Cytokine Secretion and Proliferative Capacity of CD4+ T Cells in Delayed Type Hypersensitivity Reactions due to Ciprofloxacin

Siprofloksasine Bağlı Geç Tip Aşırı Duyarlılık Reaksiyonlarında CD4+ T Hücrelerinin Sitokin Salınımları ve Proliferatif Kapasiteleri

Esin AKTAŞ ÇETİN, Semra DEMİR, Leyla PUR ÖZYİĞİT, Günnur DENİZ, Belkıs ERTEK, Umut Can KÜÇÜKSEZER, Aslı GELİNCİK, Suna BÜYÜKÖZTÜRK

Abstract

Introduction: Ciprofloxacin (CPFX), a frequently prescribed quinolone, may induce cutaneous adverse drug reactions. Delayed type hypersensitivity reactions (DTHR) are often difficult to deal with, therefore, in vitro testing for DTHR is the long-anticipated method for their management. This study aimed to evaluate potential value of lymphocyte transformation test (LTT) and intracellular cytokine secretion of drug stimulated CD4+ T cells in patients with DTHR against ciprofloxacin. Material and Methods: Patients experienced DTHR with CPFX (n=8) and healthy subjects (n=10) were enrolled. CPFX skin prick, patch and intradermal tests were performed. LTT by flow cytometry aimed to determine CPFXspecific CD4+ T cell proliferation. Intracellular IL-4, IL-10, IL-2 & IFN-γ levels were analysed by flow cytometry in CPFX-specific CD4+T cells. Cytokine contents of cell culture supernatants were evaluated by ELISA. Results: In patients with DTHR, 5 and 10 μg/mL CPFX induced significant CD4+T cell proliferation (p=0.014 and p=0.05, respectively). IL-2 (p=0.02, p=0.001 and p=0.001, respectively) and IL-4 (p=0.001) secreting CD4+T cell percentages were increased, while IFN-γ+(p=0.001, p=0.011 and p=0.012, respectively) and IL-10+(p=0.001, p=0.001 and p=0.002, respectively) CD4+T cells were decreased. The cell culture supernatants revealed downregulated IL-10 (p

Özet

Giriş: Siprofloksasin (SPFX), en yaygın kullanılan kinolon grubu antibiyotiklerden olup, kutanöz ters ilaç reaksiyonları oluşturabilme kapasitesine sahiptir. Gecikmiş tip aşırı duyarlılık reaksiyonlarında (ADR) kesin tanı konulması zor olmakla beraber in vitro tanı testlerinin geç tip ilaç ADR’de kullanımı önemlidir. Çalışmamızda SPFX’e bağlı geç tip ADR geçiren hastalarda, ilaçlar ile uyarılmış CD4+T hücrelerinde, hücre içi sitokin üretimleri ve lenfosit transformasyon (LTT) yanıtları araştırılmıştır. Gereç ve Yöntemler: Çalışmaya SPFX ile geç tip hipersensitivite reaksiyonu (n=8) geçiren hastalar ve sağlıklı kontroller (n=10) dâhil edilmiş, intradermal testler ve yama testleri uygulanmıştır. LTT metodu ile SPFX’e özgül CD4+T hücre proliferasyonu belirlenmiştir. SPFX’e özgül CD4+T hücrelerinde hücre içi IL-4, IL-10, IL-2 ve IFN-γ düzeyleri akan hücre ölçer kullanımı ile değerlendirilmiştir. Kültür üst sıvılarındaki sitokin düzeyleri ELISA aracılığı ile ölçülmüştür. Bulgular: Geç tip ADR geçiren hastalarda 5 ve 10 µg/ml SPFX uyarımı CD4+T hücre proliferasyonunu arttırmıştır (p=0.014 ve p=0.05, sırasıyla). IL-2 (p=0.02, p=0.001 ve p=0.001, sırasıyla) ve IL-4 (p=0.001) salgılayan CD4+T hücre yüzdesi artmasına rağmen IFN-γ+(p=0.001, p=0.011 ve p=0.012, sırasıyla) ve IL-10+(p=0.001, p=0.001 ve p=0.002, sırasıyla) CD4+T hücre oranları azalmıştır. Hücre kültür üst sıvılarında SPX uyarımından bağımsız olarak, hastalarda IL-10 düzeyi (p