Effects of Rituximab on JAK-STAT and NF-κB signaling pathways in acute lymphoblastic leukemia and chronic lymphocytic leukemia

Rituximab’ın akut lenfoblastik lösemi ve kronik lenfositik lösemide JAK-STAT ve NF-κB sinyal yolaklarına etkileri

Nur Selvi GÜNEL, Ayşegül DALMIZRAK, Güray SAYDAM, Fahri ŞAHİN, Burçin TEZCANLI KAYMAZ, Buket KOSOVA

Abstract

Objectives: Rituximab is a monoclonal antibody that targets the B-lymphocyte surface antigen CD20. It is used in the treatment of some diseases including B-cell chroniclymphocytic leukemia (B-CLL). There are a lot of data regarding effect of Rituximab on lymphoma cells. But, there is no satisfactory information about the effect ofRituximab on the signaling pathways in leukemia cells. In this study, it was aimed to understand the effect of Rituximab on JAK-STAT and NF-κB signaling pathways in B-cellacute lymphoblastic leukemia (B-ALL) and B-CLL.Material and methods: Apoptotic effect of Rituximab in the TANOUE (B-ALL) and EHEB (B-CLL) cell lines were evaluated by using the Annexin V method. mRNA expression levels of STAT3 and RelA were analysed by quantitative RT-PCR (Q-PCR). Alterations in STAT3 and RelA protein expressions were detected by using a chromogenicalkaline phosphatase assay after Western Blotting. Results: Rituximab had no apoptotic effect on both cell lines. Complement-mediated cytotoxicity was only detected in EHEB cells. mRNA and protein expressions ofSTAT3 and RelA genes were decreased following Rituximab treatment.Conclusion: Our preliminary results suggest that the use of Rituximab might be effective in B-ALL though bothsignaling pathways.

Özet

Amaç: Rituximab, B-lenfosit yüzey antijeni CD20’yi hedefleyen bir monoklonal antikordur. B-hücre kronik lenfositik lösemi (B-KLL) gibi bazı hastalıkların tedavisinde kullanılmaktadır. Rituximab’ın lenfoma hücrelerindeki etkisi ile ilgili birçok veri vardır. Ancak, lösemi hücrelerindeki sinyal yolaklarına etkisi ile ilgili yeterli bilgi bulunmamaktadır. Bu çalışmada, Rituximab’ ın, B-hücre akut lenfoblastik lösemi (B-ALL) ve B-KLL’deki JAK-STAT ve NF-κB sinyal yolakları üzerindeki etkisinin anlaşılması hedeflenmiştir. Gereç ve Yöntem: Rituximab’ ın TANOUE (B-ALL) ve EHEB (B-KLL) hücre hatlarındaki apoptotik etkisi Annexin V yöntemi ile belirlendi. STAT3 ve RelA’nın mRNA ekspresyon seviyeleri kantitatif RT-PCR (Q-PCR) ile analiz edildi. STAT3 ve RelA protein ekspresyonlarındaki değişimler Western Blot sonrası kromojenik alkalen fosfataz analizi ile tespit edildi. Bulgular: Rituximab’ın her iki hücre hattında apoptotik etkisi bulunmamaktadır. Kompleman-aracılı sitotoksisite sadece EHEB hücre hattında saptanmıştır. Rituximab uygulaması sonrası STAT3 ve RelA’nın mRNA ve protein ekspresyonları azalmıştır. Sonuç: İlk sonuçlarımız, Rituximab kullanımının B-ALL’ de her iki sinyal yolağı aracılığıyla etkili olabileceğini düşündürmektedir.