Diagnosis of Mycobacterium tuberculosis in sputum: Comparison of the culture and stainings methods

Balgamda tüberküloz tanısı: Boya ve kültür yöntemlerinin karşılaştırılması

Abstract

The rapid and accurate diagnosis of tuberculosis, a disease still common in Turkey, is of utmost importance. The purpose of this study was to compare the Ehrlich-Ziehl-Neelsen (EZN) or fluorochrome staing methods with solid or liquid medium cultures for the diagnosis of tuberculosis in sputum specimens. The specimens were stained with Auramin O and EZN methods after homogenization and cytocentrifugation. The specimens were cultured in Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT) and on Loewenstein-Jensen (L-J) medium after decontamination and homogenization. Totally 1439 sputum specimens were processed. Acid-f ast bacilli were determined in 104 cases by Auramin O stained preparations and in 94 cases by EZN staining. In 108 of 1439 specimens growth was observed both in MGIT and on L-J. However, growth of bacilli was detected by MGIT method during 9±1 days and by L-J medium about 24±2 days of incubation. The results showed that there was no difference between the staining methods in the diagnosis. However, growth time in the MGIT medium was one-third of that on L-J medium.

Özet

Türkiye'de hala yaygın olarak saptanan tüberküloz hastalığının çabuk ve doğru tanısı önemlidir. Bu çalışmada, laboratuvara gönderilen balgam örneklerinin Ehrlich-Ziehl-Neelsen (EZN) ve florokrom boyama yöntemleri ile üreme yönünden sıvı ve katı besiyerlerinin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Araştırılan örnekler sitosantrifüj ve homojenizasyon sonrası Auramin O ve EZN yöntemleri ile boyanmıştır. Aynı örnekler dekontaminasyon işleminden sonra Mycobacterium Growth Indicator Tube (MCIT) ve Lowenstein-Jensen (L-J) besiyerlerine ekilmiştir. Toplam 1439 balgam örneği çalışmaya alınmıştır. Auramin O boyası ile boyanarak floresans mikroskop incelemesinde 104 örnekte, EZN yöntemi ile boyanarak ışık mikroskop incelemesinde 94 örnekte asit-alkole dirençli basil saptanmıştır. Bu 1439 örneğin ekim sonrası aynı 108 örnek her iki besiyerinde üremiştir. Ancak MGIT besiyerinde ortalama 9±1 gün, L-J besiyerinde ise ortalama 24(2 günde üreme olduğu saptanmıştır. Boyama yöntemleri arasında tanı açısından ve besiyerlerinde üreme sayısı bakımından aralarında anlamlı bir fark olmadığı halde sıvı besiyeri olan MGIT'ta ki üreme süresinin, katı besiyeri olan L-J'deki üreme süresinin yaklaşık 1/3'ü olduğu gözlemlenmiştir.