Detection of metallo-beta-lactamase enzyme in gram negative non- fermantative bacteria by different methods

Gram negatif non-fermantatif bakterilerde metallo-beta laktamaz enziminin farklı yöntemlerle gösterilmesi

Abstract

Objective: In this study, we aimed to investigate the production of metallo-beta-lactamase (MBL) at clinical isolates resistant to meropenem and to compare phenotypic methods used for detection of these enzymes. Material and Methods: The identification of bacteria was made with standard clinical microbiological methods and confirmed in the BD Phoenix fully automated identification system. In vitro bacterial resistance to antibiotics was determined by using disc diffusion method in accordance with the recommendations of The Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) and confirmed with the BD Phoenix fully automated identification device. Production of MBL were detected by combined disc diffusion method, double-disk synergy test, modified Hodge test and E test methods. Results: The MBL production within the meropenem resistant Acinetobacter strains were found to be 95% with the combined disc method, 67.5% with MP-EDTA double-disc synergy test, 72.5% with the modified Hodge test and 97.5% with E test. MBL production within meropenem resistant Pseudomonas strains were 80% with the combined disc method, 100% with MP-EDTA double-disc synergy test, 60% with the modified Hodge test and 60% with the E test. Conclusion: The results of this study suggests that a single phenotypic tests is inadequate for the identification of MBL. Furthermore, more extensive studies such as sequencing are required for the identification and control of MBL producing strains.

Özet

Amaç: Bu çalışmada, meropeneme (MP) dirençli klinik izolatlarda metallo-beta-laktamaz (MBL) üretiminin varlığını araştırmak ve bu enzimlerin varlığını ortaya koyabilecek fenotipik yöntemleri karşılaştırmak amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmaya alınan bakterilerin bakterilerin in-vitro koşullarda antibiyotiklere direnç durumları Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (The Clinical and Laboratory Standards Institute; CLSI) önerileri doğrultusunda disk difüzyon yöntemi ile belirlenmiş ve BD Phoenix tam otomatize identifikasyon cihazı ile doğrulanmıştır. MBL üretimi kombine disk yöntemi, çift disk sinerji testi, modifıye Hodge testi ve E test yöntemleri ile araştırılmıştır. Bulgular: Meropeneme dirençli Acinetobacter baumannii (A. baumannii) kökenlerinde MBL üretimi kombine disk metodu ile %95, MP-EDTA çift disk sinerji testi ile % 67.5, modifiye Hodge testi ile %72.5, E test ile %97.5 olarak tespit edildi. Meropeneme dirençli Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) kökenlerinde ise MBL üretimi kombine disk metodu ile %80, MP- EDTA çift disk sinerji testi ile %100, modifiye Hodge testi ile %60 ve E test ile %60 oranında bulundu. Sonuç: Bu çalışma sonunda, MBL üreten suşların belirlenmesinde ve kontrolünde tek metodun yetersiz olduğu ve konu ile ilgili sekanslama gibi ileri araştırmaların yapılması gerektiği ortaya çıkmıştır.