EFFECT OF DIFFERENT DOSAGES OF PEG 6000 APPLICATION ON IN VITRO REGENERATION OF SAFFRON

FARKLI DOZLARDA PEG 6000 UYGULAMALARININ SAFRANDA İN VİTRO REJENERASYONA ETKİLERİ

Abstract

Crocus sativus L., known as saffron, is an important crop that dried stigmas of the plant have been used as a spice for the ancient time. Recently, abiotic stress is one of the most important problems for crop production. Drought stress is known as one of the significant abiotic stresses that limit plant growth at different levels. To select the drought- resistant plant, in vitro selection is one of the important methods. Polyethylene glycol is non- toxic and non-penetrable chemical and it is commonly used as a drought stress simulator in many research to observe the reaction of the plants. In this study, Crocus sativus L. corms were cultivated on MS medium including 30 g L-1 sucrose, 2 mg L-1 2,4-D + 1 mg L-1 2iP, 7 g L-1 agar and combined with 0, 5% 10%, 20% PEG 6000. Callus, embryogenic structure, and organogenic structure were observed at all medium combinations. Efficient in vitro regeneration was detected on MS medium without PEG 6000. Regenerated explants were transferred to the plant growth regulator-free MS medium to obtain shoot formations. Embryogenic structures were stuck into different embryogenic stages and shoot formation was not observed. Also, development was limited in the corm-like structures obtained via organogenesis from the same medium, and plantlets were not obtained.

Özet

Safran olarak bilinen Crocus sativus L., eski çağlardan beri kuru stigmaları baharat olarak kullanılan önemli bir bitkidir. Son zamanlarda abiyotik stres bitkisel üretimde karşılaşılan en önemli sorunlardan biridir. Kuraklık stresi, bitkinin gelişimini farklı seviyelerde sınırlayan en önemli abiyotik stres olarak bilinmektedir. Kuraklık stresine dayanıklı bitkilerin seçilmesinde in vitro seleksiyon yöntemi oldukça önemli bir tekniktir. Polyetilen glikol (PEG), toksik olmayan ve bitkiye tutunmayan bir kimyasaldır ve genelde bitkilerin kuraklığa gösterdiği tepkileri ölçmek adına yapılan kuraklık stresi çalışmalarında simülatör olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada, Crocus sativus L., bitkisinin kormları 30 g L-1 sakkaroz, 2 mg L-1 2,4-D + 1 mg L-1 2iP, 7 g L-1 agar ve 0, 5%, 10%, 20% PEG 6000 ile kombine edilmiş MS besi yerinde kültüre alınmıştır. En etkili in vitro rejenerasyonun PEG içermeyen MS besi yerinde olduğu belirlenmiştir. Rejenere olan eksplantlar, sürgün oluşumu elde etmek için bitki büyüme düzenleyicisi içermeyen MS besi yerine transfer edilmiştir. Meydana gelen embryojenik yapıların farklı embriyo aşamalarında tutuklu kaldığı ve sürgün oluşmadığı gözlenmiştir. Aynı besi yerinde organogenez sonucu oluşan korm benzeri yapılarda da gelişim sınırlı kalmış ve bitkiye dönüşüm gerçekleşmemiştir.