Morphometric and Molecular Study of Fasciola Isolates from Ruminants in Iran

İran’da Geviş Getiren Hayvanlarda Fasciola Izolatlarının Morfometrik ve Moleküler Çalışması

Elham AKHLAGHİ, Mohammad Ali MOHAMMADİ, Naser ZİAALİ, Mohammad Reza BANESHİ, Saeid NASİBİ, Sima ROSTAMİ, Majid Fasihi HARANDİ, Hossein KAMYABİ

Abstract

Objective: The purpose of the present study was morphometric and molecular characterization of Fasciola isolates from ruminants in Iran.Methods: Flukes were collected from the livers of 54 naturally infected sheep and cattle. The proportion of body length to width (L/W) ofeach fresh fluke was measured using a digital caliper. We employed receiver operating characteristic (ROC) curve analysis to explore thereliability of L/W for differentiating the two species. Polymerase chain reaction (PCR)-sequencing was performed on ribosomal Internal Tran-scribed Spacers (ITS) and mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (cox1) genes. The sequences were then analyzed and phylogeneticrelationships were investigated.Result: Forty-eight out of 54 isolates (88.9%) were identified as F. hepatica and four isolates (7.4%) as F. gigantica. All the sheep isolates wereF. hepatica, while 4 out of 10 cattle were infected with F. gigantica. The morphometric study revealed an L/W ratio of 1.2 to 6.5 in Fasciolaisolates with significantly higher L/W ratio in F. gigantica (p

Özet

Amaç: Bu çalışmanın amacı İran’daki geviş getiren hayvanlarda Fasciola izolatlarının morfometrik ve moleküler karakterizasyonunu yapmaktır. Yöntemler: Doğal olarak enfekte olan 54 koyun ve sığırın karaciğerinden parazitler alındı. Her canlı parazitin vücut uzunluğunun genişliğine oranı (L/W) dijital kaliper ile ölçüldü. İki türü ayırt etmek için L/W güvenilirliğini bulmak için alıcı işletim karakteristik (ROC) eğrisi kullanıldı. Polimeraz zincir reaksiyon (PZR) dizilimi ribozomal iç transkripsiyonu aralayıcı (ITS) ve mitokondriyal Sitokrom c oksidaz altbirimi 1 (cox1) gen- lerinde yapıldı. Daha sonra dizilimler analiz edildi ve filogenetik ilişkiler araştırıldı. Bulgular: Elli dört izolattan 48’inin (%88,9) F. hepatica ve 4’ünün (%7,4) F. gigantica olduğu belirlendi. On sığırdan 4’ü F. gigantica ile enfekte olurken, tüm koyun izolatları F. hepatica olarak bulundu. Morfometrik çalışmada, Fasciola izolatlarında 1,2/6,5 olarak tespit edilen L/W oranı, F. gigantica izolatlarından anlamlı ölçüde daha yüksekti. ROC eğrisi analizine göre, 3,55 L/W değeri iki türü ayırt etmek için kritik değer olarak kabul edildi. Sonuç: Mevcut çalışmanın bulguları güneydoğu İran’da her iki Fasciola türünün varlığını göstermektedir. Filogenetik analiz F. hepatica ve F. gigantica’yi gösteren iki farklı türü ortaya koymuştur. Bu çalışmadaki iki izolat Fasciola sp. olarak tanımlandı. ITS fragmentleri F. gigantica ile aynı iken, bu izolatların mitokondriyal DNA’ları F. hepatica’ya benzerdi