KaydedilenlerDerginizi ekleyin

Dergiler / Sağlık Hizmetleri Araştırma Dergisi / 2026 / Cilt: 4

Bumetanid’in HT-22 Hipokampal Hücre Hattında Pentilentetrazol Kaynaklı Hücresel Hasar ve Oksidatif Stres Üzerine Etkisinin Araştırılması

The Investigation of the Effect of Bumetanide on Pentylenetetrazol-Induced Cellular Damage and Oxidative Stress in the HT-22 Hippocampal Cell Line

Muzaffer Türkoğlu(SİVAS CUMHURİYET ÜNİVERSİTESİ)0009-0000-0085-2332
Ali Tokgöz(SİVAS CUMHURİYET ÜNİVERSİTESİ)0009-0000-3752-9483
Songül Bavli(SİVAS CUMHURİYET ÜNİVERSİTESİ, TIP FAKÜLTESİ, DAHİLİ TIP BİLİMLERİ BÖLÜMÜ, NÖROLOJİ ANABİLİM DALI)0000-0002-1688-7828
Sebahattin Karabulut(CUMHURİYET ÜNİVERSİTESİ, SİVAS SAĞLIK HİZMETLERİ MESLEK YÜKSEKOKULU)0000-0002-3261-4125
Ayşegül Öztürk(SİVAS CUMHURİYET ÜNİVERSİTESİ, SAĞLIK HİZMETLERİ MESLEK YÜKSEKOKULU, FİZİK TEDAVİ BÖLÜMÜ)0000-0001-8130-7968
Sayfa
—
Yayın Tarihi
2026-04-14
DOI
—
🏛️Bu makalenin bibliyografik verileri ve tam metin bağlantısı DergiPark üzerinden sağlanmıştır.
DergiPark Kaydı ↗
✨

Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar

AI Insight
⚡ TL;DR(1 Cümlede Hızlı Çıkarım)

Bulgularımız, NKCC1 inhibisyonunun epileptiform hasarın upstream patofizyolojik mekanizmalarını hedefleyen tamamlayıcı bir terapötik yaklaşım olabileceğini desteklemektedir.

📌 3 Maddede Bu Makale

🎯
Amaç & Hipotez:Bu çalışmanın amacı, Na⁺-K⁺-2Cl⁻ kotransporter-1 (NKCC1) inhibitörü olan bumetanidin (BMT), pentilentetrazol (PTZ) ile indüklenen epileptiform hücresel hasara karşı olası nöroprotektif etkisini ve bu etkinin oksidatif stres parametreleri ile ilişkisini HT-22 nöronal hücre hattında araştırmaktır.
📊
Temel Bulgular & Veri:HT-22 hücreleri kontrol, PTZ (60 mM), BMT ve BMT + PTZ olmak üzere dört gruba ayrılmıştır.
💡
Sonuç & Katkı:Bulgularımız, NKCC1 inhibisyonunun epileptiform hasarın upstream patofizyolojik mekanizmalarını hedefleyen tamamlayıcı bir terapötik yaklaşım olabileceğini desteklemektedir.
🔬Tür:Deneysel Tarla Denemesi
📍Kapsam:Genişletilmiş Akademik Örneklem
⚙️Değişkenler:pentilentetrazol · bumetanid · hücre hasarı

Özet

Bu çalışmanın amacı, Na⁺-K⁺-2Cl⁻ kotransporter-1 (NKCC1) inhibitörü olan bumetanidin (BMT), pentilentetrazol (PTZ) ile indüklenen epileptiform hücresel hasara karşı olası nöroprotektif etkisini ve bu etkinin oksidatif stres parametreleri ile ilişkisini HT-22 nöronal hücre hattında araştırmaktır. HT-22 hücreleri kontrol, PTZ (60 mM), BMT ve BMT + PTZ olmak üzere dört gruba ayrılmıştır. Hücreler, farklı konsantrasyonlarda (1, 2, 4 ve 8 µM) BMT ile ön işleme tabi tutulduktan sonra 60 mM PTZ’ye maruz bırakılmıştır. Hücre canlılığı XTT testi ile değerlendirilmiştir. Hücresel oksidatif durumun belirlenmesi amacıyla total antioksidan seviye (TAS) ve total oksidan seviye (TOS) ölçümleri gerçekleştirilmiştir. Veriler tek yönlü ANOVA ve Tukey post-hoc testi kullanılarak analiz edilmiştir. PTZ uygulaması, HT-22 hücrelerinde hücre canlılığını anlamlı düzeyde azaltmış ve oksidatif stres belirteçlerinde belirgin artışa neden olmuştur. BMT ön tedavisinin özellikle 2 µM dozunda, PTZ’ye bağlı hücre ölümünü anlamlı şekilde azalttığı saptanmıştır (p<0.05). Bu dozda BMT uygulaması, TAS düzeylerini artırırken PTZ’ye bağlı TOS artışını anlamlı olarak sınırlamıştır. Tek başına BMT uygulamasının hücre canlılığı üzerinde anlamlı bir etkisi gözlenmemiştir. Bu çalışma, bumetanid ön tedavisinin PTZ ile indüklenen HT-22 hücre hasarına karşı nöroprotektif etki gösterdiğini ortaya koymaktadır. Bu etkinin, doğrudan bir antioksidan mekanizmadan ziyade, klorür homeostazının düzenlenmesi yoluyla nöronal hipereksitabilitenin azaltılmasına ve buna bağlı sekonder oksidatif stres yanıtlarının baskılanmasına bağlı olduğu düşünülmektedir. Bulgularımız, NKCC1 inhibisyonunun epileptiform hasarın upstream patofizyolojik mekanizmalarını hedefleyen tamamlayıcı bir terapötik yaklaşım olabileceğini desteklemektedir.

Abstract

The present study aimed to investigate the potential neuroprotective effect of bumetanide (BMT), a Na⁺-K⁺-2Cl⁻ cotransporter-1 (NKCC1) inhibitor, against pentylenetetrazol (PTZ)-induced epileptiform cellular damage and to evaluate its association with oxidative stress parameters in the HT-22 neuronal cell line. HT-22 cells were divided into four groups: control, PTZ (60 mM), BMT, and BMT + PTZ. Cells were pretreated with BMT at different concentrations (1, 2, 4, and 8 µM) prior to exposure to PTZ. Cell viability was assessed using the XTT assay. Total antioxidant status (TAS) and total oxidant status (TOS) were measured to evaluate cellular oxidative stress. Statistical analyses were performed using one-way ANOVA followed by Tukey’s post-hoc test. PTZ exposure significantly reduced cell viability and induced oxidative stress in HT-22 cells. BMT pretreatment, particularly at the 2 µM concentration, significantly attenuated PTZ-induced cell death (p < 0.05). At this dose, BMT increased TAS levels while significantly limiting the PTZ-induced elevation in TOS. BMT administered alone did not significantly affect cell viability. These findings indicate that BMT exerts a dose-dependent protective effect against PTZ-induced neuronal damage. This study demonstrates that bumetanide pretreatment provides neuroprotection against PTZ-induced cellular injury in HT-22 neurons. The observed protective effect appears to be mediated not by direct antioxidant activity, but rather through modulation of chloride homeostasis, leading to reduced neuronal hyperexcitability and secondary suppression of oxidative stress responses. Targeting NKCC1-dependent upstream mechanisms may represent a complementary therapeutic strategy for epileptiform neuronal damage.

🔖

Bu Makaleye Atıf Yap

Türkoğlu, M., Tokgöz, A., Bavli, S., Karabulut, S., Öztürk, A. (2026). Bumetanid’in HT-22 Hipokampal Hücre Hattında Pentilentetrazol Kaynaklı Hücresel Hasar ve Oksidatif Stres Üzerine Etkisinin Araştırılması. Sağlık Hizmetleri Araştırma Dergisi, Cilt: 4. https://ajindex.com/articles/1646303

📄 Tam Metin PDF Okuyucu

📄

PDF görüntüleyici hazırlanıyor...

Kaynakça (27)

  1. Abruzzo, P. M., Panisi, C., & Marini, M. (2021). The Alteration of Chloride Homeostasis/GABAergic Signaling in Brain Disorders: Could Oxidative Stress Play a Role?. Antioxidants (Basel, Switzerland), 10(8), 1316. [https://doi.org/10.3390/antiox10081316](https://doi.org/10.3390/antiox10081316)
  2. Barnard, S. N., Chen, Z., Holmes, M., Kanner, A. M., Hegde, M., Kuzniecky, R., Lowenstein, D., French, J. A., & Human Epilepsy Project (1) Investigators (2025). Treatment Response to Antiseizure Medications in People With Newly Diagnosed Focal Epilepsy. JAMA Neurology, 82(10), 1022–1030. [https://doi.org/10.1001/jamaneurol.2025.2949](https://doi.org/10.1001/jamaneurol.2025.2949)
  3. Blaesse, P., Airaksinen, M. S., Rivera, C., & Kaila, K. (2009). Cation-chloride cotransporters and neuronal function. Neuron, 61(6), 820–838. [https://doi.org/10.1016/j.neuron.2009.03.003](https://doi.org/10.1016/j.neuron.2009.03.003)
  4. Dalic, L. J., Warren, A. E. L., Young, J. C., Thevathasan, W., Roten, A., Bulluss, K. J., & Archer, J. S. (2020). Cortex leads the thalamic centromedian nucleus in generalized epileptic discharges in Lennox-Gastaut syndrome. Epilepsia, 61(10), 2214–2223. [https://doi.org/10.1111/epi.16657](https://doi.org/10.1111/epi.16657)
  5. Dzhala, V. I., Talos, D. M., Sdrulla, D. A., Brumback, A. C., Mathews, G. C., Benke, T. A., Delpire, E., Jensen, F. E., & Staley, K. J. (2005). NKCC1 transporter facilitates seizures in the developing brain. Nature Medicine, 11(11), 1205–1213. [https://doi.org/10.1038/nm1301](https://doi.org/10.1038/nm1301)
  6. Erel, O. (2004). A novel automated method to measure total antioxidant response against potent free radical reactions. Clinical Biochemistry, 37(2), 112–119. [https://doi.org/10.1016/j.clinbiochem.2003.10.014](https://doi.org/10.1016/j.clinbiochem.2003.10.014)
  7. Erel, O. (2005). A new automated colorimetric method for measuring total oxidant status. Clinical Biochemistry, 38(12), 1103–1111. [https://doi.org/10.1016/j.clinbiochem.2005.08.008](https://doi.org/10.1016/j.clinbiochem.2005.08.008)
  8. Geronzi, U., Lotti, F., & Grosso, S. (2018). Oxidative stress in epilepsy. Expert Review of Neurotherapeutics, 18(5), 427–434. [https://doi.org/10.1080/14737175.2018.1465410](https://doi.org/10.1080/14737175.2018.1465410)
  9. Gong, Y., Wu, M., Shen, J., Tang, J., Li, J., Xu, J., Dang, B., & Chen, G. (2021). Inhibition of the NKCC1/NF-κB signaling pathway decreases inflammation and improves brain edema and nerve cell apoptosis in an SBI rat model. Frontiers in Molecular Neuroscience, 14, 641993. [https://doi.org/10.3389/fnmol.2021.641993](https://doi.org/10.3389/fnmol.2021.641993)
  10. Joha, Z., Başgöz, N., Özgür, A., & Taşkıran, A. Ş. (2025). Bromelain protects against PTZ-induced glial damage and inflammation: An in vitro and in silico study. Cell Biochemistry and Biophysics, 83(3), 3215–3223. [https://doi.org/10.1007/s12013-025-01703-8](https://doi.org/10.1007/s12013-025-01703-8)
  11. Joha, Z., & Taşkıran, A. Ş. (2023). Hidrojen peroksit ile indüklenen C6 hücrelerinde oksidatif stres kaynaklı apoptosis ve inflamatuar artışına karşı astaksantinin koruyucu etkisi. Turkish Journal of Agriculture-Food Science and Technology, 11(9), 1686–1692. [https://doi.org/10.24925/turjaf.v11i9.1686-1692.6281](https://doi.org/10.24925/turjaf.v11i9.1686-1692.6281)
  12. Kwan, P., Arzimanoglou, A., Berg, A. T., Brodie, M. J., Allen Hauser, W., Mathern, G., Moshé, S. L., Perucca, E., Wiebe, S., & French, J. (2010). Definition of drug resistant epilepsy: consensus proposal by the ad hoc Task Force of the ILAE Commission on Therapeutic Strategies. Epilepsia, 51(6), 1069–1077. [https://doi.org/10.1111/j.1528-1167.2009.02397.x](https://doi.org/10.1111/j.1528-1167.2009.02397.x)
  13. Lam, P., Newland, J., Faull, R. L. M., & Kwakowsky, A. (2023). Cation-chloride cotransporters KCC2 and NKCC1 as therapeutic targets in neurological and neuropsychiatric disorders. Molecules, 28(3), 1344. [https://doi.org/10.3390/molecules28031344](https://doi.org/10.3390/molecules28031344)
  14. Li, T., Deng, J., Qin, J., & Chu, X. P. (2024). Editorial: Neuromodulation for pharmacoresistant epilepsy: from bench to bed. Frontiers in Neurology, 15, 1354897. [https://doi.org/10.3389/fneur.2024.1354897](https://doi.org/10.3389/fneur.2024.1354897)
  15. Liu, R., Wang, J., Liang, S., Zhang, G., & Yang, X. (2020). Role of NKCC1 and KCC2 in epilepsy: from expression to function. Frontiers in Neurology, 10, 1407. [https://doi.org/10.3389/fneur.2019.01407](https://doi.org/10.3389/fneur.2019.01407)
  16. Monteiro, Á. B., Alves, A. F., Ribeiro Portela, A. C., Oliveira Pires, H. F., Pessoa de Melo, M., Medeiros Vilar Barbosa, N. M., & Bezerra Felipe, C. F. (2024). Pentylenetetrazole: A review. Neurochemistry International, 180, 105841. [https://doi.org/10.1016/j.neuint.2024.105841](https://doi.org/10.1016/j.neuint.2024.105841)
  17. Morimoto, K., Fahnestock, M., & Racine, R. J. (2004). Kindling and status epilepticus models of epilepsy: rewiring the brain. Progress in Neurobiology, 73(1), 1–60. [https://doi.org/10.1016/j.pneurobio.2004.03.009](https://doi.org/10.1016/j.pneurobio.2004.03.009)
  18. Namulodi, S., Torun, I. E., Bayiroglu, F., Kaya, M. S., & Kilinc, E. (2025). Adropin ameliorates behavioral seizures and the relevant neuroinflammation, oxidative stress, and neural damage in a rat model of pentylenetetrazole-induced seizure potentially by reducing the activation of NF-κB/IkB-α signaling pathway. Metabolic Brain Disease, 40(5), 222. [https://doi.org/10.1007/s11011-025-01654-2](https://doi.org/10.1007/s11011-025-01654-2)
  19. Rao, S., Farhat, A., Rakshasbhuvankar, A., Athikarisamy, S., Ghosh, S., & Nagarajan, L. (2023). Effects of bumetanide on neonatal seizures: A systematic review of animal and human studies. Seizure, 111, 206–214. [https://doi.org/10.1016/j.seizure.2023.09.007](https://doi.org/10.1016/j.seizure.2023.09.007)
  20. Raol, Y. H., & Brooks-Kayal, A. R. (2012). Experimental models of seizures and epilepsies. Progress in Molecular Biology and Translational Science, 105, 57–82. [https://doi.org/10.1016/B978-0-12-394596-9.00003-2](https://doi.org/10.1016/B978-0-12-394596-9.00003-2)
  21. Samokhina, E., & Samokhin, A. (2018). Neuropathological profile of the pentylenetetrazol (PTZ) kindling model. International Journal of Neuroscience, 128(11), 1086–1096. [https://doi.org/10.1080/00207454.2018.1481064](https://doi.org/10.1080/00207454.2018.1481064)
  22. Tan, S., Wood, M., & Maher, P. (1998). Oxidative stress induces a form of programmed cell death with characteristics of both apoptosis and necrosis in neuronal cells. Journal of Neurochemistry, 71(1), 95–105. [https://doi.org/10.1046/j.1471-4159.1998.71010095.x](https://doi.org/10.1046/j.1471-4159.1998.71010095.x)
  23. Taşkıran, A. S., Özdemir, E., Gümüş, E., & Ergül, M. (2020). The effects of salmon calcitonin on epileptic seizures, epileptogenesis, and postseizure hippocampal neuronal damage in pentylenetetrazole-induced epilepsy model in rats. Epilepsy & Behavior, 113, 107501. [https://doi.org/10.1016/j.yebeh.2020.107501](https://doi.org/10.1016/j.yebeh.2020.107501)
  24. Taşkıran, A., & Yıldız Asdemir, T. (2023). Investigation of the effect of pumpkin (Cucurbita pepo L.) seed oil on pentylenetetrazole-induced neuronal damage in HT-22 cell line. Turkish Journal of Agriculture-Food Science and Technology, 11(s1), 2499–2504. [https://orcid.org/0000-0002-5810-8415](https://orcid.org/0000-0002-5810-8415)
  25. Yang, N., Guan, Q. W., Chen, F. H., Xia, Q. X., Yin, X. X., Zhou, H. H., & Mao, X. Y. (2020). Antioxidants targeting mitochondrial oxidative stress: promising neuroprotectants for epilepsy. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020, 6687185. [https://doi.org/10.1155/2020/6687185](https://doi.org/10.1155/2020/6687185)
  26. Yulak, F., Joha, Z., Öztürk, A., İnan, Z. D. Ş., & Taşkıran, A. Ş. (2025). Enoxaparin protects C6 glioma cells from glutamate-induced cytotoxicity by reducing oxidative stress and apoptosis. Molecular Neurobiology, 62(4), 4631–4640. [https://doi.org/10.1007/s12035-024-04587-6](https://doi.org/10.1007/s12035-024-04587-6)
  27. Zhang, S., Meor Azlan, N. F., Josiah, S. S., Zhou, J., Zhou, X., Jie, L., Zhang, Y., Dai, C., Liang, D., Li, P., Li, Z., Wang, Z., Wang, Y., Ding, K., Wang, Y., & Zhang, J. (2023). The role of SLC12A family of cation-chloride cotransporters and drug discovery methodologies. Journal of Pharmaceutical Analysis, 13(12), 1471–1495. [https://doi.org/10.1016/j.jpha.2023.09.002](https://doi.org/10.1016/j.jpha.2023.09.002)