Dergiler / Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi / 2015 / Cilt: 21 - Sayı: 1

Effects of cooling rate on membrane integrity and motility parameters of cryopreserved ram spermatozoa

Koç spermasının dondurulmasında kullanılan soğutma oranlarının membran bütünlüğü ve motilite özelliklerine etkisi

Sayfa
61–67
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Sonuç olarak koç spermasının dondurulması öncesinde +5°C’ye soğutulmasında 0.3°C/dk.’nın üzerinde soğutma hızlarının kullanılmasının sperma kalitesini olumsuz etkilediği ve soğutma hızı 0.6 ve 0.9°C/dk.’ya arttırıldıkça eritme sonrası total ve progresif motilitenin artan oranlarda etkilendiği sonucu çıkarılmıştır.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Bu çalışmada koç spermasının 26°C’den +5°C’ye indirilmesinde farklı soğutma hızlarının (0.3°C/dk., 0.6°C/dk. ve 0.9°C/dk.) eritme sonrası spermatolojik özellikler ve spermatozoonların ultrastrüktürel yapısı üzerindeki etkilerinin incelenmesi amaçlanmıştır.
📊
Temel Bulgular & Veri:Altı adet koçtan elektro ejakülatörle alınan spermalar 26°C’daki su banyosunda pooling işlemine tabii tutuldu.
💡
Sonuç & Katkı:Sonuç olarak koç spermasının dondurulması öncesinde +5°C’ye soğutulmasında 0.3°C/dk.’nın üzerinde soğutma hızlarının kullanılmasının sperma kalitesini olumsuz etkilediği ve soğutma hızı 0.6 ve 0.9°C/dk.’ya arttırıldıkça eritme sonrası total ve progresif motilitenin artan oranlarda etkilendiği sonucu çıkarılmıştır.
🔬Tür:Laboratuvar & Saha Deneyi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Bu çalışmada koç spermasının 26°C’den +5°C’ye indirilmesinde farklı soğutma hızlarının (0.3°C/dk., 0.6°C/dk. ve 0.9°C/dk.) eritme sonrası spermatolojik özellikler ve spermatozoonların ultrastrüktürel yapısı üzerindeki etkilerinin incelenmesi amaçlanmıştır. Altı adet koçtan elektro ejakülatörle alınan spermalar 26°C’daki su banyosunda pooling işlemine tabii tutuldu. Tris bazlı sulandırıcıyla sulandırılan birleştirilmiş sperma üç eşit hacme bölünerek 3 farklı hızda (0.3, 0.6 ve 0.9°C/dk.) +5°C ‘ye soğutuldu. Sperma iki basamakta sulandırıldı, gliserol sperma ısısının +5°C’ye indiği ikinci basamakta katıldı. Sulandırma sonrası sperma 1 saat ekilibre edildi daha sonrasında 0.25 ml payetlere çekilerek sıvı azot buharında donduruldu. Sperma pooling, sulandırma, soğutma, ekilibrasyon ve eritme sonrası gibi tüm aşamalarında motilite değerleri Bilgisayar Destekli Analiz Sistemleri (CASA) ile değerlendirildi. Pooling ve soğutma sonrasında elektron mikroskop incelemeleri gerçekleştirildi. 0.3°C/dk. soğutma grubunun, spermanın +5°C’ye soğutma, ekilibrasyon ve eritme sonrasındaki hem total motilite hem de progressive motilite değerleri 0.9°C/dk. soğutma grubuna göre önemli derecede yüksek bulundu (P 0.05). Soğutma ve eritme sonrasında ise progressive motilite değerleri daha yüksek bulunurken(P 0.05). Yapılan TEM incelemesinde, tüm soğutma hızı gruplarında eritme sonrasında tespit edilen toplam hasarlı spermatozoit oranı, pooling sonrasına göre önemli derecede yüksek bulunmuştur (P<0.05). Sonuç olarak koç spermasının dondurulması öncesinde +5°C’ye soğutulmasında 0.3°C/dk.’nın üzerinde soğutma hızlarının kullanılmasının sperma kalitesini olumsuz etkilediği ve soğutma hızı 0.6 ve 0.9°C/dk.’ya arttırıldıkça eritme sonrası total ve progresif motilitenin artan oranlarda etkilendiği sonucu çıkarılmıştır. Ayrıca, koç spermasında düşük sıcaklara bağlı olarak oluşan ultra strüktürel hasarların ilk sulandırma aşamasından itibaren başladığı ve ultra strüktürel hasarların, spermanın gördüğü işleme ve soğutma hızlarına göre başın farklı bölgelerinde lokalize olma eğiliminde olduğu sonucu çıkarılmıştır.

Abstract

In this study we aimed to determinate the efects of three diferent cooling rates from +26°C to +5°C at (0.3°C/min 0.6°C/min and 0.9°C/min) on spermatologic and ultrastructure properties of ram semen. For this purpose semen from 6 rams was collected by electroejaculator and was pooled in a +26°C waterbath. Pooled semen was diluated with tris based extender and divided into three equal parts according cooling rates (0.3°C/min., 0.6°C/min. and 0.9°C/min). Cooled semen was reextended with extender B +5°C in the second step. Diluated samples were equilibrated for 1 h and then were loaded in 0.25 mL straws and freezed in liquid nitrogen vapor. After each freezing stage semen was evaluated motility with computer-assisted semen analysis (CASA). Electron microscobic evaluation was done for pooled and chilled samples. It has been observed that 0.3°C/min. cooled group had meaningfully higher values of motility and progressive motility at +5°C after equilibration and post-thaw stages when compared with the 0.9°C/min. group (P<0.05). When compared to the 0.6°C/min., the 0.3°C/min. cooled group had higher total motility values at after cooling to +5°C (P<0.05), equilibration (P<0.05) and post thaw stages (P>0.05) and had higher progressive motility at after cooling to +5°C (P<0.05), equilibration (P>0.05) and post-thaw stage (P<0.05). The TEM evaluation showed that at cooling to the +5°C increases the total damaged spermatozoa in all groups (P<0.05). In conclusion, cooling the ram semen to +5°C with a rate above 0.3°C/min. afected negatively the spermatological characteristics. Reaching the cooling rates of 0.6 and 0.9°C/min. increasingly deteriorated the post-thaw motility and progressive motility values. Also, low temperature related to ultrastructural damage was observed at the first dilution step and localized at diferent regions of the sperm head depends upon the processes and cooling rates.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

DEMİR, K., BAKIRER, G. Ö., CİRİT, Ü., BOZKURT, H. H., AKTAŞ, A., BİRLER, S., AK, K., PABUCCUOĞLU, S. (2015). Effects of cooling rate on membrane integrity and motility parameters of cryopreserved ram spermatozoa. Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, Cilt: 21 - Sayı: 1, 61–67. https://ajindex.com/articles/272577

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (14)

  1. Salamon S, Maxwell WMC: Storage of ram semen. Anim Reprod Sci, 62, 77-111 2000
  2. Watson PF: The causes of reduced fertility with cryopreserved semen. Anim Reprod Sci, 60-61, 481- 492, 2000
  3. Medeiros CMO, Forell F, Oliveira ATD, Rodrigues JL: Current status of sperm cryopreservation: Why isn’t better. Theriogenology, 57, 327-344, 2002
  4. Kumar S, Millar JD, Watson PF: The efect of cooling rate on the survival of cryopreserved bull, ram, and boar spermatozoa: A comparison of two controlled-rate cooling machines. Cryobiology, 46, 246-253, 2003
  5. Fiser PS, Fairfull RW: The efects of rapid cooling (cold shock) of ram semen, photoperiod, and egg yolk in diluents on the survival of spermatozoa before and after freezing. Cryobiology, 23, 599-607, 1986
  6. Yoshida M: Conservation of sperms: Current status and new trends. Anim Reprod Sci, 60-61, 121-132, 2000
  7. Akal E, Selçuk M: The factors induced DNA damage of spermatozoon, repair and damage detection mechanisms. Istanbul Univ Vet Fak Derg, 39 (2): 284-293, 2013
  8. Holth WV: Fundamental aspects of sperm cryobiology: The importance of species and individual diferences. Theriogenology, 53, 47-58, 2000
  9. Maxwell WMC, Watson PF: Recent progress in the preservation of ram semen. Anim Reprod Sci, 42, 55-65, 1996
  10. Pesch S, Bergmann M: Structure of mammalian spermatozoa in respect to viability, fertility and cryopreservation. Micron, 37, 597-612 2006
  11. Zamboni L: The ultrastructural pathology of the spermatozoon as a cause of infertility: The role of electron microscopy in the evaluation of semen quality. Fertil Steril, 48, 711- 734, 1987
  12. Nur Z, Zik B, Ustuner B, Sagirkaya H, Ozguden CG: Efects of diferent cryoprotective agents on ram sperm morphology and DNA integrity. Theriogenology, 73, 1267-1275, 2010
  13. Ustüner B, Alçay S, Nur Z, Sağırkaya H, Soylu MK: Efect of egg yolk and soybean lecithin on tris-based extender in post-thaw ram semen quality and in vitro fertility. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 20 (3): 393-398, 2014. DOI: 10.9775/kvfd.2013.10248 14. Cirit U, Bağış H, Demir K, Agca C, Pabuccuoğlu S, Varışlı Ö, Cliford-Rathert C, Agca Y: Comparison of cryoprotective efects of iodixanol, trehalose and cysteamine on ram semen. Anim Reprod Sci, 139, 38-44, 2013
  14. Kasimanickam R, Kasimanickam V, Pelzer KD, Dascanio JJ: Efect of breed and sperm concentration on the changes in structural, functional and motility parameters of ram-lamb spermatozoa during storage at 4°C. Anim Reprod Sci, 101, 60-