The Effect of Rusa unicolor Antler Deer Extracts from East Kalimantan in Bone Turnover Cell Models

Doğu Kalimantan’dan Rusa unicolor Geyiği Boynuzu Ekstraktlarının Kemik Dönüşümü Hücre Modelleri Üzerine Etkisi

Retno WIDYOWATI, Suciati SUCIATI, Dewi Melani HARYADI, Hsin-I CHANG, IPG Ngurah SURYAWAN, Agung Widi UTAMA

Abstract

Objectives: Osteoporosis is a condition characterized by skeletal degradation of osseous tissue resulting in an escalated chance of broken bones.Traditionally, Rusa unicolor horn from East Kalimantan is used to treat many diseases, including conditions associated with bone turnover. The aimof the present research was to analyze the effects of 70% ethanol and aqueous extracts of R. unicolor antler’s horn from East Kalimantan on nitricoxide inhibition, osteoblast differentiation, and mineralization related to bone turnover.Materials and Methods: Nitric oxide inhibition of the extracts in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages was evaluated by Griessreagent, while the effects of extracts on osteoblast differentiations were measured by alkaline phosphatase in p-nitrophenyl phosphate. Theireffects on mineralization was determined using alizarin red staining.Results: The 70% ethanol and aqueous extracts inhibited cell inflammation (40% and 80%, respectively) and stimulated osteoblast differentiation(65% and 52%, respectively). In the mineralization test, the aqueous extract showed an effect two times higher than that of 70% ethanol extract.Conclusion: The extracts can effectively degrade inflammatory marker expression and preserve osteoblast functions.

Özet

Amaç: Osteoporoz artmış kemik kırılmalarıyla sonuçlanan kemik dokusundaki iskelet degredasyonu ile karakterize bir durumdur. Geleneksel olarak, Doğu Kalimantan’dan Rusa unicolor boynuzu kemik dönüşümü dahil, birçok hastalığın tedavisinde kullanılır. Bu çalışmanın amacı Doğu Kalimantan R. unicolor geyiği boynuzunun %70’lik etanol ve sulu ekstrelerinin nitrik oksit inhibisyonu, osteoblast farklılaşması ve kemik dönüşümüyle ilişkili minerilizasyon üzerine etkilerinin araştırılmasıdır. Gereç ve Yöntemler: Ekstratların lipopolisakkarit ile stimüle edilen RAW 264,7 makrofajlarında nitrik oksit inhibisyonu Griess belirteciyle değerlendirilirken, ekstrelerin osteoblast farklılaşması üzerine etkileri p-nitrofenil fosfatta alkalin fosfataz ölçülerek belirlenmiştir. Mineralizasyon üzerine etkileri ise, alizarin kırmızısı kullanılarak belirlenmiştir. Bulgular: %70’lik etanol ve sulu ekstrelerinin hücre enflamasyonunu inhibe ettiği (sırasıyla %40 ve %80) ve osteoblast farklılaşmasını stimüle ettiği (sırasıyla %65 ve %52) belirlenmiştir. Minerilazasyon testinde, sulu ekstre etanol ekstresine göre iki kat daha yüksek etki göstermiştir. Sonuç: Ekstrelerin etkin bir şekilde enflamasyon belirteci ekspresyonun degrede etmiş ve osteoblast işlevlerini korumaktadır.