Survey of T. annulata and T. buffeli/orientalis'in cattle in the region of Erzincan using reverse line blotting

Erzincan yöresinde sığırlarda Theileria annulata ve Theileria buffeli/orientalis'in reverse line blotting yöntemi ile araştırılması

Abstract

This study was carried out to investigate Theileria annulata and T. buffeli/orientalis in cattle in the region of Erzincan using reverse line blotting (RLB) and microscopical examination. A total of 123 blood samples and thin blood smears were collected from cattle in distinct locations. Thin blood smears were microscopically examined for Theileria piroplasms. The 18S SSU rRNA gene in the DNA of Theileria spp extracted from blood was amplified and used in RLB. For this purpose, PCR products were hybridized with specific probes for over-all Theileria spp., T. annulata and T. buffeli/orientalis as well as Babesia spp. While Theileria spp. were observed in 14 out of 123 cattle, (11.38 %) during microscopical examination, T. annulata was detected in 19 (15.45%) cattle and T. buffeli/orientalis, in 12 (9.76%) by RLB, respectively. Mixed infection was also detected in three samples.

Özet

Bu çalışmada reverse line blotting (RLB) ve mikroskopik muayene metotları kullanılarak, Erzincan yöresinde sığırlarda Theileria annulata ve T.buffeli/orientalis’in araştırılması amaçlanmıştır. Bu amaçla, değişik odaklardan toplam 123 sığırdan EDTA’lı tüplere kan örneği alınmış ve her hayvanın perifer kan frotisi hazırlanmıştır. Hazırlanan frotiler mikroskopta Theileria spp. piroplasmları yönünden incelenmiştir. Alınan kan örneklerinden DNA ekstraksiyonu yapılmıştır. Elde edilen edilen DNA’lardan Theileria türlerinin 18 S rRNA geni amplifiye edilerek RLB testinde kullanılmıştır. Bu amaçla, PCR ürünleri catch all (Theileria spp, Babesia spp.), Theileria spp., T. annulata, T. buffeli/orientalis türleri için spesifik proplarla hibridizasyona tabi tutulmuştur. Sonuç olarak, mikroskopik incelemede 14 (%11,38) sığırda Theileria spp. piroplasmlarına rastlanırken, RLB testi ile 19 (%15,45) sığırda T. annulata, 12 (%9,76)sığırda ise T.buffeli/orientalis saptanmıştır. Üç örnekte ise miks enfeksiyon tespit edilmiştir.