Cyclosporine-A induces apoptosis in human prostate cancer cells PC3 and DU145 via downregulation of COX-2 and upregulation of TGFβ

Siklosporin-A, İnsan Prostat Kanseri Hücreleri PC3 ve DU145 ‘te COX-2’yi Azaltarak ve TGFβ’yi Arttırarak Apoptozu İndükler

Abstract

Background: Potential targets for prostate cancer therapy are urgently needed for curative of patients. CyclosporineA (CsA), an immunosuppressive and a selective cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitor, exerts antitumor activity. However, the molecular effects of CsA is not fully understood in prostate cancer. In this research, we sought to determine role and mechanism of CsA in prostate cancer. Materials and methods: PC3 and DU145 cells were treated with CsA time (12, 24, 48 h) and dose dependent (2.5, 10, 25 μM) and cell survival, migration, colony formation, expression of apoptosis related proteins/genes using MTT assay, scratch assay, Western blotting/qPCR. At the same time, cells treated with CsA to test on the effects of COX-2 promoter activity using luciferase reporter plasmid. Lastly, functional role in the CsA treatment prostate cancer cells were interrogated for relationship of TGFβ, Akt, caspases and COX-2. Results: These study findings provided direct evidences that the CsA induced apoptosis and downregulated migration. Conclusions: CsA downregulated Akt as well as COX-2 and upregulated TGFβ, resulting in the suppression of cell migration which was augmented a potential therapeutic of CsA in prostate cancer cells.

Özet

Amaç: Prostat kanser tedavisi için hastalara yeni tedavi edici potansiyel ajanlar gerekmektedir. Siklosporin-A (CsA) bir immunsupressör olarak bilinir ve COX-2 inhibitörüdür aynı zamanda anti-tümör özelliği de bildirilir. Fakat CsA’nın prostat kanserinde moleküler etkileri henüz bilinmemektedir. Bu çalışma CsA’nın prostat kanserindeki mekanizması ve rolünü aydınlatmayı amaçlamıştır. Gereç ve Yöntem: İnsan PC3 ve DU145 hücreleri zamana (12, 24, 48 saat) ve doza bağlı olarak (2.5, 10, 25 μM) inkübe edilerek hücre canlılığı, migrasyon, koloni oluşumu, apoptoz ilişkili protein/genlerin ekspresyon düzeyleri MTT, migrasyon-mesafe ölçümü, Western blot/qPCR kullanılarak yapıldı. Aynı zamanda hücrelerde CsA ile inkübasyonunun COX-2 promoter aktivitesi üzerindeki etkisi lusiferaz aktivitesi ile ölçüldü. Son olarak CsA tedavisinin prostat kanserinde TGFβ, Kaspazlar ve COX-2 ilişkisi sorgulandı. Bulgular: Bu çalışmanın bulguları CsA’nın prostat kanserinde apoptozu indüklediği ve migrasyonu azalttığı yönündedir. Sonuç: CsA tedavisi prostat kanserinde Akt ve COX-2’yu azaltıp, TGFβ’yı arttırmıştır. Böylece hücre migrasyonunu baskılaması ile prostat kanseri tedavisinde potansiyel bir terapötiktir.