Journals / Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi / 1997 / Cilt: 9 - Sayı: 1
The preparation of conjugate for the immunofluoresans techniques of the diagnosis of poultry diseases.
- Pages
- 139–148
- DOI
- —
Abstract
The method of immunofluorescence or fluorescent antibody is an inununological teclınique which applies antibodies labelled with a fluorcscent dye in order to visualize, identify or locate antigens. The binding of labelled antibody its antigen is a specific antigen-antibody rection. The IF technique combines the sensitivity and specifity of an inununological reaction with the precision of microscopy ( 1 5). The IF method which was elaborated by Coons ct al (13) in 1942 and was improved later, has come to be used very widely in recent years especially in some of the western countries It is used in microbiology, immunology and general biology. The binding of antibadies to antigens may be visualized in immunofluoresccnce. In this study, we have produced conjugate for indirect FAT methods for poultry diseases. With the aim of making the conjugate for diagnosis of poultry diseases and research activities in Turkey will be available more easily. A method of FITC labelled anti IgG is described in here. The technique consists in the preperation of chicken lgG, immunization of producer animals, the preparation of rabbit antichicken IgG and the conjugation of rabbit antichicken IgG with FITC and fınal treatment of the preparation. The quality of the fınal product is regularly tested in standart methods.
Özet
İmmunfloresan veya floresan antikor metodu (IF) antijenleri identifiye etmek antijenlerin yerini tayin etmek antikor tayin etmek ve mikroskop altına görünür hale getirmek için işaretlenmiş antikor veya antijenlere uygulanan bir tekniktir. işaretli antikorların kendi antijenine bağlanması, spestifik bir antijen-antikor reaksiyonudur. IF tekniği, bir immunolojik reaksiyonun hassasiyet özelliğini mikroskop doğruluğu ile birleştirir ( 1 5). Antijen-antikor bağlanmaları immunfloresan tekniğinde değişik metodlarla yapılabilir. Direkt ve indirekt teknikleri özellikle ve hassasiyet ve yönünden karşılaştırıldıklarında, floresan madde ile işaretli antiserumla yapılan direkt teknikleri, anti inmmnoglobulin kullanarak yapılan tekniklerden 2 kat daha az hassas olduğu ortaya konulmuştur (4). IF metodu ilk defa Coons ve arkadaşları tarafından 1942 yılında bulunmuş ( 13) ve daha sonra geliştirilerek geçtiğimiz yıllarda ve günümüzde yaygın olarak mikrobiyoloji, viroloji, immunoloji ve biyoloji alanlarında kullanılmaktadır. Şimdiye kadar ülkemizde özellikle tavuk hastalıklarının teşhisinde kullanımı, tekniğin ikinci safhasında kullanılan konjugeytin bulunmaması ve üretilmemesi yüzünden sınırlı kalmıştır. Keza bu tür reagentleri üreten şirketlerde az sayıdadır. Bu çalışmada tavuk hastalıklarının indirekt floresan antikor tekniği ile teşhis edilmesi amacıyla konjugeyt üretimi yapılmıştır. Ülkemizde tavuk hastalıklarının teşhisi ve araştım1a çalışmalarında dışarıdan oldukça zor temin edilerek kullanılan konjugeytin üretilmesiyle bu test daha yaygın bir şekilde kullanılacaktır. Bu araştım1ada tavşan antitavuk iımnunoglobulinin floresan izotiyosiyanat ile işaretlenme metodu çalışılmıştır. Çalışma ayrıca; tavuk lg G elde edilmesini, anti-antikor üretecek tavşanların immunizasyonunu tavşan anti-tavuk IgG elde edilmesini, FITC ile işaretlenmesi tekniklerini kapsamaktadır. Tavuk Hastalıklannda İmınunofloresans-BAYRAKTAR-BAYRAKTAR-DAGISTAN-ALAY