Journals / Turkish Journal of Gastroenterology / 2011 / Cilt: 22 - Sayı: 4
D vitamini hepatik stellat hücrelerdeki serbest yağ asiti aracılı stres ligand ekspresyonunu azaltmaktadır
- Pages
- 400–407
- DOI
- —
Abstract
Background/aims: Hepatic stellate cells play an important role as the major source of fibrillar and non-fibrillar matrix proteins in the process of liver fibrosis. Natural killer cells have an anti-fibrotic effect through the killing of activated hepatic stellate cells. Major histocompatibility complex class I-related molecules, MICA and MICB, function as ligands for the NKG2D receptor and play an important role in hepatic stellate cells susceptibility to natural killer cells during hepatic inflammation. The aim of this study was therefore to investigate the effect of vitamin D2 and free fatty acids on stress ligands and pro-fibrotic activity in LX-2 cells and human primary hepatic stellate cells. Methods: LX-2 cells and primary human hepatic stellate cells were treated with vitamin D2 (10-6 M) and free fatty acids at different concentrations (0.25 mM, 0.5 mM, and 1 mM) for 24 hours, and expressions of the stress ligands MICA/B as well as of transforming growth factor-β, α-smooth muscle actin and collagen 1α were assessed by quantitative real time-polymerase chain reaction. Results: Treatment of cells with 0.5 mM and 1 mM free fatty acids induced α-smooth muscle actin and transforming growth factor-β expression in LX-2 cells. Moreover, 1 mM free fatty acids resulted in increased expression of MICA. Surprisingly, collagen 1α expression was reduced after addition of free fatty acids. MICA/B expression in primary hepatic stellate cells was not affected by free fatty acids treatment. Vitamin D2 treatment significantly downregulated the free fatty acids-induced expression of transforming growth factor-β and α-smooth muscle actin in LX-2 cells. Further, in hepatic stellate cells, a significant decrease in MICA/B mRNA with vitamin D2, independent of free fatty acids treatment, was detectable. Conclusions: These results indicate that vitamin D2 may reduce inflammatory and pro-fibrogenic activity of stellate cells in vitro.
Özet
Amaç: Hepatik stellat hücreleri karaciğer fibrozisinin ilerlemesinde fibriller ve fibril olmayan matriks proteinlerin major kaynağı olarak önemli rol oynamaktadır. Naturel killer hücreler hepatik stellat hücrelerin yok edilmesinde anti fibrotik bir etkiye sahiptir. Major histokompatibilite sınıf I zincir bağlantılı molekül, MICA ve MICB, NKG2D’nin reseptörünün ligandı olarak fonksiyon görmektedir ve hepatik inflamasyon sırasında natürel killer hücrelerinin hepatik stellat hücre duyarlılığında önemli bir rol oynamaktadır. Bu çalışmanın amacı LX-2 hücrelerinde ve insan primer hepatik stellat hücrelerinde vitamin D2 ve serbest yağ asidinin stres ligandları ve profibrotik aktivite üzerine olan etkilerini araştırmaktır.Yöntem: LX-2 ve primer insan hepatik stellat hücreleri 24 saat boyunca farklı konsantrasyonlarda (0,25 mM, 0,5 mM ve 1 mM) serbest yağ asidi ve vitamin D ile tedavi edildi ve kantitatif Real Time PCR cihazı ile stres liganları (MICA ve MICB) ve TGF-β, α-SMA, COL1α’nin ekspresyonu değerlendirildi. Bulgular: LX-2 hücrelerinde 0.5 mM ve 1 mM serbest yağ asidi ile hücrelerin tedavisi sonucunda α-SMA ve TGF-ß’nın ekspresyonunun indüklendiği, ilginç olarak, serbest yağ asidinin eklenmesinden sonra COL1α’nın ekspresyonunun azaldığı, primer hepatik stlellat hücrelerde MICA/B’nin ekspresyonunun serbest yağ asidi tedavisinden etkilenmediği bulunmuştur. LX-2 hücrelerinde vitamin D2 tedavisi serbest yağ asidi ile indüklenen TGF-α ve α-SMA’nın ekspresyonunu downregüle etmiştir. Yani, hepatik stellat hücrelerinde serbest yağ asidi tedavisinden bağımsız olarak vitamin D2 tarafından MICA/B’nin mRNA’sının önemli düzeyde azaldığı saptanmıştır. Sonuç: Bu sonuçlar in vitro ortamda vitamin D2’nin hepatik stellat hücrelerinin inflamatuvar ve profibrogenik aktivitesini azaltabildiğini göstermektedir.