Both Granulocytic and Non-Granulocytic Blood Cells Are Affected in Patients with Severe Congenital Neutropenia and Their NonNeutropenic Family Members: An Evaluation of Morphology, Function, and Cell Death

Ciddi Konjenital Nötropenisi Olan Hastalarda ve Nötropenik Olmayan Ebeveynlerinde Hem Granülositik Hem Granülositik Olmayan Kan Hücreleri Etkilenir: Morfoloji, Fonksiyon ve Hücre Ölümü Yönünden Bir Değerlendirme

Hüseyin ONAY, Yıldız YILDIRMAK, Mesude FALAY, Ayşe METİN, Aydan İKİNCİOĞULLARI, Gülsüm ÖZET, Lale OLCAY, Hamza OKUR, Sevgi YETGİN, Yahya BÜYÜKAŞIK, Esra ERDEMLİ, Şule ÜNAL, Ayşenur ÖZTÜRK, Deniz BİLLUR

Abstract

Objective: To examine granulocytic and non-granulocytic cells inchildren with severe congenital neutropenia (SCN) and their nonneutropenic parents.Materials and Methods: Fifteen patients with SCN and 21 nonneutropenic parents were evaluated for a) CD95, CD95 ligand, annexinV, propidium iodide, cell cycle, and lymphocyte subsets by flowcytometry; b) rapid cell senescence (of leukocytes) by senescenceassociated β-galactosidase stain; c) aggregation tests by aggregometer;d) in vitro bleeding time by PFA-100 instrument; e) mepacrine-labeleddense granule number of thrombocytes by fluorescence microscope;and f) hematomorphology by light and electron microscope. HAX1,ELANE, G6PC3, CSF3R, and JAGN1 mutations associated with SCNwere studied in patients and several parents.

Özet

Amaç: Ciddi konjenital nötropenisi (CKN) olan hastalar ve nötropenik olmayan ebeveynlerindeki granülositik ve granülositik olmayan kan hücrelerini incelemektir. Gereç ve Yöntemler: CKN’si olan 15 çocuk ve nötropenik olmayan 21 ebeveynin lenfosit, granülosit ve monositlerinde CD95, CD95 ligand, annexin V, hücre siklusu (periferik lenfositler, granülosiler +/- monositlerde) ve lenfosit alt grupları akım sitometri ile, b) hızlı hücre yaşlanması (lökositlerde) yaşlanma-ilişkili β-galaktozidaz boyası SAβ-galaktosidaz boyası ile, c) agregasyon testleri agregometre ile, d) in vitro kanama zamanı, PFA-100 aleti ile, e) trombositlerde mepakrin işaretli kaba granül sayısı floresan mikroskopu ile, f) hematomorfoloji ışık ve elektron mikroskopu ile değerlendirildi. Hastalarda ve bazı ebeveynlerde CKN ile ilişkili olarak HAX1, ELANE, G6PC3, CSF3R, JAGN1 mutasyonları çalışıldı.