Menadionun rat glial hücrelerinin çoğalması üzerindeki etkisi

Abstract

Background: Menadione inhibits cell growth of rodent and human cell lines. We reported that menadione had potential antiproliferative effect doses depend on both rat glioma (C6) and low passage human glioma cells in vitro. In this study, we examine menadione toxicity on primary glial cell culture cells in vitro. Material and Methods: Glial cells were obtained from 1-3 day old rat brain and cultured in humidified atmosphere of 5 % CO2, at 37 ºC in flask. The glial cells were seeded in 96 well plates and incubated for 24 hours. Then cells were exposed 10, 25, 50, 75 ,and 100 µM menadione doses. After 24 hours, menadione toxicity was measured by using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, (MTT) assay.All statistical analyses were performed by one-way analysis of variance (ANOVA) and followed by Tukey’s multiple comparison tests.Results: When the compared to the control, 10 and 25 µM menadione doses did not shown any activity on glial cell proliferation (p>0.05). However, 50, 75 ,and 100 µM menadione doses reduced 49, 61, 63 % in glial cells viability respectively (p

Özet

Özet: Menadion kemirgen ve insan kanserli hücreleri üzerinde çoğalmayı baskılayıcı etkiye sahiptir. Önceki çalışmamızda menadionun sıçan glioma (C6) ve düşük pasajlı insan glioblastoma multiforme hücre dizilerinde doza bağlı olarak hücre çoğalmasını baskıladığını belirledik. Bu çalışmamızda menadionun normal sıçan glia hücrelerin yaşam oranı üzerindeki etkisi araştırıldı. Materyal ve Yöntem: 1-3 günlük sıçanların tam beyinlerinden elde edilen glia hücreleri 37 ºC’de, %5 CO2 bulunan in vitro ortamda çoğaltıldı. Hücrelerin glia hücreleri olduğu glial fibriler asidik protein (GFAP) immunohistokimyasal boyası ile boyanarak doğrulandı. Hücreler daha sonra 96 kuyucuklu kültür kaplarına ekilerek 10, 25, 50, 75 ve 100 µM menadion dozları ile inkübe edildi. 24 saat sonunda menadion toksisitesi 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, (MTT) yöntemi ile belirlendi. İstatistiksel analizler tek yönlü varyans analizinin ardından (ANOVA) and Tukey’in çoklu karşılaştırma yöntemi ile yapıldı.Bulgular: Menadionun 10 ve 25 µM dozları hücre çoğalması üzerinde herhangi bir etki göstermedi (p>0.05). Fakat 50, 75 ve 100 µM dozlarında sırasıyla % 49, 61 ve 63 oranında hücre ölümüne neden oldu (p