The comparison of blood sirolimus levels measured using high performance liquid chromatography (HPLC) and microparticle enzyme immunoassay (MEIA) techniques

Yüksek performans likit kromotografisi (HPLC) ve mikropartikül enzim düzeyi (MEIA) yöntemleri ile saptanan tam kan sirolimus düzeylerinin karşılaştırılması

Kılıçaslan Tülay AYNA, Şentürk Hayriye ÇİFTÇİ, Hilmi TOZKIR, Ali Sarper DİLER, Mehmet GÜRTEKİN, Mahmut ÇARİN, Selvi KAYA

Abstract

Objective: This study aims to compare High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Microparticle Enzyme Immunoassay (MEIA) in measuring Sirolimus (SRL-rapamycine) in whole blood of renal posttransplant patients. Materials and methods: Patients admitted to immunosupressive drug level measurement laboratory Medical Biology Department at Istanbul Medical Faculty were included. Eightyfive whole blood samples from 37 patients we analysed by HPLC and MEIA methods.Result: These samples were analysed in parallel with control samples of known drug concentrations. % CV values of 2.5, 5, 10, 15, 25, 50 ng/ml control samples were %5.6, % 8.3, % 9.1, %6.2, %7.2, %5.8 with HPLC respectively. Three control samples (5, 11, 22 ng/ml) analysed with MEIA depicted. CV values of % 6.7, % 7.8 and % 6.3 respectively. Linear regression value of SRL concentrations, analysed by two different methods was r2 : 0.88, y:1.004x+0.332, p < 0.0001.Conclusion: MEIA is an easy method and compatible with HPLC. Besides MEIA is a reliable and fast method. In wiew of the comparable results and the mentional advantages, MEIA can be used safely as an alternative way of measuring SRL whole blood concentrations.

Özet

Amaç: Bu çalışmada, Sirolimus (SRL-rapamisin) kullanan hastaların böbrek transplantasyonu sonrasında tam kan SRL düzeylerinin High Performance Liquid Chromotography (HPLC) ve Microparticle Enzyme Immunoassay (MEIA) gibi iki farklı yöntemle test edilerek post transplant dönemde MEIA'in güvenlik sınırlarının HPLC ile karşılaştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve yöntem: Bu çalışmada Kasım 2004 - Mart 2005 döneminde Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı İmmünsupresif Doz Düzey laboratuvarında 37 hastadan elde edilen 85 kan örneği HPLC ve MEIA yöntemleri ile çalışılmıştır. Örnekler için SRL düzeyi bilinen kontroller ile % Coefficient Variation- Değişim Katsayısı değerleri hesaplandı.Bulgular: 37 hastanın toplam 85 kan örneği hem HPLC hem de MEIA için SRL düzeyi bilinen kontroller kullanılarak çalışıldı. Sirolimus düzeyi bilinen kontroller ile % CV değerleri belirlendi. HPLC için % CV değerleri; 2,5, 5,10, 15, 25, 50 ng/ml'lik kontroller için % 5,6, % 8,3, % 9,1, % 6,2, % 7,2, % 5,8 olarak bulundu. MEIA yöntemi için ise, % CV değerleri; 5, 11, 22 ng/ml'lik kontroller için % 6,7, % 7,8 ve % 6,3 olarak belirlendi. Her iki yöntemle elde edilen Sirolimus kan örneklerinin sonuçlarının lineer regresyon değeri, r2: 0,88, y:1,004x + 0,332 p< 0,0001 olarak belirlendi.Sonuç: MEIA, HPLC ile uyumlu, kolay uygulanabilen bir yöntemdir. Bu özelliklerinin yanı sıra MEIA yönteminin güvenilir olması, çok daha kısa sürede sonuç vermesi gibi avantajları, HPLC yöntemlerine alternatif olarak SRL kan düzeyinin saptanmasında bu yöntemin de kullanılabilirliğini ortaya koymuştur.