Synthetic peptide vaccine for Foot-and- Mouth Disease: synthesis, characterization and immunogenicity

Kadriye KIZILBEY, Sezen Canım ATEŞ, Zeynep MUSTAFAEVA AKDESTE, Serap DERMAN, Banu MANSUROĞU

Abstract

Background: The conjugations of antigenic syntheticpeptide sequences with carrier polymers have opened newpossibilities for the treatment of diseases. In this study,135–161 peptide sequence of VP1 capsid protein of Footand-Mouth Disease was cross-linked with P(VP-co-AA)copolymer by covalent conjugation using water-solublecarbodiimide at different ratio of components (γ=5, 7, 9, 11,15) for the first time in the literature.Materials and methods: Bioconjugates were characterizedby gel permeation chromatography and fluorescence spectroscopyto identify occurrences of the conjugates. After characterization,γ=15 bioconjugate was determined as optimumconjugate for immunization studies and IC50 value is calculatedas 1.227 mg/mL. By determining the nontoxic range, indirectELISA were performed to evaluate the immune response elicitedin balb/c mice by either peptide or P(VP-co-AA)-peptidebioconjugates (γ=15). Two injections were applied to eachgroup and high immune responses were obtained against γ=15conjugate compared to free peptide and control.Results and conclusion: At the end of 9-week, the generalpattern of immunoreactivity was acquired as γ=15>>peptide>control. Peptide formulated in the conjugated form hadhigher antibody response than free peptide and control(p

Özet

Amaç: Antijenik özellikli sentetik peptit dizilerinin taşıyıcı polimerler ile konjugasyonu, hastalıkların tedavisi için yeni olanaklar yaratmaktadır. Bu çalışmada literatürde ilk kez, Ayak ve Ağız Hastalığının VP1 kapsid proteininin 135–161 peptit dizisi, farklı bileşen oranlarında suda çözünür karbodiimid kullanılarak P(VP-ko-AA) kopolimeriyle kovalent konjugasyon ile çapraz bağlanmıştır (γ=5, 7, 9, 11, 15). Gereç ve Yöntem: Biyokonjugatlar, konjugatların oluşumlarını tanımlamak için jel geçirgenlik kromatografisi ve floresan spektroskopisi ile karakterize edilmiştir. Karakterizasyondan sonra γ=15 biyokonjugatı immünizasyon çalışmaları için optimum konjugat olarak belirlenmiş ve IC50 değeri 1.227 mg/ml olarak hesaplanmıştır. Toksik olmayan aralığın belirlenmesiyle, balb/c farelerinde peptit veya P(VP-ko-AA)- peptid biyokonjugatlarına karşı oluşan immün cevabı değerlendirmek için dolaylı ELISA yapılmıştır (γ=15). Her gruba iki enjeksiyon uygulanmış ve serbest peptit ve kontrole kıyasla γ=15 konjugatına karşı yüksek immün yanıt elde edilmiştir. Bulgular ve Sonuç: 9 haftanın sonunda, immün reaktivitenin genel örüntüsü γ=15>peptid>kontrol şeklinde elde edilmiştir. Konjüge formda formüle edilmiş peptit, serbest peptit ve kontrolden daha yüksek antikor cevabı oluşturmuş (her iki durumda da p