KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Hacettepe Journal of Biology and Chemistry / 2020 / Cilt: 48 - Sayı: 1

α-Galaktozidazin Aspergillus lentulus’dan Üçlü-Faz Ayırımı: Sistemin Optimizasyonu ve Enzimin Karakterizasyonu

Three-Phase Partitioning OF α-Galactosidase From Aspergillus Lentulus: Optimization of System And Characterization of Enzyme

Hasan BAYRAKTAR
Ataç UZEL
Derya ÇAMURLU
Semanur ÇALIŞKAN ÖZDEMİR
Seçil ÖNAL
Sayfa
83–98
Yayın Tarihi
2022-10-17
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

TPP ile A. lentulus’dan farklı biyokimyasal özelliklere sahip yeni bir α-galaktozidazın elde edilmesi onun çeşitli biyoteknolojik uygulamaları açısından ilgi çekici olacaktır.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Üçlü-faz ayırma (TPP) tekniği α-galaktozidazın Aspergillus lentulus’dan tek adımda kısmi saflaştırılması için ilk kez başarıyla kullanıldı.
📊
Temel Bulgular & Veri:Yüksek aktivite ve saflaştırma katı elde etmek için enzimin ekstraksiyon etkinliğine amonyum sülfat konsantrasyonu, ekstrakt t-butanol oranı ve pH etkisi araştırıldı.
💡
Sonuç & Katkı:TPP ile A. lentulus’dan farklı biyokimyasal özelliklere sahip yeni bir α-galaktozidazın elde edilmesi onun çeşitli biyoteknolojik uygulamaları açısından ilgi çekici olacaktır.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Üçlü-faz ayırma (TPP) tekniği α-galaktozidazın Aspergillus lentulus’dan tek adımda kısmi saflaştırılması için ilk kez başarıyla kullanıldı. Yüksek aktivite ve saflaştırma katı elde etmek için enzimin ekstraksiyon etkinliğine amonyum sülfat konsantrasyonu, ekstrakt t-butanol oranı ve pH etkisi araştırıldı. Sistemin optimum saflaştırma parametreleri %55(w/v) amonyum sülfat konsantrasyonu, 1:1 (v/v) ham ekstrakt t-butanol oranı ve pH 5.5 olarak belirlendi. Bu optimize TPP sistemi α-galaktosidaz için 5.3 saflaştırma katı ile %178 aktivite verimi oluşturdu. pH 6.5 ve 50°C’de maksimum aktivite gözlendi. α-Galaktozidaz 25-60°C sıcaklık aralığında ve pH 2.6-5.5 aralığında oldukça iyi bir kararlılık gösterdi. KM ve Vmax değerleri sırasıyla 0.365 mM ve 0.093 U olarak belirlendi. Metal iyonları ve şekerler arasında Na2 CO3ve galaktoz enzim aktivitesi üzerinde kuvvetli inhibitor etkisi gösterdi. TPP ile A. lentulus’dan farklı biyokimyasal özelliklere sahip yeni bir α-galaktozidazın elde edilmesi onun çeşitli biyoteknolojik uygulamaları açısından ilgi çekici olacaktır.

Abstract

Three-phase partitioning (TPP) technique is successfully used for the first time for partial purification of α-galactosidasefrom Aspergillus lentulus in single step. The influence of variations in ammonium sulfate concentration, extract tot-butanol ratio and pH on extraction efficiency of the enzyme are investigated to achieve the highest yield and purity fold.Optimal purification parameters of the system are determined as 55% (w/v) ammonium sulfate concentration with 1:1 (v/v)ratio of crude extract to t-butanol at pH 5.5. This optimized TPP system gave 5.3 purification fold with 178% recovery ofα-galactosidase. The maximum activity was registered at pH 6.5 and 50°C. α-Galactosidase showed a good stability withinthe temperature range of 25-60°C and pH range of 2.6-5.5. The KM and Vmax values were determined as 0.365 mM and0.093 U, respectively. Among the metals and sugars Na2CO3 and galactose showed strong inhibitory effect on the activity ofenzyme. The availability of a new α-galactosidase with different biochemical properties from A. lentulus by using TPP maybe of interest for its various biotechnological applications

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

BAYRAKTAR, H., UZEL, A., ÇAMURLU, D., ÖZDEMİR, S. Ç., ÖNAL, S. (2022). α-Galaktozidazin Aspergillus lentulus’dan Üçlü-Faz Ayırımı: Sistemin Optimizasyonu ve Enzimin Karakterizasyonu. Hacettepe Journal of Biology and Chemistry, Cilt: 48 - Sayı: 1, 83–98. https://ajindex.com/articles/529001

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (14)

  1. J.K., Yan, Y.Y., Wang, W.Y., Ma, H., Qiu, Z.B., Wang, J.Y. Wu, Three-phase partitioning as an elegant and versatile platform applied to non-chromatographic bioseparation processes. Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 13 (2017) 1-16
  2. C.R., Rachana, J.V. Lyju, Three-phase partitioning-A novel protein purification method. Int. J. Chem Tech Res., 6 (2014) 3467-3472
  3. C., Dennison, R. Lovrien,Three-phase partitioning: Concentration and purification of proteins. Protein Exp. Purif., 11(1997) 149-161
  4. C., Dennison, R.N. Pike, Protein fractionation by three-phase partititioning in aqueous/t-butanol mixtures. Biotechnol. Bioeng., 33 (1989) 221-228
  5. R.E., Lovrein, C., Goldensoph, P., Anderson, B. Odegard,Threephase partitioning (TPP) via butanol: Enzyme separation from crudes, in: R. Burgess (Ed.), Protein purification: Micro to macro, A.R., Liss, Inc., New York, 1987, pp.131-148
  6. R., Dutta, U., Sarkar, A. Mukherjee,Process optimization for the extraction of oil from Crotalaria juncea using three phase partitioning. Ind. Crops Prod., 71 (2015) 89-96
  7. D.C., Panadare, V.K. Rathod, Three phase partitioning for extraction of oil: A review, Trends Food Sci. Technol., 68 (2017) 145-151
  8. J.K., Yan, Y.Y., Wang, W.Y., Qui, Z.B., M., H. Wang, Ultrasound synergized with three-phase partitioning for extraction and separation of Corbicula fluminea polysaccharides and possible relevant mechanisms. Ultrasonics-Sonochemistry, 40 (2018) 128-134
  9. Z.J., Tan, C.Y., Wang, Y.J., Yi, H.Y., Wang, W.L., Zhou, S.Y., Tan, F.F. Li, Three-phase partitioning for simultaneous purification of aloe polysaccharide and protein using a single-step extraction. Process Biochem., 50 (2015) 482-486
  10. V.M., Kulkarni, V.K. Rathod, Extraction of magniferin from Magnifera indica leaves using three phase partitioning coupled with ultrasound. Ind. Crops Prod., 52 (2014) 292- 297
  11. L., Saxena, B.K, Iyer, L. Ananthanarayan, Three phase partitioning as a novel method for purification of ragi(Eleusine coracana) bifunctionalamylase/protease inhibitor. Process Biochem., 42 (2007) 491-495
  12. I., Roy, M.N. Gupta, Three-phase affinity partitioning of proteins. Anal. Biochem. 300 (2002) 11-14
  13. C., Jampani, K.S.M.S. Raghavarao, Differential partitioning for purification of anthocyanins from Brassica oleracea L. Sep. Purif. Technol. 151 (2015) 57-65
  14. D., Panadare, V.K. Rathod, Extraction of peroxidase from bitter gourd (Momordica charantia) by three phase partitioning with dimethyl carbona