Journals / Türk Hijyen ve Deneysel Biyoloji Dergisi / 2021 / Cilt: 78 - Sayı: 4
Antinükleer antikorların pozitif saptandığı hastalarda immunoblotting test sonuçlarının değerlendirilmesi
- Pages
- 443–450
- DOI
- —
Abstract
Amaç: Otoimmün hastalıklar, organizmanın kendi doku ve hücrelerine karşı immün yanıt gelişmesi sonucu oluşmaktadır ve bu hastalıkların tanısında otoantikorlar büyük önem taşımaktadır. Anti nükleer antikor (ANA) adı verilen, hücre nükleusu ve/veya sitoplazmasındaki nükleer yapılara karşı gelişen otoantikorlar, bağ doku hastalıklarında önemli bir tanı kriteridir. Günümüzde, ANA pozitifliğinin saptanması amacıyla geliştirilmiş bir çok yöntem bulunmaktadır. ANA tespiti için altın standart yöntem, Hep2 (insan laryngeal epidermoid karsinoma) hücreleri kullanılarak gerçekleştirilen Indirekt Immünofloresan Antikor (IIFA) testidir. Pozitif sonuçlar gözlendiğinde, tanıyı doğrulamanın bir yolu olarak, ekstrakte edilebilir nükleer antijen (ENA) testleri takip eder. Spesifik ekstrakte edilebilir nükleer antijenlerin tanımlanması, otoimmün bağ dokusu hastalıklarının farklı tipleri arasındaki ayrımı sağlayabilir. Bu çalışmada, ANA IIFA testi pozitif olan hastalarda ENA test sonuçlarını retrospektif olarak inceledik. Yöntem: Ondokuz Mayıs Üniversitesi Tıp Fakültesi’nin çeşitli kliniklerine başvuran toplam 3000 hasta için Anti nükleer antikorlar test edildi. Her serum numunesi 1: 100 dilüsyonda üreticinin (Euroimmun AG, Lübeck, Germany) önerileri doğrultusunda çalışılmış, immunfloresan mikroskopta boyanma paterni ve floresans şiddeti değerlendirilmiştir. ANA pozitif olarak tespit edilen 640 numunede immunoblot yöntemi (Euroimmun AG, Lübeck, Germany) ile ENA test edilmiştir. Bulgular: Çalışmaya alınan hastaların 2192’si (%73,07) kadın, 808’i (%26,93) erkekti. 640 numune ANA pozitif olarak tespit edilmiştir. Pozitif örneklerde ANA paternlerinin dağılımına baktığımızda;173 granüler (%27,03), 98 granüler+sitoplazmik granüler (%15,31), 67 homogen+granüler(%10,47) en sık saptanmıştır. ANA pozitif örneklerin ENA profilleri incelendiğinde 557’si (%83,7) pozitif, 83’ü (%12,97) negatif bulundu. ENA pozitifliklerinde ilk üç sırayı SSA (%26,88), SSB (%17,81), Sm/RNP (%17,66) aldı. Sonuç: ANA pozitiflik oranımız literatür ile uyumlu bulunmuştur. Patern dağılımı da bölgemiz verilerine benzerdir. IIFA ile ilk tarama ardından immunoblot test ile farklı antijenlere bakılması; maliyet etkin bir yaklaşım olmakla birlikte; otoimmün hastalıkların tanısını kolaylaştıracaktır.
Özet
Objective: Autoimmune diseases occur as a result of the immune response to self antigens and tissues of the organism and the detection of autoantibodies is very important in the diagnosis of these disorders. Antinuclear antibodies (ANA) autoantibodies generated against to nuclear/ cytoplasmic components of the cell are important diagnostic criteria for connective tissue diseases. Currently, a number of methods are available for the detection of ANA. The gold standard method for the detection of ANA is Indirect Immunofluorescence Antibody (IIFA) assay using Hep2 (human laryngeal epidermoid carcinoma). When positive results are observed, Extractable Nuclear Antigen( ENA) tests follow as a means of confirming the diagnosis. Identification of the specific extractable nuclear antigens is warranted because this may further differentiate between the distinct types of autoimmune connective tissue diseases. In this study, were analyzed retrospectively that ENA test results in patients with positive ANA IIFA test. Methods: Antinuclear antibodies were tested for a total of 3000 patients admitted to various clinics of Ondokuz Mayıs University Medical Faculty. Each serum sample was studied at 1: 100 dilution in accordance with the manufacturer’s recommendations (Euroimmun AG, Lübeck, Germany) and staining pattern with fluorescence intensity was evaluated with immunofluorescence microscope. ENA was investigated by immunoblotting method (Euroimmun AG, Lübeck, Germany) in 640 ANA positive sera. Results: Distribution of the patients included in the study, 2192 (73.07%) were female and 808 (26.93%) were male. 640 samples detected as ANA positive. When we look at the distribution of ANA patterns in positive samples; granular 173 (27.03%), granular and cytoplasmic granular 98 (15.31%), homogenous and granular 67 (10.47%) were the most common. When the ENA profiles of the ANApositive samples were examined, 557 (83.7%) were found to be positive and 83 (12.97%) were negative. According to our study, SSA (26.88%), SSB (17.81%), Sm / RNP (17.66%) were the first three places in the ENA positivite. Conclusion: Our ANA positivity rate was found to be compatible with the literature. The pattern distribution is similar to the data of our region. After the first screening with IIFA, looking for different antigens with the immunoblot test; not only it is a cost effective approach;but also facilitate the diagnosis of autoimmune diseases.