Journals / Turkish Journal of Gastroenterology / 2012 / Cilt: 23 - Sayı: 6
Mide kanseri dokularında yüksek çözünürlüklü erime eğrisi analizi ile dihidroprimidin dehidrogenaz geninde T85C polimorfizmi tespit edilmiştir
- Pages
- 652–657
- DOI
- —
Abstract
Background/aims: Dihydropyrimidine dehydrogenase is a key enzyme acting on the metabolic pathway of medications for gastric cancer. High-resolution melting curve technology, which was developed recently, can distinguish the wild-type dihydropyrimidine dehydrogenase gene from multiple polymorphisms by fluorescent quantitative polymerase chain reaction products in a direct and effective manner. Materials and Methods: T85C polymorphisms of dihydropyrimidine dehydrogenase in the peripheral blood of 112 Chinese gastric cancer patients were detected by real-time polymerase chain reaction combined with high-resolution melting curve technology. Primer design, along with the reaction system and conditions, was optimized based on the GenBank sequence. Results: Seventy nine cases of wild-type (TT, [70.5%]), 29 cases of heterozygous (TC, [25.9%]), and 4 cases of homozygous mutant (CC, [3.6%]) were observed. The result was completely consistent with the results of the sequencing. Conclusions: Real-time polymerase chain reaction combined with high-resolution melting curve technology is a rapid, simple, reliable, direct-viewing, and convenient method for the detection and screening of polymorphisms.
Özet
Giriş ve Amaç: Dihidroprimidin dehidrogenaz mide kanserinde kullanılan tedavilerin metabolizması için anahtar role sahip bir enzimdir. Yeni geliştirilen, yüksek çözünürlüklü erime eğrisi teknolojisi, doğal tip dihidroprimidin dehidrogenaz geni ile çoklu polimorfizmini, flöresan ile kantifiye zincirleme polimeraz reaksiyonu kullanarak doğrudan ve etkin bir şekilde ayırabilir. Gereç ve Yöntem: Dihidroprimidin dehidrogenaz T85C polimorfizmi 112 Çinli mide kanseri hastasının periferik kanında gerçek zamanlı zincirleme polimeraz reaksiyonu ve yüksek çözünürlüklü erime eğrisi teknolojisi kullanılarak tespit edildi. Primer üretimi, reaksiyon sistemi ve koşulları GenBank sekansı dikkate alınarak optimize edildi. Bulgular: Doğal tip 79 vakada (TT; %70.5), heterozigot 29 vakada (TC; %25,9) ve homozigot mutasyon 4 vakada (cc; %3,6) tespit edildi. Sonuçların sekans analizi ile tam uyumlu olduğu görüldü. Sonuç: Gerçek zamanlı zincirleme polimeraz reaksiyonu ile yüksek çözünürlüklü erime eğrisi teknolojisinin kombine edilmesi polimorfizmlerin tespit edilmesinde hızlı, kolay, güvenilir, doğrudan gözlemlenebilir bir yöntemdir.