Measurement Uncertainty of HbA2 in Thalasemia Screening

Abstract

Objective: High Performance Liquid Chromatography (HPLC) is widely used to classify hemoglobin fractions in screening of hemoglobinopathies. We, here in this study, detected the measurement uncertainty of the pivotal parameter in thalassemia screening, namely HbA2; and assumed its value in the laboratory test results. Materials and Methods: HbA2 analysis was measured by HPLC analyser Tosoh HLC-723 G8 instrument, which works in cation exchange principle, in Antalya Research and Education Biochemistry Laboratory. Measurement uncertainty calculations were made according to the Nordtest manuals, using internal, and external quality control values. Results: The measurement uncertainty for HbA2 was ±12.4% within a 95% coverage probability. The cut-off value used in our laboratory for a positive screening result is 3.5%. Our cut-off value should better be presented as 3.5±0.4% after the measurement uncertainty is included. Conclusions: Although HbA2 measurement is important parameter in the screening of thalassemia, the literature lacks studies of measurement uncertainty of this parameter. Each laboratory should define their own measurement uncertainties not only to set their quality goals, but also in order to verify their capability to aid in clinical decisions.

Özet

Amaç: Hemoglobinopati taraması için hemoglobin alt tiplerini ayırmada HPLC (High Performance Liquid Chromatography) yaygın kullanılan bir yöntemdir. Çalışmamızda talasemi taramasında önemli bir belirteç olan HbA2 parametresinin ölçüm belirsizliği hesaplaması yapılarak, bu belirsizliğin HbA2 sonuçlarına etkisini tespit etmeyi amaçlamıştır. Gereç ve yöntem: HbA2 analizi Antalya Eğitim ve Araştırma hastanesi biyokimya laboratuvarında Tosoh HLC-723 G8 cihazında katyon değiştirici HPLC yöntemi ile yapıldı. Ölçüm belirsizliğinin hesaplanması Nordtest kılavuzuna uygun olarak hesaplandı. Ölçüm belirsizliği hesaplanmasında laboratuvarımızda uygulanan iç kalite kontrol verileri ile laboratuvarlar arası değerlendirmeye dayalı olan dış kalite kontrol verileri kullanıldı. Bulgular: HbA2 için ölçüm belirsizliği %95 güven aralığında ±%12.4 olarak bulundu. laboratuarı-mızda talasemi taramasının pozitif sonucu için HbA2nin cut-off değeri %3.5tur. Cut-off değerimiz ölçüm belirsizliği ile birlikte %3.5±0.4 olarak rapor edilebilir. Sonuçlar:. HbA2 talasemi taramasında önemli bir parametre olmasına rağmen literatürde bu parametrenin ölçüm belirsizliği hakkında herhangi bir yayın yoktur. Her laboratuvar kendi kalite geliştirme süreçleri içinde ölçüm belirsizlikleri tahminlerini yapması, klinisyene tanı ve tedavi noktasında katkı sağlar.