Gaz Kromatografisi ve Spektrofotometri Yöntemleriyle İdrar ve Kan Örneklerinde Diklofenak Sodyum, İbuprofen ve Mefenamik Asit Tayini

Gas Chromatographic and Spectrophotometric Determination of Diclofenac Sodium, Ibuprofen, and Mefenamic Acid in Urine and Blood Samples

Nida S. JALBANI,Amber R. SOLANGİ,Muhammad Yar KHUHAWAR,Shahabuddin MEMON,Ranjhan JUNEJO,Ayaz Ali MEMON

Abstract

Amaç: Non-steroid anti-enflamatuvar ilaçlar (NSAID) akut ve kronik ağrı tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Etil kloroformat ile türevlendirme işlemini takiben diklofenak sodyum, ibuprofen ve mefenamik asit gibi NSAID’lerin belirlenmesi için alev iyonizasyon dedektörlü basit, hızlı ve güvenilir bir gaz kromatografisi (GC) yöntemi geliştirilmiştir.Gereç ve Yöntemler: GC koşulları, 3 dakika boyunca 150 °C kolon sıcaklığında DB-1 kolonundan (30 m x 0,32 mm id) elüsyon, ardından 280 °C’ye kadar 20 °C/dak olacak şekilde ısıtma ve 5 dakika bekleme olarak optimize edilmiştir. Azot akış hızı 2,5 mL/dk olarak ayarlanmıştır. Spektrofotometrik çalışmalar için absorbans, 200-500 nm dalga boyunda metanole karşı ölçülmüştür.Bulgular: Kalibrasyon eğrilerinin, her ilacın 0,4-0,6 μg/mL saptama limitleri ile 2-10 μg/mL konsantrasyon aralığında doğrusal olduğu saptanmıştır. Türetme elüsyonunun, ayırmanın ve miktar tayininin, %3,9’luk bağıl standart sapma ile tekrarlanabilir (n=3) olduğu bulunmuştur. Yöntem, farmasötik formülasyonlardan elde edilen ilaçların analizi için uygulandı ve analiz sonuçları, RSD’ler ile %0,5-3,9 arasında etiketli değerlerle uyumluydu. Sonuçlar ayrıca standart ekleme yöntemi ile doğrulanmıştır. Geri kazanım yüzdesi, deproteinize edilmiş insan serumu ve idrar örnekleri ile hesaplandı ve ilaçların geri kazanım yüzdesi, %3,1 içindeki RSD’ler ile %96-98 içinde elde edildi.Sonuç: Valide edilmiş bu yöntemin kısa analiz süresi içinde bulk ve dozaj formundaki NSAID’leri analiz edebildiği doğrulanmıştır. Yöntemin, biyolojik numunelerin analizi için de yararlı olduğu tespit edilmiştir.

Özet

Objectives: Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are widely used for the treatment of acute to chronic pain. A simple, fast, and reliable gas chromatographic (GC) method with flame ionization detection has been developed for the determination of NSAIDs such as diclofenac sodium, ibuprofen, and mefenamic acid after derivatization with ethyl chloroformate. Materials and Methods: The GC conditions were optimized as elution from a DB-1 column (30 mx0.32 mm id) at column temperature 150 °C for 3 min, followed by a heating rate of 20 °C/min up to 280 °C and a hold time of 5 min. The nitrogen flow rate was 2.5 mL/min. For spectrophotometric studies, the absorbance was measured against methanol at a wavelength of 200-500 nm.Results: The calibration curves were linear within 2-10 μg/mL with limits of detection of 0.4-0.6 μg/mL of each drug. The derivatization elution, separation, and quantitation were repeatable (n=3) with relative standard deviation (RSD) within 3.9%. The method was applied for the analysis of the drugs from pharmaceutical formulations and the results of the analysis agreed with labeled values with RSDs within 0.5-3.9%. The results were also confirmed by standard addition method. The percent recovery was calculated with spiked deproteinized human blood serum and urine samples and % recovery of the drugs was obtained within 96-98% with RSDs within 3.1%.Conclusion: The validated method proved its ability for the assay of NSAIDs in bulk and dosage form in a short analysis time. The method was also useful for the analysis of biological samples.