Investigation of Embryonic Antigen Expressions in 3D Culture of Stem Cells Derived from Adipose Tissue and Wharton Jelly

Adipoz Doku ve Wharton Jeli Kaynaklı Kök HücrelerdeEmbriyonik Antijen Ekspresyonlarının 3D KültürdeAraştırılması

Abstract

Objective: Adipose tissue and Wharton Jelly (WJ) are two important sources of mesenchymalstem cells (MSCs) used in preclinical and clinical studies. Stem cells, which have great potential inthe field of regenerative medicine and tissue engineering in the future, can be produced in cellcultures in two dimensions. It is aimed to investigate the cell surface antigens showing pluripotencyof the embryonic period in MSCs with micro-carrier 3D culture systems used in the production oflarge-scale MSCs. Materials and methods: In this study, two different MSC groups of WJ and adipose tissue originwere used. MSC groups were cultured with Hillex-II and Pronectin-F microcarriers. It was aimed toinvestigate the expression of TRA1-60, Sox-2, Nanog, Oct-4, SSEA-4 cell antigens by flowcytometry. Results: Especially SSEA4 marker was found to be highly positive in WJ-derived MSCs while theirexpression was observed at lower levels in MSCs originating from adipose tissue. The higher cellsurface marker in culture with hillex-II microcarrier in adipose tissue derived-MSCs was similarlyfound with a higher rate in the WJ derived-MSC group. Conclusion: It was observed that embryonic stem cell antigens were expressed at different ratesin two different cell groups. It was observed that SSEA4 surface antigen was expressed more inWJ-derived MSCs.

Özet

Amaç:Yağ dokusu ve Wharton Jeli (WJ), preklinik ve klinik çalışmalarda kullanılan iki önemli mezenkimal kök hücre (MKH) kaynağıdır. Gelecekte rejeneratif tıp ve doku mühendisliği alanında büyük potansiyele sahip kök hücreler iki boyutlu olarak hücre kültürlerinde üretilebilmektedir. Büyük ölçekli MKH'lerin üretiminde kullanılan mikro taşıyıcılı 3D kültür sistemleri ile embriyonik döneme ait pluripotentlik özelliği gösteren hücre yüzey antijenlerinin klinik kullanımda yeri olan MKH’lerde araştırılması amaçlanmıştır.Gereç ve yöntem: Bu çalışmada, WJ ve adipoz doku kökenli iki farklı MKH grubu kullanıldı. HillexII ve Pronektin-F mikrotaşıyıcıları ile MKH grupları kültürlendi. TRA1-60, Sox-2, Nanog, Oct-4, SSEA-4 hücre antijenlerinin akış sitometrisi ile ekspresyonları değerlendirildi.Bulgular: WJ kaynaklı MKH’lerde özellikle SSEA4 işaretleyicisi yüksek miktarda pozitif olarak saptanırken; adipoz doku kaynaklı MKH’lerde daha düşük seviyelerde eksprese edildiği gözlendi. Adipoz doku kaynaklı MKH ‘lerde hillex-II mikrotaşıyıcı ile yapılan kültürde daha yüksek olan hücre yüzey işaretleyicisi; WJK-MKH grubunda da benzer olarak daha yüksek oranda olduğu görüldü.Sonuç: Embriyonik kök hücre antijenlerinin farklı oranlarda iki farklı hücre grubunda eksprese edildiği gözlemlendi. WJ kaynaklı MKH'lerde SSEA4 yüzey antijeninin daha fazla miktarda eksprese edildiği gözlemlendi.