Zeytin Yaprağı Ekstrelerinin Karaciğer Kanseri Hücre Hatları Üzerine Genotoksik, Sitotoksik, Apoptotik ve Oksidan Etkilerinin Araştırılması

Investigation of the Genotoxic, Cytotoxic, Apoptotic, and Oxidant Effects of Olive Leaf Extracts on Liver Cancer Cell Lines

Muhammed Yunus BEKTAY,ERAY METİN GÜLER,Mustafa GÖKÇE,Mustafa Volkan KIZILTAŞ

Abstract

Amaç: Hepatoselüler karsinoma (HSK), en yaygın yedinci kanser türüdür ve kanserle ilişkili ölümlerde üçüncü sırada yer almaktadır. HSK’de tümör başlangıcına, ilerlemesine ve metastazlara neden olan mekanizmalar tam olarak bilinmemektedir. Bu çalışmada zeytin yaprağı ekstresinin (OLE) HSK hücreleri üzerine genotoksik, sitotoksik, apoptotik ve oksidan etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: H4IIE Rattus norvegicus hepatoma hücrelerine ve Rattus norvegicus sağlıklı karaciğer klon-9 hücrelerine etanol, aseton, diklorometan ve metanol içinde artan konsantrasyonlarda OLE’leri (250-2000 ppm) uygulanmıştır. Ekstrelerin sitotoksisitesi ATP testiyle, hücre içi reaktif oksijen türlerinin oluşumu florometrik yöntemlerle, genotoksik etkileri alkalen tekli hücre jel elektroforez (comet assay) yöntemiyle, apoptotik etkileri akridin turuncusu/etidyum bromür yöntemiyle ölçülmüştür. İnterlökin 1 beta ( IL-1β), IL-6 ve tümör nekroz faktörü alfa düzeyleri ELISA yöntemi ile belirlenmiştir. İstatistiksel test olarak ANOVA testi kullanılmıştır. Bulgular: OLE’nin apoptotik, genotoksik, sitotoksik ve oksidatif etkileri H4IIE hücrelerinde kontrole göre artan konsantrasyonlarla istatistiksel olarak anlamlı şekilde yükselmiştir (p<0,001). Sonuç: Bu çalışma, H4IIE kanser hücre hatlarında OLE’nin seçici sitotoksik aktivitesini gösteren ilk çalışmadır. OLE apoptozu indüklemiş ve H4IIE hücrelerine karşı anti-proliferatif ve pro-apoptotik özellikler göstermiştir. Kanserin önlenmesinde potansiyel nutrasötikler olarak önerilebilirler

Özet

Mechanisms underlying tumor onset, progression, and metastasis in the case of HCC have not been adequately studied. In this study, we aimed to investigate the genotoxic, cytotoxic, apoptotic and oxidant effects of olive leaf extract (OLE) on HCC cells. Materials and Methods: H4IIE Rattus norvegicus hepatoma cells and Rattus norvegicus healthy liver clone-9 cells were treated with the increasing concentrations of OLEs (250-2000 ppm) in ethanol, acetone, dichloromethane, and methanol. ATP cell viability, intracellular reactive oxygen species generation levels, double staining test with acridine orange/ethidium bromide, comet assay, levels of interleukin 1-beta (IL-1β), IL-6, and tumor necrosis factor alpha were measured. Significance was determined using ANOVA test. Results: Apoptotic, genotoxic, cytotoxic, and oxidative effects of OLEs increased with the increasing concentrations as compared to controls in H4IIE cells (p<0.001). Conclusion: This is the first study to show a significant and selective cytotoxic activity of OLEs in the selected H4IIE cancer cell lines. OLEs could selectively increase the apoptotic damage and show anti-proliferative and pro-apoptotic properties against the H4IIE cells. They could be recommended as potential nutraceuticals in the prevention of cancer.