KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Gaziosmanpaşa Üniversitesi Ziraat Fakültesi Dergisi / 2004 / Cilt: 21 - Sayı: 2

Characterization of recombinant soyacystatin expressed in E.coli

E.coli tarafından sentezlenen recombinant soyacystatinin karakterizasyonu

Özlem AKPINAR
Haejung AN
Sayfa
15–22
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

İsaelektirik fokus jeli ile papain ve r-soyasistatin arasındaki spesifik interaksiyon tespit edilmiştir.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Rekombinant (r-) soyasitatinin papaine olan inhibitörü aktivitesi karakterize edilerek yumurta beyazı sistatin ile karşılaştmlmıştır.
📊
Temel Bulgular & Veri:E.coli de sentez edilen r-soyasistatin 4 phenyl-Sepharose ve DEAE kolonları rekombinant protein olarak 4.33 kat saflaştırümıştır.
💡
Sonuç & Katkı:İsaelektirik fokus jeli ile papain ve r-soyasistatin arasındaki spesifik interaksiyon tespit edilmiştir.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:sistein proteinaz · inhibitör · proteinler

Özet

Rekombinant (r-) soyasitatinin papaine olan inhibitörü aktivitesi karakterize edilerek yumurta beyazı sistatin ile karşılaştmlmıştır. E.coli de sentez edilen r-soyasistatin 4 phenyl-Sepharose ve DEAE kolonları rekombinant protein olarak 4.33 kat saflaştırümıştır. İsaelektirik fokus jeli ile papain ve r-soyasistatin arasındaki spesifik interaksiyon tespit edilmiştir. Papain ve r-soyasistatinin bir kompleks oluşturduğu ve bu kompleksin pl si sistatin ve papain pl lar arasında çözündüğü tespit edilmiştir. Her iki sistatinde geniş bir pH aralığında (pH 4-10) stabilite göstermiş ve soyasistatinin termal stabiliteside yumurta beyazı sistatine benzer bulunmuştur test edilen sıcaklıklarda (0-100 °C). r-Soyasistatinin papaine karşı olan inhibitor aktivitesi yumurta beyazı sistatine benzer bulunmuştur.

Abstract

Recombinant (r-) soyacystatin was characterized for their inhibitory activity against papain and compared to egg white cystatin. r-Soyacystatin expressed in E. coli was purified 4.33 fold as a recombinant protein with phenyl-Sepharose and DEAE. Egg white cystatin was purified by using affinity chromatography on CM-papain-Sepharose. The specific interaction of r-soyacystatin and papain was detected on isoelectric focusing gel. Papain and r-soyacystatin formed a complex and the complex was resolved in between pis of cystatins and papain. Both cystatins showed high stability at the wide pH range (pH 4-10), and the thermal stability of soyacystatin was comparable at the temperature range (0-100 °C). The r-soyacystatin exhibited papain-like protease inhibition activity comparable to that of the egg white cystatin, which could inhibit papain. .

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

AKPINAR, Ö., AN, H. (2004). Characterization of recombinant soyacystatin expressed in E.coli. Gaziosmanpaşa Üniversitesi Ziraat Fakültesi Dergisi, Cilt: 21 - Sayı: 2, 15–22. https://ajindex.com/articles/224664

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (13)

  1. Abe, K., Emori, Y., Kondo, H., Suzuki, K. and Arai, S. 1987. Molecular cloning of a cysteine proteinase inhibitor of rice (Oryzacystatin). J. Biol. Chem. 262, 16793-16797.
  2. Abe, M., Abe, K., Masaharu, K. and Arai, S. 1992. Corn kernel cysteine proteinase inhibitor as a novel cystatin superfamily member of plant origin. Eur. J. Biochem. 209, 933-937
  3. Abe, M., Abe, K., Iwabuchi, K., Domoto, C. and Arai, S. 1994. Corn cystatin I expressed in Escherichia coli: investigation of its inhibitory profile and occurrence in corn kernels. J. Biochem. 116, 488-492.
  4. Abe, M., Abe, K., Domoto, C. and Arai, S. 1995. Two distinct species of corn cystatin in corn kernels. Biosci. Biotech. Biochem. 59, 756-758.
  5. An, H., Weerasinghe, V., Seymour, T.A. and Morrissey, M.T. 1994. Cathepsin degradation of Pacific whiting surimi proteins. J. Food Sci. 5, 1013-1017
  6. An, H., Peters, Y.M., Seymour, T.A. 1996. Roles of endogenous enzyme in surimi gelation. Treds in Food Sci. and Tech. 7, 321-327.
  7. Anastasi, A., Brown, M.A., Kembhavi, A.A., Nicklin, M.J.H., Sayers, C.A., Sunter, D.C. and Barrett, A.J. 1983. Cystatin, a protein inhibitor of cysteine proteinases. Biochem. J. 211, 129-138.
  8. Arai, S., Watanabe, H., Kondo, H., Emori, Y. and Abe, K. 1991. Papain inhibitory activity of oryzacystatin, a rice seed cysteine proteinase inhibitor, depends on the central Gln-Val-Val-Ala-Gly region conserved among cystatin superfamily members. J. Biochem. 109, 294-298.
  9. Axen, R. and Ernback, S. 1971. Chemical fixation of enzymes to cyanogen halide activated polysaccharide carriers. Eur. J. Biochem. 18, 351-360.
  10. Barrett, A.J. 1981. Cystatin, the egg white inhibitor of cysteine proteinases. Methods in Enzymol. 80, 771-780.
  11. Barrett, A.J., Rawlings, N.D., Davies, M.E., Machleidt, W., Salvesan, G. and Turk, V. 1986. Cysteine proteinase inhibitors of cystatin superfamily. In: Barrett AJ, Salvesan G, editors. Proteinase Inhibitors The Netharlands Amsterdam: Elsevier Science Publishers B.V Bjork, I., Alriksson, E. and Ylinenejarvi, K. 1989. Kinetics binding of chicken cystatin to papain. Biochemistry. 28, 1568-1573.
  12. Bode, W., Engh, R., Musil, D.J., Thiele, U., Huber, R., Karshikow, A., Brzin, J., Kos, J. and Turk, V. 1988. The 2.0 A X-ray crystal structure of chicken egg white cystatin and its possible mode of interaction with cysteine proteinases. EMBO J. 7, 2593-2599.
  13. Botella, M.A., Xu, Y., Prabha, T.N., Zhao, Y., Narasimhan, M.L., Wilson, K.A., Nielsen, S.S., Bressan, R.A. and Hasegawa, P.M. 1996. Differential e