Yapay Zeka Hızlı Bakış & Çıkarımlar
AI InsightTüm numunelerin aktif madde içeriği ±%10 spesifikasyon sınırları içindeydi ve başlıca safsızlık seviyelerinin kabul edilebilir eşiklerin altında olduğu tespit edilmiştir.
📌 3 Maddede Bu Makale
Özet
Bu çalışmada, basit ve hızlı bir izokratik ters fazlı yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) yöntemi geliştirilmiştir. Bu yöntem, fipronil ve (S)-metopren içeren spot-on ürünlerinde aktif maddelerin ve bunların başlıca safsızlıkları olan fipronil sülfon ile cis-metoprenin eşzamanlı olarak belirlenmesine olanak sağlamaktadır. Ayırma işlemi, End-capped monolitik bir kolon kullanılarak, 1,0 mL/dk hızında asetonitril ve %0,1 formik asitten (70:30, v/v) oluşan izokratik bir mobil faz ve 245 nm'de UV algılama ile gerçekleştirilmiştir. Geleneksel partikül kolonlarla karşılaştırıldığında, bu yöntem çok düşük sistem geri basıncı (~13 bar) ve kısa analiz süresi (~12 dk). Yöntem, seçicilik, doğrusallık, hassasiyet, doğruluk, tespit sınırı (LOD), miktar tayini sınırı (LOQ) ve sistem uygunluğu açısından doğrulanmıştır. İyi bir doğrusallık elde edilmiştir (R² ≥ 0,995) ve tekrarlanabilirlik (%RSD < 2,0) ile geri kazanım değerleri %95,68 ile %99,07 arasında değişmiştir. Yöntem, %0,05'in altındaki safsızlıkların tespit edilmesini sağlamıştır. Yöntemin çevresel etkisi, AGREE (Analytical GREEnness Metric) ve GAPI (Green Analytical Procedure Index) kullanılarak değerlendirilmiştir. Azalan analiz süresi ve düşük çözücü tüketimi, yöntemin yeşil analitik kimya (GAC) ilkelerine uygunluğunu teyit etmiştir. Doğrulama sonrasında, yöntem Türkiye pazarında bulunan on ticari ürüne uygulanmıştır. Tüm numunelerin aktif madde içeriği ±%10 spesifikasyon sınırları içindeydi ve başlıca safsızlık seviyelerinin kabul edilebilir eşiklerin altında olduğu tespit edilmiştir. Bu çalışma, rutin kalite kontrol ve safsızlık profillemesi için uç kapaklı monolitik kolona dayalı pratik, maliyet etkin ve çevre dostu bir HPLC yöntemi önermektedir.
Abstract
In this study, a simple and rapid isocratic reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) method was developed. This method allows the simultaneous determination of active substances and their major impurities, fipronil sulfone and cis-methoprene, in spot-on products containing fipronil and (S)-methoprene. Separation was achieved using an end-capped monolithic column, with an isocratic mobile phase composed of acetonitrile and 0.1% formic acid (70:30, v/v) at 1.0 mL/min and UV detection at 245 nm. Compared to conventional particulate columns, this method provides significant advantages, including very low system back-pressure (~13 bar) and a short analysis time (~12 min). The method was validated for selectivity, linearity, precision, accuracy, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), and system suitability. Good linearity was obtained (R² ≥ 0.995), and repeatability (%RSD < 2.0) and recovery values ranged from 95.68% to 99.07%. The method enabled detection of impurities below 0.05%. The environmental impact of the method was evaluated using AGREE (Analytical GREEnness Metric) and GAPI (Green Analytical Procedure Index). The reduced analysis time and low solvent consumption confirmed the method’s compliance with green analytical chemistry (GAC) principles. Following validation, the method was applied to ten commercial products available on the Türkiye market. The active substance content of all samples was within the ±10% specification limits, and the levels of major impurities were found to be below acceptable thresholds. This study proposes a practical, cost-effective, and environmentally friendly HPLC method based on an end-capped monolithic column for routine quality control and impurity profiling.