilen PMN ve T. gondii takizoitleri farklı sürelerde (30, 60, 90 ve 120 dakika) inkübe edilmiş vereaksiyon sonucunda açığa çıkan ekstrasellüler DNA iki farklı boya ile boyanarak ölçülmüştür.Bulgular: Çalışma sonucunda 30 dakikalık inkubasyon dışındaki (p=0,014) inkubasyon sürelerinde açığa çıkan DNA’nın ölçümü bakımından iki boyaarasında istatistiksel fark bulunmamıştır (p>0,05).Sonuç: İki boya arasında 30. dakikadaki boyanma farklılığı önemli bulunmuştur.
💡
Sonuç & Katkı:In vitro netosis çalışan araştırıcıların kısa süreli inkubasyon sonucunda şekillenen ekstrasellüler DNA’nın kantitatif analizindeiki farklı boya kullanmaları önerilmiştir.
🔬Tür:Modelleme & Sayısal Simülasyon
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Amaç: Bu çalışmada in vitro şekillenen hücre dışı tuzak yapılarının omurgasını oluşturan DNA’nın kantitatif ölçümünde iki ekstrasellüler DNA boyasının(Sytox orange ve Picogreen) etkinliğinin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Bu amaçla koyun polimorf nükleer lökosit (PMN)-Toxoplasma gondii takizoitkültürü model olarak alınmıştır.Yöntemler: Çalışma kapsamında koyunlardan izole edilen PMN ve T. gondii takizoitleri farklı sürelerde (30, 60, 90 ve 120 dakika) inkübe edilmiş vereaksiyon sonucunda açığa çıkan ekstrasellüler DNA iki farklı boya ile boyanarak ölçülmüştür.Bulgular: Çalışma sonucunda 30 dakikalık inkubasyon dışındaki (p=0,014) inkubasyon sürelerinde açığa çıkan DNA’nın ölçümü bakımından iki boyaarasında istatistiksel fark bulunmamıştır (p>0,05).Sonuç: İki boya arasında 30. dakikadaki boyanma farklılığı önemli bulunmuştur. Bu durumun sebebinin kullanılan boyaya ait boyama özelliği ile ilgiliolabileceği düşünülmüştür. In vitro netosis çalışan araştırıcıların kısa süreli inkubasyon sonucunda şekillenen ekstrasellüler DNA’nın kantitatif analizindeiki farklı boya kullanmaları önerilmiştir.

Abstract

Objective: The present study aimed to compare the effectiveness of two extracellular DNA dyes (Sytox Orange and PicoGreen) in quantitative measurement of the DNA that forms the backbone of the extracellular trap structures in vitro. Toward this aim, the co-culture of polymorphonuclear leucocytes (PMNs) and Toxoplasma gondii tachyzoites isolated from sheep was selected as model. Methods: T. gondii tachyzoites and PMNs isolated from the sheep were incubated for varied durations (30, 60, 90 and 120 min); the extracellular DNA released following this incubation was stained using two different dyes. Results: In the present study, no statistical significant difference was observed between the two extracellular DNA dyes with regard to the measurement of extracellular DNA released for all the incubation durations (p>0.05), except for the 30-min incubation (p=0.014). Conclusion: There was a statistically significant difference at 30 min incubation time. This difference may be attributed to the staining properties of the dye. Researchers studying in vitro netosis are recommended to use two different extracellular DNA dyes for the quantitative analysis of extracellular DNA formed during short-term incubation.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

ATAN, P., YILDIZ, K. (2022). Koyun Orijinli Polimorf Nükleer Lökositlerde Toxoplasma gondii’ye Karşı Şekillenen Hücre Dışı Tuzağın Kantitatif Analizinde Picogreen ve Sytox Orange Boyalarının Karşılaştırılması. Türkiye Parazitoloji Dergisi, Cilt: 42 - Sayı: 4, 240–244. https://ajindex.com/articles/630094

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (6)

  1. Dubey JP. Toxoplasmosis in Animals and Humans, 2nd Ed, CRC Press, Boca Raton, FL; 2010. p: 1-313
  2. Sibley LD, Khan A, Ajioka JW, Rosenthal BM. Genetic diversity of Toxoplasma gondii in animals and humans. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 2009; 364: 2749-61. [CrossRef] 3. Abbas AK, Lichtman AH, Pillai S. Basic Immunology Functions and Disorders of the Immune System. Temel Immünoloji İmmün Sistemin İşlevleri ve Bozuklukları. 4th ed. Çeviren: Camcıoğlu Y, Deniz G, Güneş Tıp Kitapevleri Ankara; 2016. s:17-40
  3. Eales JC. Immunology for Life Scientists, 2nd. ed. John Wiley & Sons, Inc, USA; 2005. p:75
  4. Simon EJ, Dickey JL, Hogan KA, Reece JB. Campbell Essential Biology with Physiology. Campbell Temel Biyoloji Fizyoloji İlaveli. 5th ed. Çeviren: Gündüz E, Türkan İ, Palme Yayıncılık Ankara; 2016
  5. Nathan C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities. Nat Rev Immunol 2006; 6: 173-82. [CrossRef] 7. Appelberg R. Neutrophils and intracellular pathogens: beyond phagocytosis and killing. Trends Microbiol 2007; 15: 87-92. [CrossRef] 8. Akira S, Uematsu S, Takeuchı O. Pathogen recognition and innate immunity. Cell 2006; 124: 783-801. [CrossRef] 9. Phillipson M, Kubes P. The neutrophil in vascular inflammation. Nat Med 2011; 17: 1381-90. [CrossRef] 10. Brinkmann V, Reichard U, Goosmann C, Fauler B, Uhlemann Y, Weiss D.S, Weinrauch Y, Zychlinsky A. Neutrophil extracellular traps kill bacteria. Science 2004; 303: 1532-35. [CrossRef] 11. Kaplan MJ, Radic M. Neutrophil extracellular traps: double-edge dswordsof innate immunity. J Immunol 2012; 189: 2689-95. [CrossRef] 12. Brinkmann V, Zychlinsky A. Neutrophil extracellular traps: Is immunity the second function of chromatin. J Cell Biol 2012; 198: 773-83. [CrossRef] 13. Goldmann O, Medina E. The expanding world of extracellular traps: not only neutrophils but much more. Front Immunol 2012; 3: 420
  6. Je S, Quan H, Yoon Y, Na Yirang, Kim BJ, Seok SH. Mycobacterium massiliense induces macrophage extracellular traps with facilitating bacterial growth. PLoS One 2016; 11: e0155685. [CrossRef] 15. Yıldız K. Netosis: Nötrofilin patojenle savaşta kullandığı alternatif savunma yöntemi. Türkiye Parazitol Derg 2016; 40: 158-62. [CrossRef] 16. Brinkmann V, Zychlinsky A. Beneficial suicide: why neutrophils die to make NETs. Nat Rev Microbiol 2007; 5: 577-82. [CrossRef] 17. Fuchs TA, Abed U, Goosmann C, Hurwıtz R, Schulze I, Wahn V et al. Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps. J Cell Bio