Kronik Hepatit B’li hastalarda, FoxP3’ün siRNA-aracılıklı susturulması T-helper 1 (Th1) Th2 oranını artırmaktadır

siRNA-mediated knockdown of FoxP3 promotes the ratio of T-helper 1 (Th1) to Th2 in chronic hepatitis B patients

Abstract

To determine the effect of regulatory T cells on the ratio of Th1/Th2 differentiation in peripheral blood mononuclear cells of chronic hepatitis B patients, FoxP3, the essential transcription factor for Tcells differentiation and function, was knocked down by FoxP3 siRNA, which was affirmed by real-time polymerase chain reaction for decreased expression of FoxP3. Then, at different time points, comparing with control groups, we detected enhanced lymphocyte proliferation and up-regulated Th1-type cytokines, but down-regulated Th2-type cytokines by ELISA. Finally, to research the involved mechanisms, an increased ratio of T-bet/GATA-3 mRNA expression was found by real-time polymerase chain reaction. Our results suggest that siRNA-mediated knockdown of FoxP3 could regulate the immune balance of Th1/Th2 in chronic hepatitis B patients, which may be mediated partly by regulating transcription factors T-bet and GATA-3.

Özet

Kronik hepatit B’li hastaların periferik kan mononükleer hücrelerinde Th1/Th2 farklılaşma oranının düzenlenmesinde T hücrelerinin etkinliğinin saptanması için, T hücrelerinin farklılaşma ve fonksiyonunda esansiyel transkripsiyon faktörü olan FoxP3, FoxP3 siRNA ile susturulmuş ve FoxP3’ün azalmış ekspresyonu gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu ile gösterilmiştir. Ardı ndan, değişik zaman noktalarında kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, artmış lenfosit çoğalması ve Th1 – tipi sitokinlerde artış, ancak Th2 – tipi sitokinlerde ELİSA ile “down – regülasyon” saptanmıştır. Son olarak, etkin olan mekanizmaların tespiti için gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu ile T-bet/GATA-3 mRNA ekspresyonunun arttığı bulunmuştur. Bu sonuçlara göre, kronik hepatit B’li hastalarda FoxP3’ün siRNA – aracılıklı susturulması ile kısmen T-bet ve GATA-3 gibi transkripsiyon faktörlerinin düzenlenmesiyle, Th1/Th2 immün dengesi değiştirilebilir.