Doku mühendisliği; Civciv embriyo hücre kültürü ve barsak yamanması

Tissue engineering; Chick embryonic cell cultured and patching intestinal defect

Abstract

This study was carried out using the tissue engineered intestine of chick embryonic cell as a patch of necrotic intestinal segment. Thirteen Ross chickens intestinal cells which was harvested from 19 days old embryos and one month old of 20 Syngeneic Ross chickens served as donors and recipients respectively. Synthetic polyurethanes have been used as matrices for chick cell attachment,growt and implantation.Cell culture were prepared as described by Evans et al. After ketamin sulfate anesthesia at laparatomy, 1,5 cm ileal defect were patched with four days embryonic cell culturing patch with tissue engineering techniques in vitro. These patched intestine were investigated as second look operations on the first postoperative day and 10th, 20th, 60th day corresponding to 5,5,5,5 chickens respectively and two centimeter proximal and distal of patched intestinal segments were resected. X-Ray of Gastrointestinal passage was made 60th day postoperatively with barium sulphate meal. Animal survival rate was %100.There was no evidence of intestinal obstruction or dilatation with barium meal .Microscopically, the neomucosa consisted of a thin layer of columnar epithelial cells at 10 and 20 days and covering the whole patch area by 60 days. The tissue engineered intestine was lined with well developed neomucosa,and could be available for not to jeopardize the ischemic bowel.

Özet

Çaışma,doku mühendisliği yöntemiyle üzerinde civciv embriyo hücreleri üretilmiş poliüretan membranın piliç barsağı defektine yamanarak yeni mukoza meydana gelip gelmiyeceğini araştırmak amacıyla yapılmıştır. Kısabarsak sendromuna alternatif bir tedavi olarak " doku mühendisliği barsağı" yönteminin kullanılıp kullanılamıyacağını saptamakdır. Bu amaçla 19 günlük Ross civciv embriyosu ve bir aylık Ross piliçler denek olarak kullanılmıştır. 20 cm uzunluğunda, 2 mm çapındaki civciv embriyosu ince barsakları alınarak Evans yöntemiyle kültüre hazırlandı, iskelet olarak poliüretan membran kullanıldı. Petri kutularının içine 2,4 cm çaplı poliüretan membran yerleştirilip üzerinde dört gün primer hücre kültürü yapıldı. 4 gün sonra üzerinde kültür hücreleri içeren poliüretan membran alınıp Ross piliç ince barsağında oluşturulan 1,5 cm çapındaki defekte yamandı. Civciv embriyosu barsak hücre kültürleri içeren poliüretan membranların piliç barsağına yamanmasından 1,10, 20, ve 60 gün sonra yamalı segmentler çıkarılıp HE, Mu-sikarmen ile boyandığında ameliyat sonrası 1. günde poliüretan yamanın intakt olduğu ve barsak içi materyal ile kaplandığı, 10. ve 20 günlerde poliüretan mebran üzerinin tek sıralı yeni mukoza hücreleri ve 60. günde yamanın makroskobik olarak farkedilemediği defektin tamamen çok katlı mukoza ile örtülü olduğu görülmüştür. Bu çalışmada barsakta lokalize nekroze alanların üzerinde civciv embriyo kültür hücreleri bulunan poliüretan membranla yamanmasının olanaklı olduğu saptanmıştır.