Production of Toxoplasma gondii in vero cell cultur

Abstract

Objective: To investigate parasite-host dynamics in cultures of Toxoplasma gondii (T. gondii). Methods: T. gondii tachyzoites were incubated in Vero-E6 cell cultures at 37°C, 5% CO2. Tachyzoites and host cells were characterized by light microscopy. Growth kinetics of the parasite were determined. Results: Doubling time of tachyzoites and viability of host cells were determined by comparing tachyzoite cultures and control Vero cell cultures that were free of parasites. Tachyzoites harvested from cell cultures were established as a line for future studies. Purified tachyzoit line was named as GPK-001, a catalog name for the line. Conclusion: In this study, we showed that an intracellular parasite, T. gondii can be produced in cell cultures under sterile conditions. We believe that the tachyzoite line established in this study would be useful in many other studies and provide answers to questions regarding biology and treatment of T. gondii infections.

Özet

Amaç: Toxoplasma gondii (T. gondii) kültürlerinde konak-parazit dinamiklerinin araştırılması. Yöntemler: T. gondii, takizoitleri Vero-E6 hücre kültürlerinde 37°C’de, %5 CO2’li ortamda inkübe edildi. Takizoit ve konak hücreleri ışık mikroskobisi ile karakterize edildi. Parazitin üreme kinetikleri belirlendi. Bulgular: Takizoit kültürleri ve parazit içermeyen kontrol Vero hücre kültürleri karşılaştırılarak, takizoitlerin çoğalma zamanı ve konak hücrelerin canlılığı saptandı. Kültürlerden toplanan takizoitler daha sonraki araştırmalar için bir seri haline getirildi. Saflaştırılan parazit serisi, bir katalog adı altında, GPK-001 olarak adlandırıldı. Sonuç: Bu araştırmada, hücre içi bir parazit olan T. gondii’nin steril şartlar altında hücre kültürlerinde üretilebileceğini gösterdik. Çalışmamızda oluşturulan parazit hattının diğer pek çok çalışmada yararlı olacağına ve T. gondii enfeksiyonlarının biyolojisi ve tedavisi hususunda sorulara cevaplar sağlıyacağına inanıyoruz.