Dergiler / Dicle Tıp Dergisi / 2019 / Cilt: 46 - Sayı: 3

Klinik Örneklerden İzole Edilen Aspergillus Türlerinin Tanımlanmasında Geleneksel Yöntemler, MALDI-TOF MS ve Dizi Analizi Yöntemlerinin Karşılaştırılması

Comparison of Conventional Methods, MALDI-TOF MS and Sequence Analysis Methods for Identification of Aspergillus Species Isolated from Clinical Samples

Sayfa
543–551
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Bulgular: Çalışmamızda referans tanımlama yoDžntemi olarak kullandıgǍımız ITS boDžlgesinin dizi analiziyle, suşların 25 tanesi A.fumigatus tuDžr kompleksi (%52,08), 17’si A.flavus tuDžr kompleksi (%35,42), 3’uDžA.niger tuDžr kompleksi (%6,25), 2’si A.terreus tuDžr kompleksi (%4,17), 1’i A.sydowii tuDžr kompleksi (%2,08) olarak tanımlandı.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Amaç: Aspergillus tuDžruDž mantar enfeksiyonları immuDžn sistemi baskılanmış hastalarda, yuDžksek mortalite ve morbidite ile sonuçlanan invazif hastalıklara yol açmaktadır.
📊
Temel Bulgular & Veri:YoDžntemler: Bu çalışmada çeşitli klinik oDžrneklerden izole edilen toplam 50 Aspergillus izolatı çalışmaya dahil edildi.
💡
Sonuç & Katkı:Bulgular: Çalışmamızda referans tanımlama yoDžntemi olarak kullandıgǍımız ITS boDžlgesinin dizi analiziyle, suşların 25 tanesi A.fumigatus tuDžr kompleksi (%52,08), 17’si A.flavus tuDžr kompleksi (%35,42), 3’uDžA.niger tuDžr kompleksi (%6,25), 2’si A.terreus tuDžr kompleksi (%4,17), 1’i A.sydowii tuDžr kompleksi (%2,08) olarak tanımlandı.
🔬Tür:Araştırma Makalesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:Alan Parametreleri

Özet

Amaç: Aspergillus tuDžruDž mantar enfeksiyonları immuDžn sistemi baskılanmış hastalarda, yuDžksek mortalite ve morbidite ile sonuçlanan invazif hastalıklara yol açmaktadır. Bu nedenle hızlı ve dogǍru tanı konularak uygun antifungal tedavi başlanması invazif aspergillozlu hastalar için hayati oDžneme sahiptir. GuDžnuDžmuDžzde daha hızlı, kolay uygulanabilir, yuDžksek duyarlılık ve oDžzguDžlluDžgǍe sahip yeni tanı yoDžntemleri tercih edilmektedir. Bu çalışmada çeşitli klinik oDžrneklerden izole edilen Aspergillus tuDžrlerinin; geleneksel yoDžntemler, MALDI-TOF MS sistemi ve DNA dizi analizi yoDžntemi kullanılarak tanımlanması ve bu yoDžntemlerin karşılaştırılması amaçlanmıştır. YoDžntemler: Bu çalışmada çeşitli klinik oDžrneklerden izole edilen toplam 50 Aspergillus izolatı çalışmaya dahil edildi. Aspergillus suşlarından 2 tanesi kontaminasyondan dolayı çalışma dışı bırakıldı. Bulgular: Çalışmamızda referans tanımlama yoDžntemi olarak kullandıgǍımız ITS boDžlgesinin dizi analiziyle, suşların 25 tanesi A.fumigatus tuDžr kompleksi (%52,08), 17’si A.flavus tuDžr kompleksi (%35,42), 3’uDžA.niger tuDžr kompleksi (%6,25), 2’si A.terreus tuDžr kompleksi (%4,17), 1’i A.sydowii tuDžr kompleksi (%2,08) olarak tanımlandı. Altın standart yoDžntemin dizi analizi olduğu ve geleneksel yöntem ile karşılaştırıldığında %97,9 uyum olduğu gözlendi. İki farklı yazılım kullandığımız MALDI-TOF MS sisteminde ise güncel IVD (invitro diagnostik) VITEK MS V.2.0 yazılımı ile doğru tanımlanan köken 37(%77,1) iken SARAMIS 4.12 RUO yazılımı ile doğru tanımlanan köken 42(%87,5) olarak bulundu. Sonuç: Moleküler yöntemler, geleneksel yöntemlerin yetersiz kaldığı ve tür tanımının yapılamadığı durumlarda tamamlayıcı yöntem olarak kullanılabilir. Zaman açısından değerlendirildiğinde MALDI-TOF yöntemi hızlı ve duyarlı bir yöntem olmasına rağmen veri tabanının geliştirilmesi amacıyla suş sayısının arttırılarak bu tür çalışmaların tekrarlanması gerekir.

Abstract

Objective: Fungal infections associated with Aspergillus species cause invasive diseases leading high mortality and morbidity as a result of deficiency of primary defence systems in immunosuppressive patients. Therefore, starting appropriate antifungal treatment after rapid and accurate diagnosis is critically important for invasive aspergillosis patients. Nowadays, more rapid, easily applicable, having high sensitivity and specifity new diagnostic methods are required. In this study, identification of Aspergillus spp. isolated from various clinical samples by using conventional methods, MALDI-TOF MS system and DNA sequence analysis and comparison of the methods are aimed. Methods: Totally 50 Aspergillus strains were included in this study. Two isolates were excluded from the study due to contamination. Results: 25 strains were identified as A.fumigatus species complex (52.08%), 17 strains were identified as A.flavus species complex (35.42%), 3 strains were identified as A.niger species complex (6.25%), 2 strains were A.terreus species complex (4.17%) and 1 strain was A.sydowii species complex (2.08%) byITS sequence analysis method used as reference diagnostic method in this study. The sequence analysis wasthe gold standard method and it was observed that there was 97.9% compliance compared to the conventional method. Two different software programmes were used for MALDI-TOF MS system. 37 strains (77.1%) were accurately defined by current IVD (in vitro diagnostic) VITEK MS V.2.0 whereas 42 strains (87.5%) were accurately defined by SARAMIS 4.12 RUO software programme. Conclusions: Molecular methos are thought to be appropriate to be used as complementary method when conventional methods are insufficient for identification at the species level. Although MALDI-TOF MS method is rapid and sensitive method when evaluated in terms of time, it is concluded that such studies should be repeated with more strains to develop database.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

BİLGİ, E. A., KİRAZ, N. (2019). Klinik Örneklerden İzole Edilen Aspergillus Türlerinin Tanımlanmasında Geleneksel Yöntemler, MALDI-TOF MS ve Dizi Analizi Yöntemlerinin Karşılaştırılması. Dicle Tıp Dergisi, Cilt: 46 - Sayı: 3, 543–551. https://ajindex.com/articles/186324

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (13)

  1. Atalay A, Koc AN, Suel A, et al. Conventional Morphology Versus PCR Sequencing, rep-PCR, and MALDI-TOF-MS for Identification of Clinical Aspergillus Isolates Collected Over a 2-Year Period in a University Hospital at Kayseri, Turkey. J Clin Lab Anal. 2016; 30: 745-50
  2. Gautier M, Normand AC, Ranque S. Previously unknown species of Aspergillus. Clin Microbiol Infect. 2016; 22: 662-9
  3. Sanguinetti M, Posteraro B. Identification of Molds by Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry. J Clin Microbiol. 2017; 55: 369-79
  4. Lamoth F. Aspergillus fumigatus-Related Species in Clinical Practice.Front Microbiol. 2016; 7: 683
  5. Li Y, Wang H, Zhao YP, Xu YC, Hsueh PR. Evaluation of the Bruker Biotyper Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry System for Identification of Aspergillus Species Directly from Growth on Solid Agar Media.Front Microbiol. 2017; 8: 1209
  6. Gülmez D. Aspergillus fumigatus Kompleksi: Zorlu Bir Patojende Yeni Bir Sorun, Azol Direnc. Türk Mikrobiyol Cem Derg. 2018; 48: 153-66
  7. Iǂhalupovrƴ J, Raus M, SedlrƴĔovrƴ M, Sebela M. Identification of fungal microorganisms by MALDI-TOF mass spectrometry. Biotechnol Adv. 2014; 32: 230-41
  8. Nakamura S, Sato H, Tanaka R, Yaguchi T. Verification of Ribosomal Proteins of Aspergillus fumigatus for Use as Biomarkers in MALDI-TOF MS Identification. Mass Spectrom (Tokyo). 2016; 5: A0049
  9. Pelit S, ErkoDžse Genç G, Barış A, Erturan Z. Trichosporon TuDžrlerinin Tanımlanmasında Matriks Aracılı Lazer Dezorpsiyon Iǚyonizasyon-Uçuş Zamanlı-KuDžtle Spektrometresi (MALDI-TOF MS) Sisteminin API ID 32Iǂ ve VITEK 2 ile Karşılaştırılması. TuDžrk Mikrobiyol Cem Derg. 2017; 47: 169-75
  10. Özcan N, Ezin Ö, Akpolat N, Mete M, Gül K. Identification of Candida species isolated from clinical specimens by MALDI-TOF MS. Dicle Medical Journal. 2016; 43: 390-4
  11. Yılmaz S, Duyan S, Artuk Iǂ, Diktaş H. Applications of MALDI-TOF MS in Microbiological Identification. TAF Prev Med Bull. 2014; 13: 421-6
  12. Vidal-Acuña MR, Ruiz-Pérez de Pipaón M, TorresSánchez MJ, Aznar J. Identification of clinical isolates of Aspergillus, including cryptic species, by matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Med Mycol. 2018; 56: 838-46
  13. Park JH, Shin JH, Choi MJ, et all. Evaluation of matrix-assisted laser desorption/ionization time-offight mass spectrometry for identification of 345 clinical isolates of Aspergillus s