Hibiscus Sabdariffa L Sulu Ekstrelerini İçeren HPMC 6000 Jel Formülasyonunun Staphylococcus Aureus ATCC 25923 Büyümesi Üzerine İnhibitör Etkisi

Inhibitory Effect of Roselle Aqueous ExtractsHPMC 6000 Gel on the Growth of Staphylococcus Aureus ATCC 25923

Abstract

Amaç: Hibiscus sabdariffa L. yaygın olarak içecek ve bitkisel ilaç olarak kullanılan tıbbi bir bitkidir. Sulu ekstrelerindeki kompleks bileşikler, gram negatif ve pozitif bakterilerin büyümesini inhibe ederek antibakteriyel aktivite göstermiştir. Bu araştırmanın amacı, ekstre içeren hidroksipropil metilselüloz (HPMC) 6000 jelini formüle etmek, ekstrenin inhibe edici etkisini ve jel formülünün Staphylococcus aureus ATCC 25923’e karşı gösterdiği inhibitör etkiyi araştırmaktır. Gereç ve Yöntemler: Elüent olarak butanol: asetik asit: su (4:1:5) ve kloroform:etil asetat: formik asit (0,5:9:0,5) kullanılarak sırasıyla flavonoidleri ve polifenolleri analiz etmek amacıyla silika jel GF254 üzerinde ince tabaka kromatografisi gerçekleştirildi. 0,50, 0,25, 0,10, 0,05 ve 0,02 mg/mL konsantrasyonda çözelti elde etmek için sitrat tamponu içinde sulu ekstrenin seri seyreltilmesi yapıldı. Hibiscus sabdariffa’nın sulu ekstresinin (%3), çeşitli konsantrasyonlarda (%2, %3 ve %4) HPMC 6000 içeren jelleri formüle edildi. Bakteriyel test ve standart olarak sırasıyla Staphylococcus aureus ATCC 25923 ve gentamisin 25 ppm kullanılarak agar ortamına difüzyon agar yöntemi uygulandı. 37°C’de 24 saat inkübasyondan sonra, inhibitör aktivite, minimum inhibitör konsantrasyon (MIC) olarak ölçüldü. Bulgular: Hibiscus sabdariffa L.’nin sulu ekstresinin, flavonoid ve polifenol bileşikleri içerdiği ince tabaka kromatografisi-kromatogramı ile belirlendi. %3 HPMC 6000 ve %3 sulu ekstre içeren jel formülünün, 12,0 mg/mL konsantrasyonda 7,58 ppm gentamisin standardına eşdeğer olacak şekilde en düşük MIC değerine (6,0 mg/mL) sahip olduğu ve fiziksel özelliklerinin iyi olduğu bulunmuştur. Sonuç: Hibiscus sabdariffa sulu ekstresinin %3 (a/a) konsantrasyonda HPMC 6000 içeren jel formülasyonunda iyi fiziksel özellikler gösterdiği tespit edildi. Jel formülü, Staphylococcus aureus ATCC 25923’e karşı MIC 6,0 mg/mL değeri ile inhibitör aktivite gösterdi. En iyi formül olarak belirlenen formül 2’nin topikal preparatlarda kullanılabilmesi için ileri araştırmalara ihtiyaç vardır.

Özet

Objectives: Roselle (Hibiscus sabdariffa L.) is a medicinal plant commonly used as a beverage and herbal medicine. Complex compounds in theaqueous extracts have provided good antibacterial activity by which the growth of gram-negative and -positive bacteria is inhibited. The aims ofthis research were to formulate hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) 6000 gel containing the extract and investigate the inhibitory activity of theextract and its gel formula against Staphylococcus aureus ATCC 25923.Materials and Methods: Thin layer chromatography (TLC) on silica gel GF254 was used for analyzing flavonoids and polyphenols using butanol:acetic acid: water (4:1:5) and chloroforms: ethyl acetate: formic acid (0.5:9:0.5) as eluent, respectively. A serial dilution of aqueous extract powder incitrate buffer was made to obtain 0.50, 0.25, 0.10, 0.05, and 0.02 mg/mL solution. The roselle aqueous extract (3%) was formulated as a componentof gel containing HPMC 6000 in various concentrations (2%, 3%, and 4%). A diffusion agar method on two layers of nutrient agar media was appliedusing Staphylococcus aureus ATCC 25923 and gentamicin 25 ppm as bacterial test and standard, respectively. After incubation for 24 h at 37°C, theinhibitory effect was denoted by a clear zone around the hole and the inhibitory activity was measured as minimum inhibitory concentration (MIC).Results: The aqueous extract of Hibiscus sabdariffa L. contained flavonoid and polyphenol compounds based on the TLC chromatogram profile. Itwas found that the gel formula containing 3% HPMC 6000 and 3% aqueous extract gave a good physical characteristic and the lowest MIC (6.0 mg/mL), equivalent to 7.58 ppm of gentamicin standard at 12.0 mg/mL concentration.Conclusion: The HPMC 6000 at 3% (w/w) concentration in roselle aqueous extract gel preparation gave good physical characteristics. The gelpreparation exhibited inhibitory activity against Staphylococcus aureus ATCC 25923 shown by MIC 6.0 mg/mL. Formula 2 is recommended and shouldbe further investigated for implementation in topical preparations.