KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi / 2017 / Cilt: 64 - Sayı: 2

Farklı kültür ortamlarındaki böbrek hücrelerinde osteopontin sentezi ve lokalizasyonu

Osteopontin synthesis and localization in different cultured renal cells

Hilal KARAGÜL
Neslihan TAŞÇENE
Sayfa
81–86
Yayın Tarihi
2022-10-12
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

OPN'in fonksiyonlarını açıklamak için, OPN izoformlarının yapısı ve modifikasyonlarıyla ilgili daha çok araştırmaya gerek duyulmaktadır.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Osteopontin (OPN), böbrek epitel hücrelerinden idrara salgılanan ve üriner sistemde taş oluşumuna karşı (özellikle kalsiyum okzalat taşı oluşumunda) savunma mekanizmasında önemli rolü olan bir glikoproteindir.
📊
Temel Bulgular & Veri:Bu çalışmada, OPN'nin taş oluşumunu indükleyen farklı kültür ortamlarındaki MDCK (Madin Darby Canine Kidney) hücrelerinde ve ortama salınan düzeylerindeki değişikliklerin incelenmesi amaçlanmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:OPN'in fonksiyonlarını açıklamak için, OPN izoformlarının yapısı ve modifikasyonlarıyla ilgili daha çok araştırmaya gerek duyulmaktadır.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Osteopontin (OPN), böbrek epitel hücrelerinden idrara salgılanan ve üriner sistemde taş oluşumuna karşı (özellikle kalsiyum okzalat taşı oluşumunda) savunma mekanizmasında önemli rolü olan bir glikoproteindir. Bu çalışmada, OPN'nin taş oluşumunu indükleyen farklı kültür ortamlarındaki MDCK (Madin Darby Canine Kidney) hücrelerinde ve ortama salınan düzeylerindeki değişikliklerin incelenmesi amaçlanmıştır. Çalışmanın diğer bir amacı ise farklı kültür ortamlarındaki MDCK hücrelerinde OPN'in lokalizasyonunda oluşabilecek değişikliklerin araştırılmasıdır. Çalışmada MDCK II (Madin Darby Canine Kidney) hücre hattı kullanılmıştır. MDCK hücrelerinde OPN ekspresyonu, RT-PCR takiben agar jel elektroforez ile gösterilmiştir. NaHPO4, MgSO4, CaCl2, Na3C6H5O7 ve NaOx/CaCl2 (COM) uygulamasıyla oluşturulan farklı kültür ortamlarındaki osteopontinin hücre içi yerleşimi immunofloresans konfokal mikroskopla gösterilmiştir. Hücre içi OPN düzeyleri Western blot yöntemiyle, ortama salgılanan OPN düzeyleri ise immunopresipitasyon sonrası Western blot ile gösterilmiştir. Farklı kültür ortamlarındaki MDCK hücrelerinde ve ekstraselüler matrikse salınan OPN düzeylerinde kontrol grubuna göre herhangi bir farklılık tespit edilememiştir. Na3C6H5O7 ve COM eklenen gruplarda konfokal lazer mikroskobik incelemesinde OPN'in hücre içi homojen dağılımının bozulduğu ve fibriler kümelenmeler tarzında hücre zarına doğru biriktiği gözlenmiştir. Farklı MDCK kültür ortamlarında, OPN'in hücre içi lokalizasyonunda değişiklikler şekillenmiştir. OPN'in fonksiyonlarını açıklamak için, OPN izoformlarının yapısı ve modifikasyonlarıyla ilgili daha çok araştırmaya gerek duyulmaktadır.

Abstract

Osteopontin (OPN) is a glycoprotein which synthesized within the kidney and secreted into the urine by epithelial cells and can inhibit forming the kidney stones especially calcium oxalate stones. The aim of this study is to compare levels of OPN in MDCK (Madin Darby Canine Kidney) cells with different culture conditions and levels of secreted OPN in different culture conditions. Another objective of this study is determination of OPN localization in MDCK cells with different culture conditions. MDCK II (Madin Darby Canine Kidney) cell line were used. OPN expression in MDCK cells was investigated with RT-PCR and agar gel electrophoresis methods. MDCK cells treated with NaHPO4, MgSO4, CaCl2, Na3C6H5O7 and COM, intracellular distribution of osteopontin in that cells were monitored by confocal immunofluorescence microscopy tecnique. Intracellular OPN levels were analysed by Western blot. Secreted OPN in the medium were also analysed by Western blot after immunoprecipitation. Osteopontin levels in different MDCK culture conditions and secreted in extracellular matrix were compared with control groups, there was found any differences between the groups. Intracellular homogen distribution of OPN in cells that made with Na3C6H5O7 and COM solutions were not monitored, osteopontin conglomerates near the cell membrane as a fibrillar aggregate were observed in that cells. Intracellular localization of OPN in different MDCK cell culture conditions was changed. In order to explain functions of OPN, it is necessary that making more researches about structures and modifications of OPN isoforms.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

KARAGÜL, H., TAŞÇENE, N. (2022). Farklı kültür ortamlarındaki böbrek hücrelerinde osteopontin sentezi ve lokalizasyonu. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, Cilt: 64 - Sayı: 2, 81–86. https://ajindex.com/articles/444630

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (15)

  1. Agnihotri R, Crawford HC, Haro H ve ark. (2001): Osteopontin, a novel substrate for matrix metalloproteinase- 3 (stromelysin-1) and matrix metalloproteinase-7 (matrilysin). J Biol Chem, 276, 28261-28267.
  2. Altıntaş A, Saruhan G, Benbir G ve ark. (2009): The role of osteopontin: A Shared pathway in the pathogenesis of multiple sclerosis and osteoporosis. J Neurol Sci, 276, 41-44.
  3. Cha J, Ahn Y, Lim SW ve ark. (2000): Decreased osteopontin expression in the rat kidney on a sodium deficient diet. YMJ, 41, 128-135.
  4. Chien Y, Masica DL, Gray JJ ve ark. (2009): Modulation of calcium oxalate dihydrate growth by selective crystal- face binding of phosphorylated osteopontin and polyaspartate peptide showing occlusion by sectoral (compositional) zoning. JBC, 284, 23491-23501.
  5. Denhardt DT, Xiaojia G (1993): Osteopontin: A protein with diverse functions. FASEB J, 7, 1475-1482.
  6. Gericke A, Qin C, Spevak L ve ark. (2005): Importance of phosphorlylation for osteopontin regulation of biomineralization. Calcif Tissue Int, 77, 45-54.
  7. Giachellia CM, Steitz S (2000): Osteopontin: A versatile regulator of inflammation an biomineralization. Matrix Bio, 19, 615-622.
  8. Gilbert M, Shaw WJ, Long JR ve ark. (2000): Chimeric peptides of statherin and osteopontin that bind hydroxyapatite and mediate cell adhesion. J Biol Chem, 275, 16213-16218.
  9. Hoyer JR, Asplin JR, Otvos L (2001): Phosphorylated osteopontin peptides suppres crystallization by inhibition the growth of calcium oxalate crystals. Kidney Int, 60, 77-82.
  10. Hudkins KL, Giachelli CM, Cui Y ve ark. (1999): Osteopontin expression in fetal and mature human kidney. J Am Soc Nephrol, 10, 444-457.
  11. Hunter GK, Kyle CL, Goldberg HA (1994): Modulation of crystal formation by bone phosphoproteins: Structural specificity of the osteopontin-mediated inhibition of hydroxypatite formation. Biochem J, 300, 723-728.
  12. Itoh Y, Yasui T, Okada A ve ark. (2005): Examination of the antioxidative effect in renal tubular cells and apoptosis by oxidative stres. Urol Res, 33, 261-266.
  13. Kohri K, Nomura S, Kitamura Y ve ark. (1993): Structure and expression of the mRNA encoding urinary stone protein (osteopontin). J Biol Chem, 20, 15180-15184.
  14. Kumar V, Vega LP, Farell G ve ark. (2005): Urinary macromolecular inhibition of crystal adhesion to renal epithelial cells is impaired in male stone formers. Kidney Int, 68, 1784-1792.
  15. Langdon A, Wignall GR, Rogers K ve ark. (2009): Kinetics of calcium oxalate crystal growth in the presence of osteopontin isoforms: an analysi