The Effect of Ankaferd Blood Stopper as a Drug On Human Umbilical Vein Endothelial Cell Culture(HUVEC)

BİR İLAÇ OLAN ANKAFERD BLOOD STOPPER'IN İNSAN UMBİLİKAL VEN ENDOTEL HÜCRE KÜLTÜRÜNE ETKİSİ

Mehtap NİSARİ, Harun ÜLGER, Yasemin Torun ALTUNER, Mehmet Akif ÖZDEMİR, Zuhal HAMURCU

Abstract

Introduction: Ankaferd Blood Stopper (ABS) is an herbal extract. ABS comprises of standardized mixture ofherbs T. vulgaris, G. glabra, V. vinifera, A. officinarum and U. dioica. The aim of this study was to investigatethe in vitro apoptotic effects of the different times and doses of ABS on in vitro endothelial cell proliferation.Methods: Umbilical cord obtained at Caesarean sections from Erciyes University hospital. After washingPBS, the cord vein lumen was filled with PBS containing 10 mg/ml collagenase and incubated 10 minuteat 37°C. The contents of the vein were flushed out with 30 ml medium collected in centrifuge tube thencentrifugated at 1000 rpm for 10 minute. The cells were plated in 2 ml of medium at T-25 plastic flasks. Theendothelial cells were incubated with only medium in control group and different concentrations of ABS (5µl, 25 µl and 50 µl ABS) in the experimental groups for 24 h. Then the viability and/or proliferation of cellswere detected by MTS assay.Results: The mean cell number were obtained from the control and experimental groups 7,68x103 (±1,7),5,56x103(±1,09) 4,12x103(±1,14), and 2,43x103(±0,89) respectively. The cells of the experimental groups compared with the control group to the decrease in experimental groups was statistically significant(p

Özet

Giriş: Ankaferd kanama durdurucu (ABS) tıbbi bitki ekstraksiyonudur. ABS Thymus vulgaris, Glicirhiza glabra, Vitis vinifera, Alpinia officinarum ve Urtica dioica bitkilerinin standardize edilmiş bir karışımıdır. Bu çalışmanın amacı in vitro endotel hücre çoğalmasının ABS'nin farklı zaman ve dozlarının in vitro apoptotik etkilerini araştırmaktır. Gereç ve yöntem: Erciyes Üniversitesi Hastanesinde sezeryanla yapılan doğumlardan alınan göbek bağı toplardamarı PBS ile yıkandıktan sonra içine yaklaşık 10 mg/ml kollajenaz verildi ve 10 dakika 37ºC de inkübatörde bekletildi. Damar içerisindeki hücre ve kollajenaz karışımı tüp içine alındıktan ve 30 ml besi yeri ilave edildikten sonra 1000 rpm’de 10 dakika santrifüj edildi. Üstteki supernatant atıldı ve tüpün dip kısmında biriken hücreler üzerine 2 ml besi yeri ilave edilerek karıştırıldı ve 25 cm’lik flasklara ekildi. Thoma lamında sayılan hücreler gruplara ayrılarak her bir gruba ait kültür ortamına sırasıyla 5 µl, 25 µl and 50 µl ABS 24 saat uygulandı. Daha sonra hücrelerin canlılığı ve/veya proliferasyonu MTS testi ile tespit edildi. Bulgular: Doza bağlı olarak deney grubu hücrelerinde bir artışın olduğu görüldü. Kontrol ve deney gruplarından elde edilen ortalama hücre sayısı sırasıyla 7,68x103 (±1,7), 5,56x103(±1,09) 4,12x103(±1,14) ve 2,43x103(±0,89) idi. Deney gruplarının kontrol grubu ile karşılaştırıldığında deney gruplarındaki azalma istatistiksel olarak anlamlıydı (p