Domoik asit kaynaklı hipokampal dejenerasyonda nitrik oksidin rolü

Abstract

We used a mouse model of domoic acid (DA)-induced temporal lobe epilepsy to determine if nitric oxide (NO) has anticonvulsant properties. The protective effects of NO were assessed using acute and chronic doses of DA (ip) in the presence and absence of NO synthase (NOS) inhibitors. The Institute of Cancer Research mice treated with different doses of DA (1-6mg/kg body weight) showed dose dependent stereotypic neurological signs, which were enhanced by pretreatment with NOS inhibitors. Further, mice sacrificed after 30 and 60 days of DA treatment showed reactive glial cells with large cell bodies and long processes in CA1 and CA2 regions of the hippocampus. These changes were more pronounced in groups treated with neuronal NOS inhibitor especially in 60 days treatment group. In addition, immunohistochemistry and Western blot analysis demonstrated loss of calcium binding protein calbindin D28k immunoreactivity in the hippocampal regions of animals treated with DA plus NOS inhibitors reflecting damage to calbindin rich neurons in the hippocampus. Our findings suggest that a single sub-acute dose of DA can cause progressive damage to the hippocampus, which is markedly influenced by NOS inhibitors. Further, this study establishes that NO agonists may have a therapeutic value in treating patients with temporal lobe epilepsy.

Özet

Nitrik oksidin (NO) antikonvülzan özellikleri olup olmadığını araştırmak üzere domoik asit (DA) ile tetiklenmiş fare temporal lob epilepsi modelini kullandı. NO-sentetaz (NOS) inhibitörlerinin varlığı ve yokluğunda DA’in akut ve kronik dozları kullanılarak NO’in koruyucu etkileri değerlendirildi. NO’nın koruyucu etkisi akut ve kronik DA dozlarında ve NO sentataz (NOS) inhibitörlerinin varlığı ve yokluğunda araştırıldı. Değişik DA dozları (1-6mg/kg) ile tedavi edilen ICR farelerinde NOS inhibitörleri ile ön tedavi sonrası kuvvetlenen, doza bağımlı stereotipik nörolojik bulgular gözlendi. Farelerde DA ile tedavinin 30. ve 60. günlerinde yapılan incelemelerde büyük hücre gövdeleri olan ve hipokampusun CA1 ve CA2 bölgelerine uzun oluşumları olan reaktif gliyal hücreler saptandı. Bu özellikler nöranal NOS inhibitörleri ile tedavi edilen ve özellikle 60 günlük tedavi alan grupta daha belirgindi. İmmünohistokimyasal ve Western blot analizleri ile DA ile NOS inhibitörleri ile tedavi gören deney hayvanlarının hipokampüslerinde kalsiyum bağlayıcı protein D28k immünoreaktivitesinde kayıp saptandı ki bu durum hipokampüsteki calbindinden zengin nöronlarda hasar bulgusu olarak değerlendirildi. Bulgularımız tek sub-akut DA dozunun hipokampusta NOS inhibitörleri ile birlikte artan ilerleyici hasara neden olduğunu göstermektedir. Ayrıca bu çalışma temporal epilepsili hastaların tedavisinde NO agonistlerinin rolü olabileceğini düşündürmektedir.