The Effect of Boron Addition on Spermatological Parameters, Oxidative Stress and DNA Damage After Frozen-Thawed Process in Ramlic Ram Semen

Ramlıç Irkı Koç Spermasına Katılan Bor’un Dondurma ve Çözdürme Sonrası Spermatolojik Parametreler, Oksidatif Stres ve DNA Hasarı Üzerine Etkileri

Abstract

The aim of the present study was to investigate the effects of different doses of Boron added toextender on some spermatological parameters, oxidative stress, and DNA damage during postthawedof ram semen. The ejaculate samples were collected by artificial vagina from five Ramlıçrams. After determining the primary spermatological properties, those having normospermie qualitywere pooled. The samples were evaluated as a mix ejaculate in the experiment and control groups.The samples were extended with Tris extender containing 5% glycerol and different Boron doses(1, 2 and 4 mM). Control group was formed with no Boron. After dilution and dosing of the samples,withdrawn in 0.25 mL straws were frozen at vapour of liquoid nitrogen. The frozen semen wasthawed in a water bath at 37 ºC for 25 seconds. After thawing; motility, morphology, DNA integrity(COMET assay) and oxidative stress parameters (TAS and TOS) of frozen thawed ram spermwere determined. In the thawed semen according to subjective motility (57.00±1.528 %), 1 mMboron dose group indicated the highest value (P

Özet

Çalışmada koç ejakülatlarının dondurulması ve çözdürülmesi sürecinde sperma sulandırıcısına katılan farklı dozlarda Borun spermatolojik değerler, oksidatif stress ve DNA hasarı üzerine etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Araştırmada toplam 5 Ramlıç koçtan sun’i vagina ile alınan ejekülatlar toplandı. Başlıca spermatolojik özellikleri belirlenen normospermi kalitesindeki ejekülatlar birleştirilerek kullanıldı. Araştırma ve kontrol gruplarında spermalar mix ejekülat biçiminde değerlendirildi. Spermaların sulandırılması ve dozlanması farklı Boron dozları (1, 2 ve 4 mM) ve % 5 glyserol içeren Tris ana sulandırıcısı ile yapıldı. Ayrıca Boron içermeyen kontrol grubu da oluşturuldu. Sulandırma ve dozlama işlemleri sonrasında 0.25 ml lik payetlere çekilen spermalar sıvı azot buharında donduruldu. Dondurulan spermalar su banyosunda 37 ⁰ C de 20 saniye tutularak çözdürüldü. Çözdürme sonrası koçlarda spermatozoon motilitesi, morfolojik muayene, membran bütünlüğü (HE testi), DNA hasarı ve oksidatif stres parametreleri (TAS ve TOS) belirlendi. Çözdürülen spermalarda subjektif motilite (% 57.00 ± 1.528) açısından 1 mM bor katılan grupta en yüksek (p