Immunoregulatory Effects of Human Amnion Epithelial Cells on Natural Killer and T Cells in Women with Recurrent Spontaneous Abortion (RSA)

Tekrarlayan Gebelik Kaybı Olan Kadınlarda İnsan Amniyon Epitel Hücrelerinin Doğal Öldürücü ve T Lenfositleri Üzerine Olan Etkisi

Abstract

ntroduction: Unexplained Recurrent Spontaneous Abortion (URSA) is the most common immunologicalcomplication during pregnancy. It has been found that the cells such as human amnion epithelial cells (hAECs) have thepotency to modulate immune responses in vitro and in vivo. In the present study, we assessed the immunomodulatoryeffect of hAECs on NK cells and T cells in women with URSA.Materials and Methods: Peripheral Blood mononuclear cells (PBMC) were obtained from 14 URSA patients andco-cultured with isolated hAECs. NK cells and T cells were identified using anti-CD56 and anti-CD3 monoclonalantibodies (mAb). The expression of the activating receptor CD69 and the degranulation marker CD107a on NK cellsand T cells were detected using specific mAb and analyzed by flow cytometry.Results: We found that CD69 activating receptor expression on NK cells and T cells was significantly decreasedby incubation with hAECs in a dose-dependent manner (p=0.049). Also, the degranulation marker CD107a wassignificantly downregulated on NK cells and T cells following incubation with hAEC (p=0.003).Conclusion: Our results suggest hAECs have immune regulatory effects on activation and cytotoxicity of NK and Tcells. Potential therapeutic application of hAECs for dysregulated NK and T cells immunity should be investigated inthe future.

Özet

Giriş: Açıklanamayan Tekrarlayan Gebelik Kaybı (ATGK) gebelik sırasında görülen en sık immmünolojik komplikasyondur. İnsan amnion sıvısı epitel hücrelerinin (İASEH), bağışıklık yanıtını hem in vitro hem de in vivo olarak bağışıklık yanıtını düzenleyebildiği gösterilmiştir. Bu çalışmada, İASEH’nin ATGK olan hastalardaki bağışıklık düzenleyici etkisinin araştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: Periferik Kan Mononükleer Hücreler 14 ATGK hastasından izole edildi ve İASEH’leri ile birlikte kültüre edildi. Doğal öldürücü (Natural Killer) hücreleri ve T hücreleri anti-CD56 ve anti-CD3 monoklonal antikorları kulllanılarak tanımlandı. Hücreler, uyarılmayı gösteren CD69 ve degranülasyon ile ilişkili CD107a belirteçleri kullanılarak akan-hücre ölçerde irdelendi. Bulgular: İnsan amnion epitel hücreleri ile doza bağlı inkübasyon sonucu NK ve T hücrelerinde CD69 aktive edici resptör ekspresyonunda artış saptandı (p=0.049). Degranülasyon belirteci CD107a ekspresyonunun ise insan amnion epitel hücreleri ile inkübasyonu takiben NK ve T hücrelerinde anlamlı derecede düştüğü gözlendi (p=0.003).. Sonuçlar: Bulgularımız, insan amnion epitel hücrelerinin doğal öldürücü ve T lenfositlerinin sitotoksisitesini azaltarak düzenleyici etkide bulunduklarını göstermektedir. Bu hücrelerin etkinliği bozulmuş doğal öldürücü ve T hücrelerinin bağışıklık yanıtında düzenleyici olarak tedavide kullanılması araştırılmalıdır.