Dergiler / Türk Biyokimya Dergisi / 2015 / Cilt: 40 - Sayı: 4

Kinetics and modelling of batch fermentation for the production of organic solvent tolerant and thermostable lipase by recombinant E. coli

Organik çözücü toleranslı ve ısıya dayanıklı rekombinan E. coli lipaz üretiminin kinetiği ve grup fermentasyonu modellemesi

Sayfa
298–309
Yayın Tarihi
2022-11-05
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Karşılaştırma için lipaz üretimi ayrıca 2 litrelik biyoreaktör tankı içinde de yapılmıştır.Bulgular: Her durumda veriler önerilen modellere tam olarak uymuştur.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Amaç: İki değişik biyoproses seviyesinde kinetik değişen parametrelerinin gözlemlenmesi amacı ile çalkalama hunisi ve 2 litrelik biyo reaktör kapasitelerinde rekombinan E. coli ile organik çözücü ve ısıya dayanıklı lipaz üretimi çalışılmıştır.Metod: Hücre büyümesi, lipaz üretimi ve glikoz kullanımının belirlenmesi amacı ile yapılandırılmamış modeler üzerinde büyüme için Monod denklemi, lipaz üretimi ile glikoz tüketimi için de Luedeking - Piret denklemi kullanılmıştır.
📊
Temel Bulgular & Veri:Çalkalama hunisi fermentasyon deneyleri değişik glikoz ve maya eksrakt konsantrasyonlarında rekombinan E. coli BL21 bakteri suşu kullanılarak yapılmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:Karşılaştırma için lipaz üretimi ayrıca 2 litrelik biyoreaktör tankı içinde de yapılmıştır.Bulgular: Her durumda veriler önerilen modellere tam olarak uymuştur.
🔬Tür:Uygulamalı Anket & Alan Araştırması
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Amaç: İki değişik biyoproses seviyesinde kinetik değişen parametrelerinin gözlemlenmesi amacı ile çalkalama hunisi ve 2 litrelik biyo reaktör kapasitelerinde rekombinan E. coli ile organik çözücü ve ısıya dayanıklı lipaz üretimi çalışılmıştır.Metod: Hücre büyümesi, lipaz üretimi ve glikoz kullanımının belirlenmesi amacı ile yapılandırılmamış modeler üzerinde büyüme için Monod denklemi, lipaz üretimi ile glikoz tüketimi için de Luedeking - Piret denklemi kullanılmıştır. Çalkalama hunisi fermentasyon deneyleri değişik glikoz ve maya eksrakt konsantrasyonlarında rekombinan E. coli BL21 bakteri suşu kullanılarak yapılmıştır. Karşılaştırma için lipaz üretimi ayrıca 2 litrelik biyoreaktör tankı içinde de yapılmıştır.Bulgular: Her durumda veriler önerilen modellere tam olarak uymuştur. En yüksek büyüme seviyesi ve lipaz aktivitesi 25 g/L glikoz ve 25 g/L maya ekstraktında elde edilmiştir. İki litrelik karıştırmalı biyo reaktörden elde edilen hücre büyümesi (6.42 g/L) ve lipaz üretimi (65.32 IU/mL), çalkalamalı huni sisteminden elde edilen veriler karşılaştırılabilir olarak bulunmuştur. Biyoreaktör ve çalkalama hunisi içindeki hesaplanan büyümeye dayalı sabit (9.874 IU/g/h), büyüme olmayan sabite göre (0.022 IU/g/h) çok yüksek elde edilmiştir. Maksimum özgül büyüme oranı (?m) ve çalkalama şişesi fermantasyonları için Monod denklemi ile hesaplanan glukoz doyma sabiti (KS) değerleri sırasıyla 0.476 h-1 ve 5.237 g / L olarak bulunmuştur.Sonuç: Modelleme çalışmasına göre lipaz üretimin baskın olarak bir büyüme ilişkili süreç olduğu sonucuna varılmıştır. Çalkalama hunisi ve 2 litrelik karıştırmalı tank biyoreaktöründen elde edilen sonuçlar karşılaştırılabilir olarak bulunduğundan bu biyoprosesin daha büyük ölçekli olarak yapılmasının mümkün olduğu sonucuna varılmıştır.

Abstract

Objective: Kinetics of organic solvent tolerant and thermostable lipase production by recombinant E. coli in shake flask level and 2 L stirred tank bioreactor level was studied to observe the variations of important kinetic parameters at two different levels of bioprocess.Methods: Unstructured models based on Monod equation for growth and Luedeking-Piret equation for lipase production and glucose consumption were used to predict cell growth, lipase production and glucose utilization. The shake flask fermentation experiments were carried out at different initial glucose and yeast extract concentrations using recombinant bacterial strain E. coli BL21. Lipase production was also carried out using 2L stirred tank bioreactor for comparison.Results: In all cases, the data fitted well to the proposed models. The highest growth and lipase activity were obtained at 25 g/L glucose and 25 g/L yeast extract. Cell growth (6.42 g/L) and lipase production (65.32 IU/mL) in 2 L stirred tank bioreactor was comparable to those obtained in shake flask fermentations. The calculated value of growth associated constant (9.874 IU/g/h) was much higher than that of non-growth associated constant (0.022 IU/g/h) in bioreactor as well as in shake flasks. The values of maximum specific growth rate (?m) and glucose saturation constant (KS ) for shake flask fermentations, calculated from Monod equation, were 0.476 h-1 and 5.237 g/L respectively. Conclusion: From the modelling exercise, it was concluded that the lipase production is dominantly growth associated process. The kinetic parameter values for fermentations in shake flask and 2L stirred tank bioreactor were comparable, indicating that the bioprocess could be transferred into larger scale.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

NELOFER, R., ARİFF, A. B., RAHMAN, R. N. Z. R. A., BASR, M. (2022). Kinetics and modelling of batch fermentation for the production of organic solvent tolerant and thermostable lipase by recombinant E. coli. Türk Biyokimya Dergisi, Cilt: 40 - Sayı: 4, 298–309. https://ajindex.com/articles/621151

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (12)

  1. Gandhi N. Applications of lipase (review). J Am Oil Chem soc 1997; 74:621-34.
  2. Ghanem A, Aboul-Enein HY. Application of lipases in kinetic resolution of racemates. Chirality 2005; 17(1):1-15. Hasan F, shah AA, Hameed A. Methods for detection and characterization of lipases: A comprehensive review. Biotechnol Adv 2009; 27(6):782-98.
  3. Eltaweel M, Rahman RNZRA, salleh A, Basri M. An organic solvent-stable lipase from Bacillus sp. strain 42. Ann Microbiol 2005; 55:187-92. Baharum s, salleh A, Razak C, Basri M, Rahman M, Rahman RNZRA. Organic solvent tolerant lipase by Pseudomonas sp. strain s5: stability of enzyme in organic solvent and physical factors effecting its production. Ann Microbiol 2003; 53:75-84.
  4. Boekema BK, Beselin A, Breuer M, Hauer B, Koster M, et al. Hexadecane and Tween 80 stimulate lipase production in Burkholderia glumae by different mechanisms. Appl Environ Microbiol 2007; 73(12):3838-44.
  5. Horchani H, Mosbah H, salem NB, Gargouri Y, sayari A. Biochemical and molecular characterisation of a thermoactive, alkaline and detergent-stable lipase from a newly isolated Staphylococcus aureus strain. J Mol Catalysis B: Enzymatic 2009; 56:237-45.
  6. Dutta s, Ray L. Production and characterization of an alkaline thermostable crude lipase from an isolated strain of Bacillus cereus C(7). Appl Biochem Biotechnol 2009; 159(1):142-54.
  7. Yoon sH, Kim sK, Kim JF. secretory production of recombinant proteins in Escherichia coli. Recent Pat Biotechnol 2010; 4(1):23-9.
  8. Rahman RN, Kamarudin NH, Yunus J, salleh AB, Basri M. Expression of an organic solvent stable lipase from Staphy- lococcus epidermidis AT2. Int J Mol sci 2010; 11(9):3195-208.
  9. Cinar A, Birol G, Parulekar sJ, Undey C. Batch fermentation: modeling, monitoring, and control. CRC press 2003. Prakash M. simple unstructured mathematical model for ethanol fermentation by mutant Neurospora crassa. Int J of Chem Eng Res 2010; 2:13-21.
  10. Al-Qodah Z, Daghstani H, Geopel P, Lafi W. Determination of kinetic parameters of-amylase producing thermophile Bacillus sphaericus. Afr J Biotechnol 2007; 6:699-706.
  11. Lin J, Lee s, Koo Y. Modeling and simulation of lactic acid fermentation with inhibition effects of lactic acid and glucose. Biotechnol Bioproc Eng 2004; 9:52-8.
  12. Hamid T, Eltaweel M, Rahman RNZRA, Basri M, salleh A. Charac- terization and solvent stable features of strep-tagged purified recombinant lipase from thermostable and solvent tolerant Bacillus sp. strain 42. Ann Microbiol 2009; 59:111-8. savitha BC, Thimmaraju R