A New Spectrophotometric Method For Quantitative Determi nation of Levodopa

Abstract

In this work a new spectrophotometric method for quantitative determination of levodopa has been developed. The red - orange color produced by the reaction between levodopa and benzhydrazide, p-nitrobenzhydrazide or p-aminobenzhydrazide in alkaline media is used for spectrophotometric determination in the visible region. In this method, 0.5 ml hydrazide reagent is added to 10 ml of levodopa solution diluted with hydrochloric acid, 0.40 ml of 0.3N sodium hydroxide solution is added for benzhydrazide, 0.70 ml of 5 w / v sodium hydroxide solution is added for p-nitro or p-aminobenzhydrazide. The waiting period, wavelengths, E 1 2e e and the concentrations in accordance Beer's Law are dependent to the reagents used. Data obtained are 35 mins, 480 nm, 646, 0.5-15 mcg / ml for benzhydrazide, 10 mins, 490 nm, 724, 0.5-20 mcg/ml for p-nitrobenzhydrazide and 40 mins, 490 nm, 798, 0.5-14 mcg/ml for p-aminobenzhydrazide respectively. The solutions should be allowed to keep at room temperature for all three reagents. Measurements are made against the reagent blanks, prepared under the same conditions. The variability (standart deviation, confidence limites with o .95 probability) and reliability (standart error, and relative error) of this method have been calculated for three reagents at different concentrations using ten samples for each experiment. It is found that p-nitrobenzhydrazide is reliable from other reagents to the reaction time, the limits of concentrations of levodop

Özet

Bu çalışmada Levodopanın miktar tayini için yeni bir spektrofotometrik analiz metodu geliştirilmiştir. Levodopa benzhidrazid, p-nitrobenzhidrazid veya p-aminobenzhidrazidle alkali ortamda kırmızı-turuncu renk vermektedir; bu renk yardımı ile spektrumun görünen alanında aşağıdaki gibi çalışılarak miktar tayini yapılmıştır. Levodopanın seyreltik hidroklorik asidli 0.5-20 mcg / ml lik çö- zeltisinin 10.0 ml si üzerine 0.5 ml beliteç çözeltisi konur; belirteç olarak benzhidrazid kullanıldığında 0.40 ml 0.3N sodyum hidroksit, p-nitro ve p-aminobenzhidrazid için 5 a / h sodyum hidroksit çözeltisi ilâve edilir. (pH:12.4). Bekletme süresi oda sıcaklığında-absorbansın ölçüldüğü dalga boyu E%j 2 e eve Beer Kanununa uygun konsantrasyonlar belirtece göre değişmekte olup, benzhidrazid, p-nitro p-aminobenzhidrazid sıra ile 35 dakika, 480 nm, 646,0.5-15 mcg/ ml; 10 dakika, 490 nm, 724, 0.5-20 mcg/ml ve 40 dakika, 490 nm, 798, 0.5-15 mcg/ml dir. Ölçmeler aynı şekilde hazırlanmış, levodopa ihtiva etmeyen şahit karşısında yapılır. Geliştirilen yöntemin duyarlık (değişme katsayısı, standart sapma ve 95 olasılıkla güven sınırları) ve doğruluğu (bağıl hata ve standard hata) üç belirteç içinde değişik konsantrasyonlarda onar ölçüm üzerinden hesap edilmiştir. Bulgulara göre p-nitrobenzhidrazid, reaksiyon süresi, Beer Kanununa uyan konsantrasyonunun sınırının genişliği, duyarlık ve doğruluk bakımından benzhidrazid ve p-aminobenzhidrazide üstünlük göstermiştir. Geliştirilen yöntem düşük konsantrasyonlarda çalışmaya olanak verdiği için literatürde bildirilen diğer spektrofotometrik yöntemlerden üstündür. En azından onlardan herhangi biri yerine kullanılabilir. Yöntem farmasötik preparatlara başarı ile uygulanmış, buna karşı- lık kan ve idrarda doğrudan doğruya levodopa tayinine olanak vermemiştir.