İlaç Ürün İmalat Ekipmanının Yüzeyindeki Dipiridamol Kalıntısının Sürüntü Örneklemesi ve Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi Tekniği Kullanılarak Tahmin Edilmesi için Temizleme Metodu Validasyonu

Cleaning Method Validation for Estimation of Dipyridamole Residue on the Surface of Drug Product Manufacturing Equipment Using Swab Sampling and by High Performance Liquid Chromatographic Technique

Abstract

Amaç: Temizlik validasyonu, temizleme sürecinin üretimden sonra ilaç maddesinin ekipman yüzeyinden kalıntılarını uzaklaştırdığından emin olmak için kullanılan bir prosedürdür. Dipiridamolün modifiye salım yapan kapsüllerinin üretiminden sonra ekipman yüzeyinden alınan sürüntü örneklerde dipiridamolun kantitatif tahmini için basit, hassas, kararlı ve kesin bir yüksek performanslı sıvı kromatografisi yöntemi geliştirilmiştir. Gereç ve Yöntemler: Yöntem, hipersil BDS C18 (150×4,6 mm, 5 µm) kolonu kullanılarak hareketli faz içeren tampon (potasyum dihidrojen fosfat tamponu, pH 7,0±0,05) ve metanolün 30:70 (h/h) oranında kullanılmasıyla geliştirilmiştir. Akış hızı 1,5 mL/min, kolon sıcaklığı 45°C ve enjeksiyon hacmi 5 µL olarak belirlenmiştir. Bulgular: Yöntem valide edilmiştir ve özgünlük çalışması, kör ve sürüntü körünün dipiridamol alıkonma zamanı ile girişim göstermediğini kanıtlamak için gerçekleştirilmiştir. Deteksiyon sınırı ve kantifikasyon sınırı bir seri doğrusallık çözeltisi kullanılarak belirlenmiştir ve sırasıyla 0,041 µg/mL ve 0,124 µg/mL olarak bulunmuştur. Yöntemin kesinliği kantifikasyon sınırında %8,6 relatif standart sapma (RSD), yöntem kesinliği %0,2 RSD ve dayanıklılığı %0,3 RSD bulunmuştur. Yöntem 0,13 µg/mL ile 21,80 µg/mL konsantrasyonu aralığında kesin bulunmuştur ve geri kazanım sonuçları kabul edilebilirlik kriterlerini karşılamaktadır. Yöntemin doğrusallığı 0,12 µg/mL ile 20,14 µg/mL arasında bulunmuştur ve bulunan r2 değeri 0,997’dir. Akış hızı, dalga boyu, kolon sıcaklığı, tampon pH’sı ve hareketli faz oranındaki değişimler için dayanıklılık çalışması yapılmıştır ve tüm sistem uygunluk parametreleri karşılanmıştır. Sonuç: Yöntem validasyonu, düzenleyici gereklilikler ve kurallara göre gerçekleştirilmiştir. Validasyon parametreleri kabul kriterlerini karşılamıştır ve önerilen bu yöntem amaçlanan sürüntü rutin analizi için kullanabilir.

Özet

Objectives: Cleaning validation is the procedure used to ensure that the cleaning process has eliminated the residues of drug substance from on theequipment surface after manufacture. A simple, sensitive, robust, and accurate high performance liquid chromatographic method was developed forthe quantitative estimation of dipyridamole in swab samples obtained from the equipment surface after the manufacture of dipyridamole modifiedrelease capsules.Materials and Methods: The method was developed by using a Hypersil BDS C18 (150×4.6 mm, 5 µm) column with mobile phase containing amixture of buffer (potassium dihydrogen phosphate buffer, pH 7.0±0.05) and methanol in the ratio of 30:70 v/v. Flow rate was 1.5 mL/min, columntemperature was 45°C, and injection volume was 5 µL.Results: The method was validated and a specificity study was conducted to prove that there was no interference from blank and swab blank at theretention time of dipyridamole. The limit of detection and limit of quantification (LOQ) were established by using a series of linearity solutions andwere found to be 0.041 µg/mL and 0.124 µg/mL, respectively. The method precision at the LOQ level was 8.6% relative standard deviation (RSD),method precision was 0.2% RSD, and ruggedness was 0.3% RSD. The method was accurate from the concentration of 0.13 µg/mL to 21.80 µg/mL and the recovery results met the acceptance criteria. The linearity of the method was found from 0.12 µg/mL to 20.14 µg/mL and the r2 valuewas 0.997. The robustness for the flow rate, wavelength, column temperature, buffer pH, and mobile phase ratio variations was tested, and all thesystem suitability parameters were met.Conclusion: The method validation was performed as per the regulatory requirements and guidelines. The validation parameters met the acceptancecriteria and the proposed method can be applied for the intended routine swab analysis.