Analysis of the effect of DEK overexpression on the survival and proliferation of bone marrow stromal cells

Aşırı DEK ifadesinin kemik iliği stroma hücrelerinin canlılığı ve çoğalmasına etkilerinin incelenmesi

Abstract

Objective: DEK is ubiquitously expressed and encodes a nuclear protein, which is also released from some cells. Overexpression of DEK suppresses proliferation of some blood cell progenitors whereas it increases proliferation of epithelial tumors. We showed that DEK is overexpressed in BM cells of 12% of multiple myeloma (MM) patients. Here, we aimed to test if DEK overexpression effects the proliferation and viability of BM stromal cells or MM cells co-cultured with DEK-overexpressing stromal cells, mim- icking the BM microenvironment.Methods: DEK is stably overexpressed in the BM stromal cell line HS27A. Periodic growth curve and fluorescent activated cell sorting (FACS) analysis was performed to determine the effect of DEK overexpression on HS27A cells and MM cell lines (RPMI-8226 and U266) that are co- cultured with these HS27A cells.Results: We showed that, on the contrary to blood progen- itors or ephitelial cells, DEK overexpression doesn’t alter the viability or proliferation of the HS27A cells, or the MM cell lines which are co-cultured with DEK-overexpressing HS27A cells.Conclusions: Our results suggest that effect of DEK over- expression on the proliferation is cell type and context dependent and increased DEK expression is tolerable by the stromal cells and the co-cultured MM cell lines without effecting proliferation and viability.

Özet

Amaç: DEK her hücrede ifade edilen bir hücre çekirdeği proteinidir ve bazı kan hücrelerinden de salgılanabil- mektedir. Aşırı DEK ifadesi öncü kan hücrelerinin çoğal- masını baskılarken, epitel kökenli kanser hücrelerinin çoğalmasını arttırmaktadır. Daha önce, multiple miyelom (MM) hastalarının %12’sinin stromal hücreleri de içeren kemik iliği (Kİ) hücrelerinde DEK’in aşırı ifade edildiğini gösterdik. Bu çalışmada DEK aşırı ifadesinin, Kİ stroma hücrelerinin ve Kİ mikroçevresini taklit edecek şekilde bu hücrelerle birlikte kültür edilen MM hücrelerinin canlılığı ve çoğalmasına olan etkilerini test etmeyi amaçladık. Yöntem: Kİ stroma hücre hattı HS27A’da kalıcı olacak şekilde DEK aşırı ifadesi sağlandı. DEK aşırı ifadesi sağ- lanan HS27A hücreleri ve bu hücrelerle birlikte kültür edilen MM hücre hatlarına (RPMI-8226 ve U266) periyodik olarak hücre çoğalma analizi ve FACS analizi uygulandı. Bulgular: Çalışmamızda, öncü kan hücreleri ve epitel hüc- relerinin aksine, DEK aşırı ifadesinin HS27A hücrelerinin, ya da bu hücrelerle birlikte kültür edilen MM hücrelerinin çoğalmasını etkilemediğini gösterdik. Sonuç: Elde ettiğimiz veriler, aşırı DEK ifadesinin hücre çoğalmasını etkilemesinin, hücre tipi ve içeriğine bağlı oldu- ğunu ve DEK aşırı ifadesinin Kİ stroma hücresi HS27A ve bu hücrelerle birlikte kültür edilen MM hücre hatlarında çoğal- mayı etkilemeyecek şekilde tolere edildiğini göstermektedir.