Y kromozomuna spesifik gerçek zamanlı PCR kullanılarak sonradan preeklampsi gelişen gebeliklerin sirkülan fetal DNA konsantrasyonlarının geniş ölçekli analizi

Large scale analysis of circulatory fetal DNA concentrations in pregnancies which subsequently develop preeclampsia using two Y chromosome specific real-time PCR assays

Abstract

OBJECTIVES: We have recently shown that circulatory fetal DNA levels are elevated in preeclampsia, even before the onset of symptoms. Most studies, however, quantified circulatory male fetal DNA with real-time PCR assays for the single-copy SRY locus on the Y chromosome. We have now examined both the SRY assay for the single-copy locus and the DYS14 assay for the multi-copy locus in parallel on a cohort of 505 pregnant women, 16 of whom later developed preeclampsia.MATERIAL-METHODS: Pregnant women at approximately 21 weeks of gestation were recruited for this study. Circulatory fetal DNA in maternal plasma samples was quantified by real-time PCR assays specific for the SRY and DYS14 loci.RESULTS: Circulatory fetal DNA levels were significantly elevated in those patients who subsequently developed preeclampsia when compared to those with uncomplicated deliveries and those complicated by chronic hypertension and IUGR. The SRY and DYS14 real-time PCR assays in this study achieved more than 97 % accuracy for identification of fetal gender. The two approaches present a good diagnostic test to predict preeclampsia prior to the onset of symptoms.CONCLUSIONS: Our data confirm that circulatory fetal DNA levels are elevated early in pregnancy in those patients who subsequently develop preeclampsia. The data suggest that circulatory male fetal DNA levels can be used as risk markers for earlier diagnosis of preeclampsia by both the DYS14 and SRY specific real-time PCR assays for the multi-copy and single-copy loci.

Özet

AMAÇ: Kısa bir süre önce sirkülan fetal DNA seviyelerinin preeklampside semptomlar daha kendini göstermeden arttığını gösterdik. Ancak, birçok çalışma sirkülan erkek fetal DNA’yı, Y kromozomunda lokalize tek kopya SRY lokusunu gerçek zamanlı PCR kullanarak ölçmüştür. Bu çalışmada,16’sında sonradan preeklampsi gelişen 505 gebe kadında, eş zamanlı olarak hem tek kopya lokus için SRY testi, hem de multiple kopya lokus için DYS14 testi değerlendirilmiştir.METOT: Bu çalışmada gestasyonun ortalama 21. haftasında olan kadınlar kullanıldı. Maternal plazma örneklerindeki sirkülan fetal DNAlar, SRY ve DYS14 lokuslarına spesifik gerçek zamanlı PCR ile ölçüldü.SONUÇ: Komplikasyonsuz gebelikler, kronik hipertansiyon ve IUGR komplikasyonu bulunan gebelerle karşılaştırıldığında, sonradan preeklampsi gelişen hastalarda sirkülan fetal DNA seviyeleri daha yüksekti. Fetal cinsiyetin belirlenmesinde SRY ve DYS14 gerçek zamanlı PCR testlerinkullanımı %97’den yüksek oranda doğru sonuç vermiştir. Bu iki değerlendirme şekli de, preeklampsinin daha semptomları ortaya çıkmadan saptanması için iyi birer tanısal testtir.TARTIŞMA: Elde ettiğimiz veriler sonradan preeklampsi gelişen hastaların erken gebelik döneminde fetal sirkülan DNA seviyelerinin daha yüksek olduğunu doğrulamaktadır. Verilerimiz sirkülan erkek fetal DNA seviyelerinin multiple kopya (DYS14) ve tek kopya (SRY) lokusları için spesifik gerçek zamanlı PCR’ın, preeklampsinin erken teşhis edilmesinde risk belirleyiciler olarak kullanılmasının mümkün olabileceğini göstermektedir.