Journals / Çukurova Üniversitesi Tıp Fakültesi Dergisi / 1999 / Cilt: 24 - Sayı: 4
Total DNA restriction endonuclease profiles of visceral Leishmania agents from Çukurova district
- Pages
- 158–164
- DOI
- —
Abstract
The promastigotes from bone marrow aspirate of nihe kala-azar cases in Çukurova district were isolated in 1x RPMI-1640 medium containing whole rabbit blood and cultured in the same medium for biomass. The goal of this study was to find out if there is any genotypical difference among these visceral agents. The extracted DNA specimens were restricted with EcoRI, Hindlll, Haelll, Akıl, Hinfl, and Rsal enzymes and the enzyme profiles were observed on agarose gel. The total DNA restriction profiles is isolated samples from patients plus the restriction profiles of the total DNA of fourteen reference strains were obtained by using the same enzymes. The restriction profiles from patients and references were compared according to the number and size of DNA fragments. Upon the results obtained from RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) analyses of isolated and reference strains, it was observed for the first time that there were some genotypical heterogeneities among visceral strains in Çukurova district.
Özet
Çukurova bölgesi kaynaklı dokuz kala-azar olgusunun kemik iliği aspiratından Leyişmaniya örnekleri, tavşan kanlı 1x RPMI-1640 besiyerinde izole edilerek aynı besiyerinde kültüre alındı. Kalaazar etkenleri arasında genotipik olarak fark olup olmadığının belirlenmesi amaçlandı. İzole edilen total DNA; EcoRI, HindIII, HaeIII, AluI, Hinfl ve RsaI enzimleriyle kesildikten sonra agaroz jelinde restriksiyon profilleri çıkarıldı. Hastalardan izole edilen örnekler yanında, 14 adet referans susun total DNA restriksiyon profilleri aynı enzimlerle elde edildi. Hasta örnek ve referanslara ait restriksiyon profilleri, jel üzerinde elde edilen DNA fragman sayısı ve fragman büyüklükleri açısından karşılaştırıldı. Yapılan total DNA RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphysm) analiz sonuçlarına göre, bölgede visseral (kala-azar yapan) etkenler arasında genotipik heterojenite olduğu tesbit edildi.