In-vitro classification of bovine oocyte recovered at follicular and luteal phases

Folliküler ve luteal faz sırasında elde edilen sığır oositlerinin in-vitro değerlendirilmesi

Abstract

In this study, bovine oocytes were classified according to morphology and quality. A total of 105 ovaries recovered from slaughterhouse, 2-4 h to our laboratory. After inspection of the functional mass on the ovarian surface for determination of cyclic phases, ovaries were classified as follicular (n=66), luteal (n=33) and noncyclic (n=6). Cumulus oocyte complexes (COCs) were aspirated and examined stereomicroscopically. Each COCs was assigned to one of three quality based groups on the appearance of the cumulus cells: COC-A: the oocytes with homogenous ooplasm surrounded by multilayer (>3 layers) compact and bright cumulus cells, COC-B: less compact and surrounded by a layer dark cumulus cells, and COC-C: strongly expanded cumulus with dark spots or denuded. Totally 975 COCs, consisting of A class (n=341), B class (n=374) and C class (n=260) were determined. The mean COCs counts were 3.52±0.38 in A class, 3.42±0.28 B class and 2.36±0.24 C class in follicular phase group; 2.79±0.51 A class, 3.82±0.41 B class and 2.64±0.43 C class in luteal phase group. There was no significant difference between the mean COCs counts recovered from follicular and luteal ovarian phase (p>0,05). In conclusion, there is no effect of ovarian phase on COCs quality and counts. Therefore, recovered oocytes from follicular and/or luteal phases are suitable for in-vitro studies.

Özet

Bu araştırmada inek ovaryumlardan elde edilen oositlerin morfolojik yapı ve kalitelerine göre sınıflandırılması yapılmıştır. Bu amaçla mezbaha materyalinden elde edilen 105 adet ovaryum kesimden sonraki 2-4 saat içinde laboratuara ulaştırıldı. Ovaryum yüzeyindeki fonksiyonel yapıların inspeksiyonu ile siklus fazı belirlenen ovaryumlar folliküler (n=66), luteal (n=33) ve nonsiklik (n=6) olarak sınıflandırıldı. Aspire edilen kumulus hücre kompleksleri (COC) stereomikrokroskopta incelendi. Her bir COC belirtilen morfolojik kriterlere göre sınıflandırıldı. COC-A: çok sıralı ( >3 ) kompakt kumulus hücreleri ile sarılı homojen ooplasma, COC-B: Koyu renkli ve daha az sıralı kumulus hücreli oosit , COC-C: Koyu renkli ve tamamen yayılmış ya da soyulmuş oosit. A sınıfı (n=341), B sınıfı (n=374) ve C sınıfı (n=260) olmak üzere toplam 975 COC görüldü. Buna göre folliküler faz içerisindeki ovaryumlardan 3,52±0,38 adet A kalite, 3,42±0,28 adet B kalite ve 2,36±0,24 adet C kalite COC; luteal faz içerisindeki ovaryumlardan ise 2,79±0,51 adet A kalite, 3,82±0,41 adet B kalite ve 2,64±0,43 adet C kalite COC elde edildi. Folliküler ve luteal faz grubuna ait ovaryumlardan elde edilen A, B ve C sınıflarındaki ortalama COC sayıları arasında istatistiksel yönden fark gözlenmedi (p>0,05). Sonuç olarak, seksüel siklus fazınının elde edilen COC kalitesi üzerinde belirgin bir etkisi olmadığı, in-vitro çalışmalar için her iki faza ait oositlerin kullanılabileceği görülmüştür.