Roflumilastın Tablet Formülasyonlarda Miktar Tayini için Yeni Bir Floresans Dedeksiyonlu Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi Yöntemi

A Novel High-performance Liquid Chromatography Method with Fluorescence Detection for the Quantification of Roflumilast in Tablet Formulations

Abstract

Amaç: Bu çalışmada roflumilastın tablet formülasyonlarda miktar tayini için yeni bir floresans dedektörlü yüksek performanslı sıvı kromatografisi yönteminin geliştirilmesi amaçlandı. Yöntemler: Ayırma işlemleri 40 ºC’de bir C18 analitik kolon (250x4,6 mm, 5 µm) ile gerçekleştirildi. Mobil faz olarak %20 sulu o-fosforik asit çözeltisi (%0,08) ve %80 metanol içeren bir sistem kullanıldı ve izokratik elüsyon uygulandı. Eksitasyon ve emisyon dalga boyları sırasıyla 290 ve 380 nm olarak belirlendi. Bulgular: Doğrusal aralık 1,25-10,00 μg/mL olarak tespit edildi. İç standart olarak irbesartan kullanıldı. Gözlenebilme ve tayin sınırları sırası ile 0,07 μg/mL ve 0,22 μg/mL idi. Yöntemin kesinlik ve doğruluğu 1,25, 5,00 ve 10,00 μg/mL konsantrasyonlarındaki standart çözeltiler ile belirlendi. Yüzde geri kazanım düşük, orta ve yüksek konsantrasyonlarda standart eklenen tablet çözeltilerinin analiz sonuçları ile hesaplandı. Yöntemin sağlamlığı akış hızı, mobil faz bileşimi ve kolon sıcaklığı parametreleri ile incelendi. Sonuç: Önerilen metot roflumilastın tablet formülasyonlarda yüksek kesinlik ve doğruluk ile tayini için başarılı bir şekilde uygulandı

Özet

Objective: This study aims to develop and validate a novel highperformance liquid chromatography method with fluorescencedetection for quantifying roflumilast in tablet formulations.Methods: Separations were achieved by a C18 analytical column(250x4.6 mm, 5 µm) at 40 ºC. Isocratic elution accompanied by amobile phase comprising 20% aqueous o-phosphoric acid solution(0.08%) and 80% methanol was applied. The excitation and theemission wavelengths were 290 and 380 nm, respectively.Results: The linear range was 1.25-10.00 μg/mL. Irbesartanwas used as the internal standard. The limits of detection andquantification were 0.07 μg/mL and 0.22 μg/mL, respectively.The precision and accuracy of the method was determined at theconcentrations of 1.25, 5.00 and 10.00 μg/mL. The recoverypercentage was calculated by the tablet solutions spiked at low,middle and high concentrations. The robustness of the method wastested in terms of flow rate, mobile phase composition and columntemperature.Conclusion: The proposed method was successfully applied fordetermining roflumilast in tablet formulations with a high precisionand accuracy