Journals / Turkish Journal of Hematology / 2015 / Cilt: 32 - Sayı: 4
?-Talasemi/Hemoglobin E Hastalarında Tümör Nekrozlaştırıcı Faktör-Alfa'nın Eritropoetin- ve Eritropoetin Reseptör- ile Uyarılmış Eritroid Öncül Hücre Çoğalması Üzerine Etkisi
- Pages
- 304–310
- DOI
- —
Abstract
Objective: Thalassemia is one of the genetic diseases that cause anemia and ineffective erythropoiesis. Increased levels of several inflammatory cytokines have been reported in ?-thalassemia and might contribute to ineffective erythropoiesis. However, the mechanism by which tumor necrosis factor-alpha (TNF-?) is involved in ineffective erythropoiesis in thalassemic patients remains unclear. The objective of this study is to investigate the effect of TNF-? on the erythropoietin (EPO) and erythropoietin receptor (EPOR) expression involved in proliferation of ?-thalassemia/hemoglobin (Hb) E erythroid progenitor cells compared with cells from healthy subjects. Materials and Methods: CD34-positive cells were isolated from heparinized blood by using the EasySep® CD34 selection kit. Cells were then cultured with suitable culture medium in various concentrations of EPO for 14 days. The effect of TNF-? on percent cell viability was analyzed by trypan blue staining. In addition, the percentage of apoptosis and levels of EPOR protein were measured by flow cytometry.Results: Upon EPO treatment, a higher cell number was observed for erythroid progenitor cells from both healthy participants and ?-thalassemia/Hb E patients. However, a reduction of apoptosis was found in EPO-treated cells especially for ?-thalassemia/Hb E patients. Interestingly, TNF-? caused higher levels of cell apoptosis and lower levels of EPOR protein in thalassemic erythroid progenitor cells.Conclusion: TNF-? caused a reduction in the level of EPOR protein and EPO-induced erythroid progenitor cell proliferation. It is possible that TNF-? could be involved in the mechanism of ineffective erythropoiesis in ?-thalassemia/Hb E patients
Özet
Amaç: Talasemi anemi ve inefektif eritropoeze neden olan genetik hastalıklardan birisidir. Enflamatuvar sitokinlerin bir çoğunun seviyelerinde artma ?-talasemide gösterilmiş olup, bu durum inefektif eritropoeze katkıda bulunabilir. Ancak, tümör nekrozlaştırıcı faktör-alfa'nın (TNF-?) talasemik hastalarda inefektif eritropoeze nasıl bir mekanizma ile neden olduğu bilinmemektedir. Bu çalışmanın amacı ?-talasemi/hemoglobin (Hb) E eritroid öncül hücrelerinde sağlıklı kontrollerin hücreleri ile karşılaştırıldığında TNF-?'nın eritropoetin (EPO) ve eritropoetin reseptör (EPOR) sunumu üzerine etkisinin araştırılmasıdır.Gereç ve Yöntemler: CD34-pozitif hücreler EasySep® CD34 seçim kiti yardımı ile heparinli kandan izole edildi. Hücreler 14 gün boyunca uygun kültür ortamında değişik EPO konsantrasyonlarında kültürde bekletildi. TNF-?'nın hücre canlılık yüzdesine etkisi tripan mavisi boyası ile incelendi. Bunun yanında, apopitoz yüzdesi ve EPOR protein seviyeleri akış sitometrisi ile ölçüldü.Bulgular: EPO tedavisi ile eritroid öncül hücrelerinin sayısında hem sağlıklı katılımcılarda hem de ?-talasemi/Hb E hastalarında artış olduğu görüldü. Ancak özellikle ?-talasemi/Hb E hastalarında EPO ile muamele edilmiş hücrelerde apopitozda azalma görüldü. İlginç olarak, TNF-? talasemik eritroid öncül hücrelerde hücre apopitoz oranında artmaya ve EPOR protein seviyelerinde azalmaya neden oldu.Sonuç: TNF-? EPOR protein düzeyi ve EPO ile uyarılmış eritroid öncül hücre çoğalmasında azalmaya neden oldu. ?-talasemia/Hb E hastalarında TNF-? inefektif eritropoez mekanizmasında yer alıyor olabilir